本发明专利技术涉及识别天然的膜联蛋白Ａ３的新抗体。这些抗体适宜于诊断性及治疗性应用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】识别天然的膜联蛋白A3的新抗体
本专利技术涉及识别天然的膜联蛋白A3的新抗体。这些抗体适宜于诊断性及治疗性应用。
技术介绍
之前的研究显示，ANXA3显著相关于前列腺疾病及前列腺癌的进展及各阶段。尚且，对人前列腺中ANXA3的作用及生物学知之甚少。迄今已显示，ANXA3所谓的外来体的部分，从各种上皮释放的小囊泡。有迹象表明此现象(其是ANXA3的诊断性表现的基础)是由于前列腺癌中自身免疫的复杂的调节。用于治疗或诊断前列腺癌及其他泌尿生殖道上皮癌的蛋白生物标记描述于US 2005 130 876，WO 03 086 461，WO 2005 078 124，EP 05011 042. 8 及 EP 05 026 092.6。 将这些文献的内容通过弓I用并入本文。US 60/812，089及US 60/859，489公开了癌的诊断，其中用高度特异性单克隆抗体分析样品中膜联蛋白A3的存在和/或量。将这些文献的内容通过引用并入本文。尽管ANXA3已知为前列腺癌的标记物，及有关组织切片中良性，恶变前及恶性病情之间的差异诊断的方法的特异性抗体可用，但通过这些抗体测量尿及压出尿中的ANXA3 遇到惊人的困难。尿中"天然的"ANXA3的构象使得目前可用的在蛋白印迹或组织染色中高度特异性的抗体仅检测蛋白级分。此可能是由于外来体/前列腺小体中ANXA3的折叠导致对于特异性蛋白识别重要的表位非-接近性。已探究这些表位及详细描述于之前专利申请。
技术实现思路
本研究的目的旨在研究体液(例如尿及压出尿)中天然的ANXA3的定量丰度。本专利技术发现使用之前描述的具有预后关联性的抗ANXA3-抗体的尿中ANXA3的有效检测仅在采用变性条件及蛋白印迹技术中才可能。无这些之前描述的抗体在基于ELISA 的测试中工作良好，其中压出尿在"天然的"条件下测试。意外地，我们接着组成ANXA3的完全特异性"抗体-反应性表面"及之前描述的表位，发现，在尿，压出尿及其他体液(如血浆或血清)中识别"天然的"ANXA3的抗体具有特异性识别天然的ANXA3的额外的表位。在第一方面，本专利技术涉及识别天然的膜联蛋白A3 (尤其是天然的人膜联蛋白A3) 的抗体。这些抗体能在非-变性条件下(即在体液(例如尿及压出尿)中)与ANXA3特异性结合。在第一优选的实施方式中，本专利技术涉及识别天然的膜联蛋白A3的抗体，其针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列59 67中的表位EYQAAYGKE(SEQ ID NO :1)，或所述抗体的抗原-结合片段。所述抗体之特定例选自3(i)抗体· TGC42、參TGC43、或· TGC49,(ii)与来自⑴的抗体具有相同的抗原结合位点的抗体，及(iii)所述抗体的抗原-结合片段。还优选的实施方式涉及识别天然的膜联蛋白A3的抗体，其针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列1 106中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。例如，此抗体可针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列1 34中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。或者，此抗体可针对人膜联蛋白A3的氨基酸序列35 106中的构象表位，或所述抗体的抗原-结合片段。所述抗体的特定例选自(i)抗体· TGC44、或· TGC48,(ii)与来自(i)的抗体具有相同的抗原-结合位点的抗体，及(iii)所述抗体的抗原-结合片段。在又一实施方式中，本专利技术的抗体选自(i)抗体 TGC42，TGC43, TGC44, TGC45, TGC46, TGC47, TGC48 或 TGC49，(ii)与来自(i)的抗体具有相同的结合位点的抗体，及(iii)与来自(i)或(ii)的抗体识别天然的人膜联蛋白A3上相同的表位的抗体， 及(iv)所述抗体的抗原-结合片段。将产生抗体TGC42 (DSM ACC 2972)，TGC43 (DSM ACC 2970)，TGC44 (DSM ACC 2976)，TGC45(DSM ACC 2974)，TGC46(DSMACC 2975)，TGC47(DSM ACC 2977)，TGC48(DSM ACC 2971)及TGC49(DSM ACC 2973)的杂交瘤细胞系根据布达佩斯条约于2008年9月17日保藏在DSMZ(德意志微生物和细胞培养物保藏中心，Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und ZellkulturenGmbH), Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunschweig。本专利技术的抗体可为单克隆抗体，嵌合抗体，人源化的抗体，人抗体或重组抗体，例如单链抗体或所述抗体的抗原-结合片段(例如蛋白水解片段或重组单链抗体片段)。抗体在医学中有用，尤其是用于人医学。更具体而言，抗体可用于诊断性或治疗性应用。最优选，抗体用于诊断癌，例如前列腺癌。有利地，本专利技术的抗体用于在天然的条件下进行的诊断性测定，例如捕获测定，例如ELISA，其中测定天然的膜联蛋白A3的存在和/或量。对于治疗性及诊断性应用，可将本专利技术的抗体缀合于如本领域所知的效应基团或标记基团。效应基团可例如选自细胞毒性基团或化合物，例如化学治疗剂或放射性核素。标记基团可选自任何已知的标记基团，例如荧光基团，发光基团，酶标记物，放射性标记物等。 效应子或标记基团与抗体的偶联可根据本领域中已知的技术进行。在其他方面，本专利技术涉及诊断癌(优选前列腺癌)的方法，其中分析体液样品中天然的膜联蛋白A3的存在和/或量。4优选地，本专利技术的诊断性方法涉及通过与如上所述的抗体反应来检测天然的膜联蛋白A3，尤其是天然的人膜联蛋白A3。样品优选是体液，例如尿或压出尿。可根据本专利技术诊断的癌优选是泌尿生殖和/或胃肠道癌，例如前列腺癌，膀胱癌， 肾癌，尿道癌，卵巢癌，子宫癌或结肠癌。尤其是，癌是上皮癌。在尤其优选的实施方式中， 癌是前列腺癌。在优选实施方式中，本专利技术包括疾病阶段和/或预后评估的差异诊断。例如，本专利技术允许选自下列的疾病阶段的差异诊断⑴良性病情，尤其是良性前列腺病情，例如良性前列腺增生(BPH)，纤维化及慢性前列腺炎，(ii)恶变前病情，例如各阶段(PIN-1 3)的前列腺上皮内瘤形成，包括高度前列腺上皮内瘤形成(HGPIN)，和/或(iii)恶性病情，例如前列腺癌，尤其是通过Gleason等级评定指定的进展的状态中的晚期前列腺癌。更优选地，本专利技术允许一方面良性或恶变前病情与另一方面恶性病情之间的差异诊断。在本专利技术的优选实施方式中，测定样品(其可为体液或组织样品)中天然的ANXA3 的存在，量和/或分布。需知，可对单个组织样品或对不同的样品(例如来自相同的受试者的体液样品及组织样品)测定存在，量及细胞内定位。样品中高量的天然的ANXA3 (例如对应于组织样品的强染色)主要指示良性病情。 中等/低量的天然的ANXA3 (例如对应于组织样品的弱/中等染色)指示恶变前病情或到恶性病情的早期/立即早期阶段。样品中天然的ANXA3的缺乏指示恶性病情，主要指示进展的状态(例如立即或晚期阶段)中的恶性病情。囊泡(例如外来体和/或前列腺小体)中有天然的ANXA3主要指示良性或恶变前病情。这些囊泡可从尿或其他体液通过差异离心得到，因此本专利技术涉及检测所述体液的任何级分中的天然的ANXA3。而且，本专利技术的方法可含盖测定本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．识别天然的膜联蛋白Ａ３的抗体，其针对人膜联蛋白Ａ３的氨基酸序列５９～６７中的表位：ＥＹＱＡＡＹＧＫＥ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１），或所述抗体的抗原－结合片段。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：S·珀兹纳诺维克，
申请(专利权)人：普罗迪奥塞斯股份公司，
类型：发明
国别省市：DE
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。