生物标志物作为靶标在肺腺癌诊治中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种生物标志物作为靶标在肺腺癌诊治中的应用，具体的该生物标志物为CLINT1。世界范围内的肺腺癌发生率持续增加，需要有效的生物标志物以诊断和/或治疗肺腺癌。本发明专利技术通过实验证明，CLINT1在肺腺癌患者中表达上调，降低CLINT1基因的表达可以抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭。提示本发明专利技术公开的CLINT1可以用于早期诊断肺腺癌的标志物；同时该基因也可作为肺腺癌治疗的潜在药物靶点，为肺腺癌的精准化医疗提供基础。

Application of biomarkers as targets in the diagnosis and treatment of lung adenocarcinoma

The invention discloses a biomarker used as a target in the diagnosis and treatment of lung adenocarcinoma, and the biological marker is CLINT1. Worldwide, the incidence of lung adenocarcinoma continues to increase and effective biomarkers are needed to diagnose and / or treat adenocarcinoma of the lung. The present study proves that CLINT1 is up-regulated in lung adenocarcinoma patients and reduces the expression of CLINT1 gene, thereby inhibiting the proliferation and invasion of lung adenocarcinoma cells. It is indicated that the CLINT1 disclosed by the invention can be used as an indicator for the early diagnosis of lung adenocarcinoma, and the gene can also serve as a potential drug target for the treatment of lung adenocarcinoma, and provides the basis for the accurate medical treatment of lung adenocarcinoma.

【技术实现步骤摘要】
生物标志物作为靶标在肺腺癌诊治中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及生物标志物作为靶标在肺腺癌诊治中的应用，具体的所述生物标志物为CLINT1。
技术介绍
肺癌是全球范围内发病率及死亡率最高的肿瘤之一，严重危害人类健康。肺癌可以分为非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer，NSCLC)和小细胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)。其中NSCLC约占肺癌总数的80％-85％，其病情发展迅速，转移速度快，复发率较高。大部分病人发现时已发展至中晚期，预后差，5年生存率不足15％。早期接受治疗的NSCLC患者复发率达40％，且70％以上患者被发现时已是局部侵犯或远隔转移而无法手术。目前，外科手术、化疗、放疗仍是肺癌的主要治疗方式。近年，随着多学科综合治疗(multidisciplinaryteam，MDT)的发展，肺癌的治疗取得了长足的进步。然而，肺癌5年生存率仍徘徊在15％左右。精准医学模式是当今肿瘤治疗的趋势和方向，其关键是利用有效的生物标志物，进行特异性个体化治疗。因此，寻找肺癌新的有效分子标志物以及潜在治疗靶点就显得尤为重要。随着人类基因组计划的完成，对肺癌在基因水平有了全新的认识。可以认为，在分子基因水平肺鳞癌和肺腺癌是“两种疾病”。现有资料也提示在肺腺癌中可能更易发现生物标志物，并可能从中获益。精准医学模式的倡导为肺癌的诊治打开了崭新的思路。精准医学是基于分子生物信息学的医学模式，其关键是利用有效的生物标志物，区分目标人群，从而进行特异性个体化治疗。因此，寻找肺癌新的有效的分子生物标志物和信号通路，进一步阐明肺癌的发生发展机制，为肺癌的个体化精准治疗提供新的理论依据成为当今的研究热点和方向。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种与肺腺癌发生发展相关的生物标志物。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了一种CLINT1基因的用途，用于制备预防或治疗肺腺癌的药物组合物。进一步，所述药物组合物包括CLINT1的下调剂。所述下调剂选自：以CLINT1或其转录本为靶序列、且能够抑制CLINT1基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(SiRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物；或特异性与CLINT1编码的蛋白结合的结合分子(如能够抑制CLINT1蛋白活性的抗体或配体)。进一步，所述的下调剂选自下组序列的siRNA：SEQIDNO.8、SEQIDNO.9。本专利技术提供了一种用于预防或治疗肺腺癌的CLINT1的下调剂，所述下调剂选自：核酸抑制物，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子，其能够在蛋白或基因水平上下调CLINT1基因或其编码的蛋白的表达或活性。在本专利技术中，所述CLINT1的下调剂还可用于抑制肺腺癌细胞的侵袭和增殖。本专利技术提供了一种用于预防或治疗肺腺癌的药物组合物，所述药物组合物含有：上面所述的CLINT1的下调剂；和药学上可接受的载体。本专利技术提供了一种CLINT1基因的用途，用于筛选预防或治疗肺腺癌的潜在物质。本专利技术提供了一种筛选预防或治疗肺腺癌的潜在物质的方法，所述方法包括：用候选物质处理表达或含有CLINT1基因或其编码的蛋白的体系；和检测所述体系中CLINT1基因或其编码的蛋白的表达或活性；其中，若所述候选物质可降低CLINT1基因的表达或活性，(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上；更佳的低80％以上)，则表明该候选物质是预防或治疗肺腺癌的潜在物质。所述体系选自：细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系。所述候选物质包括但不限于：针对CLINT1基因或其编码的蛋白或其上游或下游基因或蛋白设计的干扰分子、核酸抑制物、结合分子(如抗体或配体)、小分子化合物等。在本专利技术中，所述的方法还包括：对获得的潜在物质进行进一步的细胞实验和/或动物试验，以从候选物质中进一步选择和确定对于预防、缓解或治疗肺腺癌有用的物质。本专利技术提供了一种CLINT1基因的用途，用于制备诊断肺腺癌的产品。其中，所述产品包括(但不限于)芯片、制剂或试剂盒。进一步，所述产品包括检测CLINT1基因表达的试剂。进一步，所述试剂选自：特异性识别CLINT1的探针；或特异性扩增CLINT1的引物；或特异性结合CLINT1编码的蛋白的抗体或配体。较佳的，所述的特异性扩增CLINT1基因的引物是引物对，序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。附图说明图1是利用QPCR检测CLINT1基因在肺腺癌组织中的表达情况图；图2是利用QPCR检测CLINT1在肺腺癌细胞中的转染情况图；图3是用CCK-8法检测CLINT1基因对肺腺癌细胞增殖的影响图；图4是用流式细胞仪检测CLINT1基因对肺腺癌细胞凋亡的影响图；图5是利用Transwell小室检测CLINT1对肺腺癌细胞迁移和侵袭的影响图；其中图A是CLINT1对肺腺癌细胞迁移的影响图；图B是CLINT1对肺腺癌细胞侵袭的影响图。具体的实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，通过高通量方法，采用目前覆盖数据库最广的基因芯片，检测肺腺癌标本中基因在肿瘤组织和癌旁组织的表达，发现其中具有明显表达差异的基因片段，探讨其与肺腺癌的发生之间的关系，从而为肺腺癌的早期检测及靶向治疗寻找更好的途径和方法。通过筛选，本专利技术首次发现了肺腺癌中CLINT1显著性上调。实验证明，通过降低CLINT1的表达水平，能够有效地抑制肺腺癌细胞的生长和侵袭，提示检测CLINT1基因的表达水平可成为肺腺癌早期诊断的辅助诊断指标之一，干扰CLINT1基因表达可成为预防或治疗肺腺癌或肺腺癌转移的新途径。CLINT1基因CLINT1是位于人5号染色体长臂3区3带上，一种代表性的人CLINT1基因的核苷酸序列和氨基酸序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术中的CLINT1包括野生型、突变型或其片段。本专利技术的人CLINT1核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据已公开的有关核苷酸序列，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。本领域技术人员将认识到，本专利技术的实用性并不局限于对本专利技术的靶标基因的任何特定变体的基因表达进行定量。如果当核酸或其片段与其它核酸(或其互补链)最佳比对时(具有适当的核苷酸插入或缺失)，在至少大约60％的核苷酸碱基、通常至少大约70％、更通常至少大约80％、优选至少大约90％、及更优选至少大约95-98％核苷酸碱基中存在核苷酸序列相同性，则这两个序列是“基本同源的”(或者基本相似的)。或者，当核酸或其片段与另一核酸(或其互补链)、一条链或其互补序列在选择性杂交条件下杂交时，则其间存在基本同源或(相同性)。当杂交比特异性整体丧失发生更具选择性时，存在杂交选择性。典型地，当在至少大约14个核苷酸的一段序列存在至少大约55％相同性、优选至少大约65％、更优选至少大约7本文档来自技高网...

【技术保护点】
CLINT1基因的用途，其特征在于，用于制备预防或治疗肺腺癌的药物组合物。

【技术特征摘要】
1.CLINT1基因的用途，其特征在于，用于制备预防或治疗肺腺癌的药物组合物。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物组合物包括CLINT1的下调剂。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的下调剂选自下组序列的siRNA：SEQIDNO.8、SEQIDNO.9。4.一种用于预防或治疗肺腺癌的CLINT1的下调剂，其特征在于，所述下调剂选自：核酸抑制物，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子，其能够在蛋白或基因水平上下调CLINT1基因或其编码的蛋白的表达或活性。5.一种用于预防或治疗肺腺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有：权利要求2-4任一项所述的CLINT1的下调剂；和药学上可接受的载体。6.一种CLINT1基因的用途，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：边洋，李曙光，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11