同时进行多种生物标志物并行检测的方法和芯片试纸技术

一种同时进行多种生物标志物并行检测的方法和芯片试纸，将相应配基固Ａｎ固定在纤维膜或者其他固体支持物上，多种生物标志物ｎ与配基Ｂｎ形成亲和结合，同时生物标志物在支持物上通过移动与相应的至少一种带有标记物的配基结合，形成配基Ａｎ、生物标志物ｎ、配基Ｂｎ及信号标记物；释放信号的转换步骤和计算步骤包括：通过同时激发检测试纸上的多种不同的标记物、标记物受激发光激发后发生能量跃迁同时释放出变异的光波或电子物质，检测仪器接受标记物释放出的光波或者电子传递物信号，将其转化为数字信号，数据处理系统将标记物释放的信号数据进行计算，最后输出生物标志物的浓度。该方法可以同步定量快速检测一种样品中的多种生物标志物，缩短检测的时间，提高灵敏度和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外免疫分析
，特别涉及一种同时进行多种生物标志物并行检测的方法和芯片试纸。背畺技术至上世纪70年代，专利技术酶标检測技术平台以来，免疫诊断行业已发生了翻天覆地的变化， 使免疫检测领域得到了快速成长。但由于酶标检测体系检测时间长，中间过程操作烦琐，试 剂检测范围窄，灵敏度低等缺点，因此该系统也慢慢的退出了临床检测的历史舞台。随之而 来的相继又专利技术了胶体金标技术平台，化学发光，时间分辨荧光检测技术平台以及免疫芯片 技术平台等。胶体金标技术在快速检测领域起到了重要作用，为病人的诊断赢得了时间，而 且使用方便，已深得用户的喜欢；但由于检测灵敏度低，无法准确定量的瓶颈，导致其不能 充分发挥其快速诊断的需求，继而不能与精准的化学发光等技术抗衡。化学发光> 时间分辨 荧光等技术平台使检测灵敏度得到了大大提高，并且通过全自动检测系统的辅助，使检测误 差和检测效率都有了大大的提升；但是由于其检测时间还是比较长，而且仪器设备比较5I大， 只能在中心实验室进行，从样本收集到医生得到检测结果还是需要很长的一段时间，同时一 个检测只能得到一个标志物的结果，不能同时测出病人相关的多个生物标志物的结果，故此 也大大限制了该技术平台的充分发展。随着芯片技术的发展，相继出现了膜芯片，液体芯片， 玻璃芯片等技术平台，这为同一样品达到多项生物标志物同步测试的目的，为病人检测节约 了时间和费用，同时节约了样本的采集量；但该平台技术还是存在烦琐的实验反应和操作增 加了检测误差，同时仪器设备也比较庞大，也只能在中心实验室进行，从样本采集到医生拿 到实验结果同样需要较长的时间因此也限制了其发展。限制了在免疫检测领域的进一步发展。 都不能满足快速发展的免疫领域的需求。因此，亟待开发出一种即可以快速准确检测，又可以同步检测多项指标，并且还便于携 带，随时随地都可以使用的新的检測方法。4专利技术內容本专利技术的目的在于通过提供一种同时进行多种生物标志物并行检测的方法和芯片试纸， 以改变目前存在的，检测时间长、快速检测不能定量和同一个检测只能得到一个标志物的结 果的问题，以使其达到可以同时定量检测多个生物标志物并提高检测的灵敏度，节约检测时 间的效果。本专利技术是采用以下技术手段实现的-一种同时迸行多种生物标志物并行检测的方法，包括生物标志物中的多种生物标志物n, 与信号标记物-配基Bn，试纸上的配基An发生亲和结合形成四元复合物步骤及释放信号的转 换步骤和计算步骤；其中所述多种生物标志物n与试纸上的配基发生结合步骤包括:将之相 应配基An固定在纤维膜或者其他固体支持物上，多种生物标志物与信号标记物-配基Bn形成 亲和结合，并且该结合物在支持物上通过移动与固定在膜上的配基An结合，形成配基An、 生物标志物n、配基Bn-信号标记物的四元复合物；其中所述的释放信号的转换步骤和计算步骤包括通过同时激发芯片试纸上的信号标记 物、标记物受激发光激发后发生能量跃迁同时释放出变异的光波或电子物质，检测仪器接受 标记物释放出的光波或者电子传递物信号，并且将其转化为数字信号，数据处理系统将标记 物释放的信号数据进行计算，最后输出生物标志物的浓度。前述的信号标记物为荧光素(荧光素有FITC， Cy2 TM ， Alexa TM 488， Cy3 TM ， Alexa TM 546常规荧光素)、荧光蛋白(GFP， R-PE， R-PC)、纳米金、银、纳米荧光微球、 量子点、稀土元素、放射元素、小分子化学物或色素。前述的标记物释放信号的大小与形成复合物的多少为正关联。前述的激发光可以是激发光，紫外光，红外线，放射线光。前述的标记物受激发光激发后释放出的光波或电子物质不同于标记物本身的光波或电 子物质。前述的配基An、生物标志物n、配基Bn，其中n定义为1和1以上的连续自然数。前述的生物标志物中的生物标志物n、信号标记物-配基Bn复合物在固相支持物上的运 动作用力为层析、虹吸、渗滤、电泳、磁泳或重力方式等。一种同时进行多种生物标志物并行检测的芯片试纸，其特征在于所述的芯片试纸上设 有纤维素膜和玻璃纤维，在纤维膜上设有配基An，在玻璃纤维上吸附有信号标记物偶联的配 基Bn。前述的纤维膜可以为PV膜、NC膜、玻璃、塑料板或凝胶板。本专利技术一种同时进行多种生物标志物并行检测的芯片试纸。与现有技术相比，具有以下 明显的优势和有益效果1、 使用方便，携带方便，电源使用方便可以是干电池，也可以是普通交流电源；2、 适用于各种检测体系，可以是免疫反应，可以是核酸反应等符合配基-受体结合的反应；3、 该方法的检测反应非常快速，从样品釆集到得到检测结果不到半小时即可完成，又 叫床边检测；4、 该方法可以同时检测多种生物标志物；5、 该方法可以对生物标志物进行精确定量检测，也可以用于定性检测；6、 该方法还适合基因检测，和所有适合配基与受体形成亲和结合的反应。附图说明图1为本专利技术检测方法的示意图； 图2为本专利技术芯片试纸的结构图示； 图3为本专利技术检测仪的示意图4为芯片试纸试用测试样本后的图示。具&《^力《以下，结合具体实施例对本专利技术做进一步说明请参阅图l所示，l为检测仪，2为试剂盒。其中，IO为检测仪的控制系统，控制着检 测仪的各种工作状态。激发光发射器11发出激发光，该激发光同时激发芯片试纸2内的多种信号标记物21， 该些标记物受激发光激发后发生能量跃迁21后，释放出另外一种变异的光波或者电子物质 23。同时检测仪1的信号接收装置12接收信号标记物释放出的光波或者电子传递物信号23, 并且把信号23转化为数字信号13,信号标记物释放信号的大小与数值大小正相关。然后仪 器的数据处理系统将处理过的接收的信号进行计算，然后转换为模拟信号15，该模拟信号通 过控制装系统输出，该输出的模拟信号与进行模拟计算，最后输出生物标志物的浓度相对应。请参阅图2所示，为本专利技术芯片试纸的结构图示；其中5为纤维膜，51为玻璃纤维，52 为配基Bn—信号标记物，53为加样孔，54为配基An。请参阅图3所示，2为芯片试纸，在芯片试纸2上设有纤维膜，在纤维膜上设有配基21 为Ari，该配基21为枝状，该配基An上固定有生物标志物22为n，在标志物n上有配基24为Bn，多种生物标志物n与配基Bn形成亲和结合，在配基的周围或顶部为一个以上信号标 记物23。其中^=1， 2， 3， 4， 5……复合物。该复合物(n种)在上述检测仪上检测其信号物质的 强弱并且转化为相应物质的浓度，即可检测出被检测生物标志物(n种)的浓度大小或者强 弱。以此对疾病进行辅助判断达到快速诊断的目的。前述的标记物23为荧光素(荧光素有FITC， Cy2 TM ， Alexa TM 488， Cy3 TM , Alexa TM 546常规荧光素)、荧光蛋白(GFP， R-PE, R-PC)、纳米金、银、纳米荧光微球、 量子点、稀土元素、放射元素、小分子化学物或色素。前述的标记物23释放信号的大小与数值大小为正关联。前述的标记物23受激发光激发后释放出的光波或电子物质不同于标记物本身的光波或 电子物质。前述的生物标志物n、信号标记物-配基Bn复合物在固相支持物上的运动作用力为层析、 虹吸、渗滤、电泳、磁泳或重力方式等。一种同时本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时进行多种生物标志物并行检测的方法，包括：信号标记物－配基Ｂｎ，生物标志物ｎ，与试纸上的配基Ａｎ发生亲和结合形成四元复合物步骤及释放信号的转换步骤和计算步骤；其特征在于：其中所述信号标记物－配基Ｂｎ，生物标志物ｎ，与试纸上的配基Ａｎ发生亲和结合形成四元复合物步骤包括：　　　　将之相应配基Ａｎ固定在纤维膜或者其他固体支持物上，生物标志物ｎ与信号标记物配基Ｂｎ发生亲和结合形成三元复合物，同时该复合物在支持物上通过移动与相应配基Ａｎ结合，形成配基Ａｎ、生物标志物ｎ、配基Ｂｎ－信号标记物的四元复合物；　　　　其中所述的释放信号的转换步骤和计算步骤包括：　　　　通过同时激发检测试纸上的信号标记物、标记物受激发光激发后发生能量跃迁同时释放出变异的光波或电子物质，检测仪器接受标记物释放出的光波或者电子传递物信号，并且将其转化为数字信号，数据处理系统将标记物释放的信号数据进行计算，最后输出生物标志物的浓度。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗朝领，茅柳娟，
申请(专利权)人：上海领潮生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]