本发明专利技术提供了一种鉴别肺癌亚型的microRNA，所述的microRNA选自：a）序列如SEQ?ID?No.n所示的microRNA，其中n为2，3，4或7；或b）与SEQ?ID?No.n所示序列互补的microRNA。本发明专利技术还提供了上述microRNA的用途和基于上述microRNA的试剂盒。本发明专利技术另提供了由上述microRNA组成的集、该集的用途和基于该集的试剂盒。其优点在于：上述microRNA可构成两个组合：SEQ?ID?No.2和SEQ?ID?No.7、SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4，可分别用于鉴别诊断小细胞肺癌与非小细胞肺癌、肺腺癌与肺鳞癌，且诊断速度快、成本低、结果准确可靠，为肺癌患者进行准确的靶向治疗提供了重要依据。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及肺癌亚型的诊断，具体地说，涉及鉴别肺癌亚型的microRNA标志物及该microRNA的应用。
技术介绍
肺癌已成为目前世界上病死率第一位的恶性肿瘤，2011年世界卫生组织最新资料显示，2008年全球约有160万肺癌新患者，约有140万肺癌患者死亡。在肺癌患者中，小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCL C)约占 15%,非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer, NSCLC)约占 80%, NSCLC 主要包括腺癌(adenocarcinoma lung cancer, AC)及鱗癌(squamous cell lung cancer, SQ)两大类型。肺癌是预后最差的恶性肿瘤之一，即便早期(pla-plb)肺癌经手术及放化疗治疗后的5年复发率仍然高达40%，而大部分患者(约75%)就诊时已处于中晚期，已失去了外科手术及多学科根治的最佳时机，极易复发及远处转移，I-IV期患者总体5年生存率仅约10%。造成这种状况的主要原因是缺乏有效的肺癌早期诊断及早期治疗的方法。肺癌治疗已进入个体化时代，不同亚型、不同分期的肺癌治疗方案不同。SCLC早期即发生血行转移，首选治疗方案为全身化疗联合放疗，而非手术切除。根治性手术是SQ及AC的首选治疗方法，辅助以放化疗。分子靶向治疗被认为是特异性最高的肺癌个体化治疗手段，如表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)络氨酸激酶抑制剂仅对EGFR突变的肺腺癌患者有效，SQ对培美曲赛治疗效果不如AC，用贝伐单抗治疗可引起致命的大出血。因此，准确的肺癌病理分型对肺癌患者靶向治疗方案的选择至关重要，研究肺癌肿瘤标志物，并准确的对肺癌进行分子分型，进而正确指导靶向治疗显得尤为迫切，并将会带来巨大的社会效益及经济效益。microRNA (miRNA)是一类小的内源性非编码RNA分子，大小为20-25个核苷酸(nt),这些小的microRNA通常祀向一个或者多个mRNA,通过翻译水平的抑制或断裂革巴标mRNAs而调节基因的表达。它们大约在10年前被发现，已被认为在细胞发育、分化、增殖和凋亡中发挥重要作用(Bartel, D. P. (2004) Cell 116，281-297，Ambros, V. (2004)Nature 431, 350-355 ；He, L. et al. (2004) Nat Rev Genet 5, 522-531)。 microRNA比mRNA在作为肿瘤生物标志物方面具有更大的优势，因为它们在体外非常稳定(Lu，J. etal., (2005) Nature 435, 834-838; Lim, L. P. et al., (2005) Nature 433, 769-773)。microRNA 是从初级转录物(pri-microRNA)产生的，pri-microRNA 被 RNase IIIDrosha加工为含莖-环结构的前体microRNA(pre-microRNA)。接着，在Dicer(—种RNaseIII)的作用下，发夹状的pre-microRNA在细胞质中进一步被切割产生成熟的microRNA,这些成熟的microRNA与其他蛋白质一起组成microRNA-蛋白质复合体(miRNP)。microRNA引导miRNP到达它们的靶mRNA，在此它们发挥各自的功能(参见综述例如Bartel，D. P.(2004) Cell 23, 281-292 ；He, L. and Hannon, G. J. (2004) Nat. Rev. Genet. 5,522-531)。根据microRNA与其祀mRNA之间的互补性程度,microRNA可以指导不同的调节过程。那些与microRNA高度互补的靶mRNA通过与RNA干扰(RNAi)相同的机制被特异降解。因此，在这种情况下，microRNA是担当小干扰RNA (siRNA)的角色；与microRNA互补性较低的靶mRNA被引导进入细胞降解途径，或者在蛋白质翻译上平上被阻遏而mRNA水平不受影响。高通量microRNA定量技术如microRNA微阵列，是以实时定量PCR为基础的miCToRNA检测，为研究癌症基因组中miCToRNA的表达谱提供了有力的工具。可获得的现有数据表明miciORNA表达失调可能与某种癌症的发生和/或发展相关。例如，研究表明hsa-miR-15及hsa-miR-16-l均定位在慢性淋巴性白血病(CLL)中缺失的遗传基因座上，在大约70%的CLL患者中,这两种microRNA基因缺失或下调。另外,在结肠癌中has-miR-143 及has-miR-145表达下调；而microRNA let-7的表达在肺癌中经常降低(Michael, Μ. Ζ.et al. (2003) Mol Cancer Res I, 882-891; Mayr, C. et al. (2007) Science 315,1576-1579)。事实上，常见癌症经常存在相关microRNA表达改变，而且microRNA通常定位于与癌症相关的基因组区域，因此可以推测miCToRNA可能发挥着抑癌基因和癌基因的双重作用(Esquela-Kerscher, A. and Slack, F. J (2006) Nat Rev Cancer 6, 259-269 ；Calin, G. A. and Croce, C. M. (2007) JClin Invest 117，2059-2066 ；Blenkiron, C.and Miska, E. A. (2007) Hum Mol Genet 16, R106-R113)。已证实的 microRNA 在人类癌症中的异常表达更突出了它们作为诊断和预后生物标志物的潜在应用价值。近年来对肺癌组织的研究表明，在肺癌中约有70个microRNA表达异常。但上述前人的结果都是从未经纯化肺癌组织的混合细胞中获得的，其杂交信号可以来自肺癌细胞，也可以来自肺癌组织中的炎症细胞、间质细胞甚至正常肺组织细胞，而这些非目的细胞的比例在不同肺癌组织中可以存在很大的差异，从而造成了结果的不可靠。王漱阳和朱虹光等人发现，整块肿瘤组织的microRNA表达谱与被显微切割下来的纯净癌细胞有所不同。因此，只有从纯净的靶细胞中检测得到的microRNA表达，才能正确反映特异性细胞在体内的表达情况，并可能成为可靠的肿瘤标志物和治疗靶点。而目前从肺癌组织中分离纯净的靶细胞获得的能够准确诊断肺癌亚型的microRNA报道较少。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种鉴别肺癌亚型的miCToRNA。本专利技术的再一的目的是，提供一种上述microRNA的用途。本专利技术的另一的目的是，提供一种基于上述microRNA的鉴别肺癌亚型的试剂盒。本专利技术的第四个目的是，提供一种鉴别肺癌亚型的microRNA集。本专利技术的第五个目的是，提供一种上述HiiCT0RNA集的用途。本专利技术的第六个目的是，提供一种基于上述microRNA集的鉴别肺癌亚型的试剂盒。本专利技术的第七个目的是，提供一种鉴别肺癌亚型的mi本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鉴别肺癌亚型的microRNA，其特征在于，所述的microRNA选自：？？？？a）序列如SEQ？ID？No.n所示的microRNA，其中n为2，3，4或7；或？？？？b）与SEQ？ID？No.n所示序列互补的microRNA。
【技术特征摘要】
1.一种鉴别肺癌亚型的microRNA,其特征在于,所述的microRNA选自 a)序列如SEQID No. η所示的microRNA，其中η为2，3，4或7 ;或 b)与SEQID No. η所不序列互补的microRNA。2.权利要求I所述的microRNA在制备鉴别肺癌亚型的试剂中的用途。3.一种鉴别肺癌亚型的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中含有权利要求I所述的microRNAο4.一种鉴别肺癌亚型的microRNA集，其特征在于，所述的集至少包含下列中的一种a)包含序列如SEQ ID No. 3所示的microRNA和序列如SEQ ID No. 4所示的microRNA 的集...
【专利技术属性】
技术研发人员：卢韶华，白春学，黄威，侯英勇，吴莹，朱虹光，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：
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