蚂蚁类毒素的制备方法，涉及一种药品原料的制备方法。鉴于蚂蚁作为药材时具有毒副作用，本发明专利技术的蚂蚁类毒素的制备方法是通过以下技术案实现的：1、以蚂蚁为原料，经粉碎处理后酶解；2、分离机固液分离；3、脱毒；4、化学法或物理法灭活；5、微滤过滤除杂及超滤法浓缩；6、超声驻波液相制备色谱纯化；7、稳定化处理。本发明专利技术制备的蚂蚁类毒素是以中药材蚂蚁或蚂蚁干为原料制备的一种类毒素，制备过程不涉及传统类毒素生产的菌种和培养基筛选，生产工艺简单，节能、无环境污染，工艺过程易于控制，制备的蚂蚁类毒素成分明确，成本较低，适合工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种药品原料的制备方法，尤其是一种。
技术介绍
一种致病性细菌所产生的特异性毒性物质一细菌毒素经脱毒处理而保留免疫原性，称之为类毒素。类毒素是一种自动免疫制剂，用于细菌毒素性疾病的预防及治疗。现常用生产类毒素的方法是选择培养基和菌种，菌种经人工培养后产生毒素，毒素脱毒后形成类毒素。目前非常成熟的类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素、霍乱类毒素等女口广叩ο CN101869704A公开了单剂免疫破伤风类毒素阳离子葡聚糖微球及其制备方法，其特征是由破伤风类毒素通过静电作用后载在阳离子甲基丙烯酸羟乙酯葡聚糖微球上制得；CN87104279公开了类毒素制备新方法，包括用一定量氧化剂处理至少部分分离的毒素以对所说毒素进行化学灭活，但同时保留其免疫性，此后从中获得灭活的毒素；CN1798548公开了基于含吸附类毒素或含多糖抗原微球体的免疫原性组合物，该专利技术是将类毒素抗原或含多糖的抗原吸附在微粒体上形成免疫原性组合物。蚂蚁是一种有社会性的生活习性的昆虫，属于节肢动物门、昆虫纲、膜翅目、蚁科。蚂蚁功效补肾益精、通经活络、解毒消肿、强身壮骨、扶正祛邪。蚂蚁体内含有28种氨基酸，其中苏氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸为人体必需的氨基酸，并含有多种微量元素及多种维生素。含有的蚁酸具有腐蚀性，蚁醛对人危害较大。现代药理研究表明蚂蚁具有抗衰老、抗炎、双向调节免疫、护肝、影响内分泌、抗菌、抗癌、平喘、解痉的作用。市场上已有多种蚂蚁制品，例如蚂蚁酒、蚁王口服液、蚂蚁茶等。CNlO 1810644A公开了蚂蚁精油的生产方法及蚂蚁油软胶囊。本专利技术是将蚂蚁用植物油炸过之后，去掉蚂蚁，待油冷却后即成蚂蚁精油。CN101928745A公开了蚂蚁多肽的制备方法及用途，该专利技术将蚂蚁清洗、干燥、粉碎、超临界CO2制备蚂蚁蛋白质，再用酶解、灭酶、消毒、过滤、浓缩、干燥制成蚂蚁多肽。CN101991841A公开了一种治疗癌症的药物组合物及其制备方法，该组合物由黑蚂蚁、灵芝、硒、蛋白粉组成。CN102145127A公开了一种治疗类风湿关节炎的药物及其制备方法，药物由马钱子、黑蚂蚁、全蝎、蜈蚣、雷公藤、川乌、细辛、当归、人参、田七、川芎、天麻、寻骨风、蜂蜜组成。CN101954034A公开了一种治疗艾滋病的中药制剂及其制备方法，由党参、白术、黑蚂蚁、黄芩、绞股蓝、茯苓、砂仁、穿心莲、灵芝等组成药剂配方。CN101919997A公开了一种治疗神经性皮炎的配方，由活黄蚂蚁、陈茶叶、陈艾叶、老姜、大蒜组成。杨桂平等人研究蚂蚁的化学成分，拟黑多刺蚁蛋白质含量达40-67%。原则上蚂蚁作为中药材，可以用于多种药物的配伍中，但是蚂蚁的化学成分中不仅含有蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素、蚁醛、蚁酸，还有许多成分尚需确定。因此，综合开发、物尽其材、生产时可检、可控、产品的一致性是中药材用于药品制备中需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种，该方法消除了蚂蚁机体具有的过敏源及毒副作用，充分利用了蚂蚁资源。本专利技术的目的是通过以下技术案实现的1、以蚂蚁为原料，经粉碎处理后加入蛋白酶进行酶解反应；2、分离机固液分离；3、脱毒；4、化学法或物理法灭活；5、微滤过滤除杂及超滤法浓缩；6、超声驻波液相制备色谱纯化；7、稳定化处理。具体步骤如下 (O以蚂蚁为原料，经粉碎处理后加入蛋白酶进行酶解反应； (2)用分离机以3000-15000r/min分离上述酶解液； (3)调节收集液体pH=5.8-8. 0，控制温度25-45°C，加H2O2溶液或甲醛进行脱毒处理，成为蚂蚁类毒素粗品液相； (4)蚂蚁类毒素粗品液相采用化学法或物理法进行灭活处理； (5)用膜孔径O.2-5 μ m微孔过滤机过滤，并且用膜孔径IO-IOOnm超滤机超滤处理，收集超滤液； (6)超滤液溶于溶剂体系中，泵入超声驻波液相制备色谱中连续分离纯化，超声驻波频率2450-5000kHz，声强O. 2-1. 5kw，流量O. 2-1. OL/min，紫外分光光度检测器波长260nm ； (7)稳定化处理分离纯化蚂蚁类毒素中加入稳定剂，在20-30°C条件下吸附10-24h，成为稳定性蚂蚁类毒素。本专利技术制备的蚂蚁类毒素是以中药材蚂蚁或蚂蚁干为原料制备的一种类毒素，其相对分子量为35X IO4Da,制品振摇后为乳黄色均匀悬浮液，pH=6. 6-7. 4，氢氧化铝含量少于2. 5mg/mL，游离甲醛含量小于O. 02% (g/mL)。蚂蚁中的拟黑多刺蚁是国家卫生部指定的唯一一种药食兼用蚁，蚂蚁含蛋白质45%，并含有脂肪及脂肪酸以及醛类化合物等成分，经化学去毒处理后，蚂蚁的过敏源被消除。本专利技术的制备过程不涉及传统类毒素生产的菌种和培养基筛选，生产工艺简单，节能、无环境污染，工艺过程易于控制，制备的蚂蚁类毒素成分明确，产品一致性好，成本较低，适合工业化生产。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述。实施例I : (1)选用新鲜中药材蚂蚁放入绞肉机绞碎蚂蚁机体，用高压匀浆破碎法进一步破碎机体，调节压力IOOOOOkpa,流速至70cm/ml,重复破碎2_5次，以离心机1250_3000r/min固液分离，收集液相； (2)收集液相IOOOml加入2000-10000ml纯净水混合均匀后加入O.5-10g胃蛋白酶，保持温度20-50°C，酶解6h-48h ； (3)用分离机以3000-15000r/min分离上述酶解液，收集液体用O.2mol/LNa2HPO4-O. 2moI/LNaH2PO4 组成的缓冲液调节 pH=5. 8-8. O,控制温度 25-45 V’ 加IO-IOOgH2O2溶液脱毒处理15-45d,成为蚂蚁类毒素粗品液相； (4)IL蚂蚁类毒素粗品液相置于微波炉中，在功率O. 5-2kw加热I-IOmin进行灭活； (5)将IOOml蚂蚁类毒素粗品液相加入O.2mol/LNa2C03-0. 2moI/LNaHCO3缓冲溶液调pH=8-12，再加入50-100gNa2S04& 20-200g活性白土，在10-30°C条件下生成沉淀并放置10h-24h ； (6)上述物料用膜孔径O.2-5 μ m微孔过滤机过滤，并且用膜孔径IO-IOOnm超滤机超滤处理，收集超滤液； (7)收集的IL超滤液溶于2-10L由甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水按照2:2:1:6的体积比组成的溶剂体系中，其中有机相中加入10-30mmol/L的三氟乙酸，水相中加入I-5mmo I/L氨水，泵入超声驻波液相制备色谱中，超声驻波频率2450-5000kHz，声强O. 2-1. 5kw，流量O. 2-1. OL/min，紫外分光光度检测器波长260nm，连续分离纯化； (8)分离纯化蚂蚁类毒素1000L加入200-1000L含量为5_20g/LAl (OH)3溶液中，在20-30°C条件下吸附10h-24h，成为稳定性蚂蚁类毒素。实施例2 (1)IOOOg蚂蚁干品用粉碎机以275-500r/min连续粉碎，并用100-200目筛子筛选，收集粉末； (2)将IOOOg粉末放入微波炉中以功率O.5-2kw，加热10-20min杀菌处理，然后自然冷却本文档来自技高网...
【技术保护点】
蚂蚁类毒素的制备方法，其特征在于所述制备方法如下：（1）以蚂蚁为原料，经粉碎处理后加入蛋白酶进行酶解反应；（2）用分离机以3000？15000r/min分离上述酶解液；（3）收集液体进行脱毒处理，成为蚂蚁类毒素粗品液相，控制pH=5.8？8.0，温度25？45℃；（4）蚂蚁类毒素粗品液相采用化学法或物理法进行灭活处理；（5）用膜孔径0.2？5μm微孔过滤机过滤，并且用膜孔径10？100nm超滤机超滤处理，收集超滤液；（6）超滤液溶于溶剂体系中，泵入超声驻波液相制备色谱中连续分离纯化，超声驻波频率2450？5000kHz，声强0.2？1.5kw，流量0.2？1.0L/min，紫外分光光度检测器波长260nm；（7）稳定化处理：分离纯化蚂蚁类毒素中加入稳定剂，在20？30℃条件下吸附10？24h，成为稳定性蚂蚁类毒素。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐华民，赵荣华，赵艳琨，徐萌，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：
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