通过调控膜联蛋白－１对自身免疫疾病的治疗制造技术

本发明专利技术提供了一种特异性结合分子，其能够与膜联蛋白－１（Ａｎｘ－Ａ１）结合，用于治疗Ｔ细胞介导的疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及通过调控膜联蛋白-I(Armexin-I)的活性治疗T细胞介导的疾病的方法。
技术介绍
自身免疫疾病是免疫系统功能失常引起的慢性致残病变。在大部分情况中，它们是通过T细胞对存在于抗原呈递细胞(APCs)的MHC分子环境中的自身抗原失控的应答所启动的。已经公开了几种参与自身免疫疾病发病机制的因素，包括环境，遗传和病毒因素， 具有一个总体特征T细胞的过度反应性(hyperresponsivity)。糖皮质激素(GCs)常用于治疗多种慢性自身免疫疾病，因为它们具有同时阻断固有和适应性免疫应答的能力。近10年的研究，或本专利技术人和其他研究团队所进行的研究都表明，GC对固有免疫反应的炎症效应是由被称为膜联蛋白-I(Anx-Al)的蛋白所介导的。 已证实这种蛋白在大量细胞类型中发挥自稳调节，包括中性白细胞(neutrophils)，巨噬细胞和内皮细胞。然而，经常被忽视的一方面是Anx-Al在适应性免疫反应中的作用。考虑到 Anx-Al已被提出作为一种GC药理效应的第二信使，令人激动不已。本专利技术人之前已指出了 Anx-Al通过调控T细胞受体(TCR)信号的强度，在T细胞中发挥自稳作用(D' Acquisto et al.，Blood 109 :1095-1102,2007) 而且，本专利技术人已指出高水平的Anx-Al会降低T细胞激活的阈值并偏好分化成Thl细胞，而Anx-Al缺陷型小鼠显示出受损的T细胞激活和增强的向Th2细胞的分化 (D' Acquisto et al.，Eur. J. Immunol. 37 :3131-3142,2007)。WO 2005/027965描述了所发现的通过凋亡中性白细胞递送抗炎症信号至树突细胞的机制，并鉴别了干扰此过程的抗体。特别是，WO 2005/027965描述了鉴别作为信号分子的Anx-1，据称其被凋亡中性白细胞表达，以抑制树突细胞的激活和成熟。WO 2005/027965 提出了称为DAC5(凋亡细胞检测器Nr. 5，Detector of Apoptotic Cell)的抗体通过树突细胞的吞噬作用来识别并阻断呈递于凋亡中性白细胞表面上的Anx-I的抗炎症作用。而WO 2005/027965指出了通过靶向这种凋亡细胞并通过引发炎症应答将其清除来治疗多种疾病的可能性，但并未论述Anx-I在T细胞激活中的作用。WO 2005/027965声称膜联蛋白在正经历凋亡的细胞上表达(参见例如第8页，第 6-7和四-30行)，以及这种膜联蛋白呈递于这些细胞的表面上(参见例如第6页，第10-11 行和第8页，第16-17行)。然而，两个独立的研究(Maderna et al.，J Immunol.，174 3727-3733,2005 ；Scannell et al.，J Immunol.，178 :4595_4605，2007)显示了凋亡细胞包括中性白细胞会释放膜联蛋白-1，而不会表达蛋白并将其呈递在细胞表面。因为膜联蛋白-1是从细胞释放的，所以无法主张DAC5仅仅鉴别在其表面表达蛋白的凋亡细胞，因为抗体也会鉴别释放的膜联蛋白-1。而且，WO 2005/027965主张了将在其细胞膜上表达膜联蛋白_1的凋亡中性白细胞与用LPS激活的树突细胞共孵育，导致了 TNF- α分泌的抑制和激活标记物⑶83，⑶86和HLA-DR的上调，以及在该培养物中添加DAC5转变了表达膜联蛋白_1的凋亡中性白细胞的抑制作用(第5页，第31行至第6页第8行)。来自本专利技术人的数据(Huggins et al., FASEB J. 2008，印刷中)证实了用LPS刺激会使树突细胞释放Αηχ-1，因而WO 2005/027965 所述的DAC5会与外化在中性白细胞上的Anx-I以及树突细胞释放的膜联蛋白_1结合。而且，本专利技术人发现了在树突细胞中缺乏膜联蛋白-1会造成成熟/激活标记物的增强表达和炎症细胞因子，例如TNF-α和IL-I β和IL-12的产生。因此，WO 2005/027965所述的抗体DAC5应该会影响树突细胞的成熟和激活，和之后的免疫应答的调控。为了支持这些，本专利技术人显示了将Anx-Al树突细胞和天然的T细胞在混合淋巴细胞反应(MLR)中共培养，表现出诱导T细胞增殖或IL-2和IFN-Y产生的能力明显降低。因而，阻断Anx-Al在树突细胞中功能的试剂应该会降低它们刺激强有力的T细胞介导免疫应答的能力。因此，WO 2005/027965中涉及的抗体不适合用于治疗在该专利申请中所涉及的疾病。
技术实现思路
本专利技术提供了能够与膜联蛋白-I(Anx-Al)结合的特异性结合分子在T-细胞介导的疾病的治疗中的用途。根据本专利技术的第一方面，提供了能够与膜联蛋白-I(Anx-Al)结合的特异性结合分子，其可用于T-细胞介导的疾病的治疗。本专利技术人之前阐明了 Anx-Al调控T细胞受体(TCR)信号的强度，而且高水平的 Anx-Al降低T细胞激活的阈值并偏好分化成Thl细胞。本专利技术人目前鉴别了膜联蛋白途径，和保障信号，作为治疗T-细胞介导的疾病的封闭靶点。这些疾病包括那些异常的T细胞激活，例如多种自身免疫疾病，以及那些期望的T细胞偏好分化成Thl而不是Th2细胞的疾病。本专利技术利用了能够与膜联蛋白-1 (Anx-Al)结合的特异性结合分子。膜联蛋白是一组钙和磷脂结合细胞蛋白，也称为脂皮质蛋白。膜联蛋白家族有13 个成员，包括膜联蛋白Al，膜联蛋白A2和膜联蛋白A5。膜联蛋白Al也称为膜联蛋白_1，并在本文中表示为“Anx-Al”。膜联蛋白-I(Anx-Al)是37_kDa蛋白，最初被描述为糖皮质激素活动的介导子。最近几年的证据显示了 Anx-Al通过调控T细胞受体(TCR)信号的强度在适应性免疫系统特别是T细胞中发挥自稳作用。Anx-Al在体内固有免疫系统细胞中充当炎症的内源下调因子。图IA是显示Anx-Al三维结构的连续剖面图。共有八个编码Anx-Al的人核苷酸序列。其中，仅有四个被翻译因而有四个Anx-Al 同工型(isoform)，被指定为 ANXA1-002，ANXA1-003，ANXA1-004 和 ANXA1-006。这些序列可从 Ensembl 网站(www, ensembl. org)获得，被指定为 0TTHUMT00000052664 (ANXA1-002)， 0TTHUMT00000052665 (ANXA1-003)，0TTHUMT00000052666 (ANXA1-004)禾口 0TTHUMT00000052668 (ANXA1-006)。图 2a 显示了人膜联蛋白-1 (Anx-Al)的一个同工型ANXA1-003的氨基酸和核苷酸序列。而图2b，2c和2d分别显示了同工型ANXA1-002， ANXA1-004和ANXA1-006的氨基酸序列。如图2所观察到的，同工型ANXA1-002，ANXA1-004 和ANXA1-006是ANXA 1-003的短剪接变体(variant)，或是具有少量氨基酸变化的 ANXA1-003 变体。大量研究表明称为Ac. 2-26的Anx-Al的N末端肽充当了整个蛋白的生物活性替代物(参见例如 Lim et al. , Proc Natl Aca本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种能够与膜联蛋白－１结合的特异性结合分子，其特征在于，该分子可用于治疗Ｔ细胞介导的疾病。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·佩雷蒂，
申请(专利权)人：玛丽皇后和威斯特弗尔德学院，
类型：发明
国别省市：GB