脐带华通胶间充质干细胞的制备方法及其产品技术

技术编号:4121794 阅读:225 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种原始间充质干细胞的制备方法,它是采用人新鲜脐带,提取华通胶,经胶原酶消化后分离培养而成,适于冷冻保存。本发明专利技术还涉及按上述方法制备的原始间充质干细胞,按照国际细胞疗法协会制订的标准进行生物学表型鉴定确认为间充质干细胞。其增殖能力、纯度均高于骨髓间充质干细胞;释放的生长因子、细胞因子量明显高于骨髓间充质干细胞。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种原始间充质干细胞的制备方法,其特征在于,它是采用以下工艺方法制备的: 取人新鲜脐带,以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基溶液洗去脐带残留血液,去除脐动脉、脐静脉及脐带外膜,提取华通胶并剪切成块,再以等渗的平衡盐溶液或无血清培养基溶液冲 洗后,浸泡于0.05~0.3%胶原酶溶液中,置35~37.5℃温箱中10~30小时,组织块消化,液体呈粘稠状,然后加入相当于原液1~10倍量的含胎牛血清培养基终止消化,分装于培养瓶或培养皿,置CO↓[2]培养箱,待细胞贴壁后更换含胎牛血清的培养基溶液,以后每隔2~4天换液一次,细胞贴壁融合后传代培养;传代培养2~4代,即时使用或冷冻保存备用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:高连如张宁坤杨晔丁青艾朱智明陈宇曹毅
申请(专利权)人:中国人民解放军海军总医院
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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