基于含吸附类毒素和含多糖抗原微粒体的免疫原性组合物制造技术

本发明专利技术揭示了一种含有微粒体的免疫原性组合物，其吸附有类毒素抗原和／或含多糖的抗原。所述免疫原性微粒体组合物包括（ａ）包含生物可降解聚合物的聚合物微粒体；（ｂ）吸附于微粒体上的抗原，所述抗原选自下组：（ｉ）类毒素抗原，如破伤风类毒素、白喉类毒素、或它们的组合物；和／或（ｉｉ）含多糖的抗原，如Ｈｉｂ多糖抗原、含多糖和多肽区域的Ｈｉｂ结合抗原、脑膜炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的脑膜炎球菌结合抗原、肺炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的肺炎球菌结合抗原、或它们的组合物；以及（ｃ）药学上可接受的赋形剂。生物可降解聚合物可为例如，选自以下组的聚合物：聚（α－羟基酸）、多羟基丁酸、聚己内酯、聚原酸酯、聚酐和聚氰丙烯酸酯。还揭示了通过给予宿主动物这些组合物，以对抗病原生物体感染的免疫方法以及刺激免疫应答的方法。还揭示了生产上述微粒体组合物的方法，所述方法包括形成水包油包水乳剂乳剂，所述乳剂包括水、有机溶剂、生物可降解聚合物，然后从乳剂中去除有机溶剂以形成微粒体，其后将类毒素和／或含多糖的抗原吸附到微粒体上。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于含吸附类毒素和含多糖抗原微粒体的免疫原性组合物相关申请的说明本申请要求享有申请于2003年6月2日的美国临时专利申请第60/475,010号的优先权，该申请全文引入本文作为参考文献。本申请还要求享有申请于2003年10月21日的美国临时专利申请第60/513,074号的优先权，该申请全文引入本文作为参考文献。专利
本专利技术涉及具免疫原性的药学组合物，具体为疫苗组合物。
技术介绍
亚单位疫苗(subunit vaccines)的出现，包括多肽、多糖、结合物(conjugate)和DNA疫苗，增进了对安全和有效的含佐剂组合物的需求。目前，在美国最常用的佐剂是明矾(alum)佐剂(即铝盐，如氢氧化铝和磷酸铝)。目前，只有明矾佐剂获得美国卫生和人类服务部，美国食品与药物管理局(U.S.Department of Health and Human Services，Food and DrugAdministration(FDA))用于人类的许可。例如，可提供的各种白喉-破伤风疫苗均是将白喉类毒素和破伤风类毒素吸附到铝盐上。虽然铝佐剂被证实具有安全性已有多年，这些佐剂有时却会涉及到局部反应。例如，种痘后肉芽肿(post-vaccination granulomas)是众所周知的与铝-吸附疫苗相关的反应。还已使用了具有吸附或嵌入(entrapped)抗原的微粒载体，试图引发充分的免疫应答。这种载体通常给免疫系统提供了选择性重组蛋白抗原的多个拷贝，并促进局部淋巴结中抗原的捕获和保留。这些颗粒可以被巨噬细胞吞噬，并且可以通过细胞因子的释放而增强抗原呈递。例如，共同拥有的国际专利申请WO98/33487和共待授权的申请于1998年1月29日的美国专利申请序列号第09/015,652中，描述了使用吸附有抗原和包裹了抗原的微粒体来刺激免疫应答，包括细胞介导的免疫应答，以及制备这类微粒体的方法。用于形成微粒体的聚合物包括聚丙交酯(poly(lactide))和聚(丙交酯-共-乙交酯)(poly(lactide-co-glycolide))，在本文中也称为“PLG”。-->共同拥有的国际专利申请WO00/06123和共待授权的美国专利申请序列号第09/715,902中，揭示了制备具有吸附大分子的微粒体的方法，所述大分子包括DNA、多肽、抗原和佐剂。该微粒体包括，例如：聚合物，如聚(α-羟基酸)(如PLG)、多羟基丁酸、聚己内酯、聚原酸酯、聚酐等，并使用如阳离子、阴离子或非离子去污剂制成。提议将含有阴离子去污剂的微粒体，如含有十二烷基磺酸钠(SDS)的PLG微粒体，用于吸附带正电的大分子，如多肽。而含有阳离子去污剂的微粒体，如含有CTAB(溴化十六烷三甲基铵)的PLG微粒体，则被提议用于吸附带负电的大分子，如DNA。此外还揭示了使用这种微粒体来刺激免疫应答，包括细胞介导的免疫应答。专利技术概述本专利技术涉及含有生物可降解的聚合物微粒体的免疫原性组合物，该微粒体包含吸附于其上的类毒素和含多糖的抗原。根据本专利技术的第一方面，提供了一种免疫原性组合物，其包括：(a)包含生物可降解聚合物的聚合物微粒体，例如，选自下组的聚合物：聚(α-羟基酸)、多羟基丁酸、聚己内酯、聚原酸酯、聚酐和聚氰丙烯酸酯；(b)吸附于微粒体上的抗原，所述抗原选自下组：(i)类毒素抗原，如破伤风类毒素、白喉类毒素、或它们的组合物；和/或(ii)含多糖的抗原，如Hib多糖抗原、含多糖和多肽区域的Hib结合抗原(conjugate antigen)、脑膜炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的脑膜炎球菌结合抗原、肺炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的肺炎球菌结合抗原、或它们的组合物；以及(c)药学上可接受的赋形剂。通常，微粒体是在抗原吸附到微粒体上之后通过多种技术中的任何一种制备的。在许多具体实施方式中，微粒体是由聚(α-羟基酸)，如聚丙交酯(“PLA”)；丙交酯和乙交酯的共聚物，如聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯)(“PLG”)；或D，L-丙交酯和己交酯的共聚物所形成。聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯)聚合物包括那些所含有的丙交酯∶乙交酯的摩尔比范围为，例如：从20∶80-80∶20、从25∶75-75∶25、从40∶60-60∶40或从55∶45-45∶55；且所具有的分子量范围为，例如：从5,000-200,00道尔顿、从10,000-100,000道尔顿、从20,000-70,000道尔顿、或从40,000-50,000道尔顿的聚合物。在许多具体实施方式中，免疫原性组合物将包含除类毒素和/或含多糖的抗原以外的抗原。这些其它的抗原可独立地，例如：(a)吸附于微粒体表面上；(b)嵌入微粒体内；(c)存在于溶液中或悬液中；(d)吸附于微粒体的分散群体(separate-->population)中；和/或(e)嵌入微粒体的分散群体中。抗原可为例如：灭活或减毒的病原体(如，细菌、病毒、真菌或寄生虫)或细胞(如，肿瘤细胞)、含多肽的抗原、含多糖的抗原、类毒素、或含多核苷酸的抗原。含多核苷酸的抗原举例包括例如：(a)直接编码含多肽的抗原的核酸序列(如，mRNA分子)和(b)间接编码含多肽的抗原的构建载体(vector constructs)，例如，表达异源核酸序列的构建载体，其依次编码含多肽的抗原(如，DNA构建载体和RNA构建载体)。所编码的含多肽的抗原可为例如：肿瘤抗原和/或病原生物体来源的抗原。类似的，含多肽的抗原和含多糖的抗原可为例如：肿瘤抗原和/或病原生物体抗原。因此，在某些具体实施方式中，这些抗原源自于肿瘤。在其它具体实施方式中，该抗原源自于病毒，例如肝炎病毒、单纯疱疹病毒、人免疫缺陷病毒、水痘病毒、脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎、风疹、巨细胞病毒和流感病毒。在其它具体实施方式中，该抗原源自于细菌，例如，白喉、破伤风、百日咳、脑膜炎奈瑟氏球菌、流感嗜血杆菌(如，b型流感嗜血杆菌)、链球菌、淋病奈瑟氏菌、幽门螺旋杆菌和霍乱菌。在其它的一些具体实施方式中，该抗原源自于真菌或寄生虫，例如，疟原虫。抗原的具体例子包括以下物质的各种组合：(a)百日咳抗原(如，全细胞和非细胞百日咳抗原)；(b)b型流感嗜血杆菌(Hib)抗原(如，Hib多糖和Hib结合抗原)；(c)肝炎抗原(如，甲型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、庚型肝炎病毒、以及它们的组合，如，甲型-乙型肝炎病毒的组合；(d)脊髓灰质炎抗原(如，灭活和活减毒病毒抗原，通常为三价的灭活脊髓灰质炎抗原)；(e)脑膜炎球菌(脑膜炎奈瑟氏球菌)抗原，包括多糖和结合抗原(如，脑膜炎A、脑膜炎B、脑膜炎C、脑膜炎W、脑膜炎Y、以及组合，如脑膜炎A-C、脑膜炎A-B-C、脑膜炎A-C-W-Y和脑膜炎A-B-C-W-Y的组合)；(f)肺炎球菌(肺炎链球菌)抗原(如，多糖和结合抗原)；(g)水痘-带状疱疹病毒(鸡痘)抗原(如，冻干、活减毒病毒抗原)；(h)麻疹病毒抗原(如，活减毒病毒抗原)；(i)腮腺炎病毒抗原(如，活、减毒病毒抗原)；(j)风疹病毒抗原(如，活、减毒病毒抗原)。本专利技术的免疫原性组合物也可包含多种辅助性的免疫佐剂。与上述所加入的抗原类似，这些辅助性的免疫佐剂可独立地，例如：(a)吸附于微粒本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫原性组合物，所述组合物包括：（ａ）含生物可降解聚合物的聚合物微粒体；（ｂ）吸附于微粒体上的抗原，所述抗原选自下组中的一种或多种：（ｉ）选自破伤风类毒素和白喉类毒素的类毒素抗原；和（ｉｉ）选自下组的含多糖的抗原：Ｈｉｂ多糖抗原、含多糖和多肽区域的Ｈｉｂ结合抗原、脑膜炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的脑膜炎球菌结合抗原、肺炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的肺炎球菌结合抗原；以及（ｃ）药学上可接受的赋形剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-6-2 60/475,010;US 2003-10-21 60/513,0741.一种免疫原性组合物，所述组合物包括：(a)含生物可降解聚合物的聚合物微粒体；(b)吸附于微粒体上的抗原，所述抗原选自下组中的一种或多种：(i)选自破伤风类毒素和白喉类毒素的类毒素抗原；和(ii)选自下组的含多糖的抗原：Hib多糖抗原、含多糖和多肽区域的Hib结合抗原、脑膜炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的脑膜炎球菌结合抗原、肺炎球菌多糖抗原、含多糖和多肽区域的肺炎球菌结合抗原；以及(c)药学上可接受的赋形剂。2.如权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含破伤风类毒素和白喉类毒素。3.如权利要求1-2中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物还包含附加抗原。4.如权利要求3所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是吸附于所述微粒体的表面的。5.如权利要求3所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是嵌入在所述微粒体之中的。6.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是含多肽的抗原。7.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是附加的含多糖的抗原。8.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是附加的结合抗原。9.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是含多核苷酸的抗原。10.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述附加抗原是肿瘤细胞来源的。11.如权利要求3-5中任一项所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含破伤风类毒素和白喉类毒素，且其中所述附加抗原是病原生物体来源的。12.如权利要求11所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述病原生物体选自下组：病毒、细菌、真菌和寄生虫。-->13.如权利要求11所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述病原生物体选自下组：肝炎病毒、水痘病毒、脊髓灰质炎病毒、麻疹、腮腺炎、风疹、流感病毒、脑膜炎奈瑟氏球菌、百日咳菌、b型流感嗜血杆菌、HIV和肺炎链球菌。14.如权利要求11所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述病原生物体是百日咳菌。15.如权利要求14所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含肝炎病毒抗原。16.如权利要求15所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含选自下组的抗原：b型流感嗜血杆菌抗原、脊髓灰质炎病毒抗原、脑膜炎奈瑟氏球菌抗原、和肺炎链球菌抗原。17.如权利要求14所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含b型流感嗜血杆菌抗原。18.如权利要求17所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含选自下组的抗原：肝炎病毒抗原、脊髓灰质炎病毒抗原、脑膜炎奈瑟氏球菌抗原、和肺炎链球菌抗原。19.如权利要求14所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含脊髓灰质炎病毒抗原。20.如权利要求19所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述组合物包含选自下组的抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：D欧哈根，M辛格，J卡扎尔，
申请(专利权)人：诺华疫苗和诊断公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]