一种香菇多糖酯的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种香菇多糖酯的制备方法，包括如下步骤：将香菇多糖、短链脂肪酸混合均匀后加入催化剂浓硫酸，于２０～３０℃搅拌１５～２０小时，然后加入原料短链脂肪酸的碱金属盐中和剩余的硫酸，反应完全后，控制温度在８０℃以下减压蒸馏直至得到固体粗品，所得固体粗品用萃取剂萃取，过滤所得滤液控制温度在８０℃以下蒸干后即得香菇多糖酯。本发明专利技术提供的新的制备方法反应条件温和、生产成本低、设备投资少，易于实现工业化；并且本发明专利技术制得的香菇多糖酯可保持一级结构不被破坏，又可以改变多糖的空间构象，使之充分发挥效用；大大提高其抗病毒等活性，从而有望在有害病毒的预防和治疗上取得突破。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及香菇多糖酯的制备方法，特别是短链有机酸与香菇多糖的酯化方法。
技术介绍
多糖的分子修饰和结构改造对提高香菇多糖的生物活性具有重要意义。已有试验 证明，经过修饰的香菇多糖都具有较好的生物活性，其中酯化是一种很有效地结构修饰方 法，经酯化后的香菇多糖一般具有较好的抗病毒活性。酯化的方法有硫酸化、磷酸化、乙酰 化、烷基化、磺酰化、羧甲基化等，研究最多的是硫酸酯化多糖。向多糖引入硫酸根的方法视 主链糖单元的类型而定，对于呋喃型的糖单元，一般采用Nagasava法；若主链糖单元为吡 喃型单糖，通常采用Wolfrom法和二甲基甲酰胺溶剂法，前者应用较多。现有的经酯化过的 多糖虽然在抗病毒活性上有了很大的改善，但是这些酯化方法都有一个共同特点——修饰 反应过于激烈，这势必对多糖结构产生不同程度的破坏，进而影响其活性；连续用药又会出 现抗凝血和血小板减少等症状；而且硫酸酯化多糖体内疗效不明显。 为此，本申请专利技术人尝试以短链有机酸和香菇多糖为底物进行酯化反应，得到系 列短链有机酸多糖酯，以寻求更好的抗病毒产品。期刊《生物质化学工程》2009年43巻4 期文章《香菇多糖酶催化酯化技术及其抗病毒活性研究》以干香菇多糖为原料，在中性脂肪 酶催化下，进行香菇多糖和丙酸的酯化反应研究。通过单因素试验得出最优酯化反应条件 为反应时间30min、加酶量0. 05g、丙酸用量2mL、多糖用量0. lg和反应温度35。C，在此优 化的条件下，酯化度为12.26，红外光谱证实有酯键生成。该酯化多糖对H印G2215细胞分 泌的HBeAg有不同程度的抑制作用，其治疗指数TI大于2。该文献中，虽然修饰反应不激 烈，但是该法使用酶催化，成本增高，不利于工业化。
技术实现思路
为了克服多糖酯化修饰反应过于激烈，造成对多糖结构产生不同程度的破坏的缺点，本专利技术提供一种新的反应条件温和、生产成本低、设备投资少、多糖结构骨架不被破坏，易于实现工业化的香菇多糖酯的制备方法。 为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案 —种香菇多糖酯的制备方法，包括如下步骤将香菇多糖、短链脂肪酸混合均匀后 加入催化剂质量浓度80 98%硫酸，于20 3(TC搅拌15 30小时，然后加入所述短链 脂肪酸的碱金属盐以中和剩余的硫酸，反应完全后，控制温度在8(TC以下减压蒸馏直至得 到固体粗品，所得固体粗品用萃取剂进行萃取，过滤所得滤液控制温度在8(TC以下蒸干后 即得香菇多糖酯。本专利技术所述的萃取剂选择与香菇多糖酯极性相近的有机溶剂，如二氯甲 烷、正己烷、乙酸乙酯、石油醚等，优选二氯甲烷。 本专利技术所述的短链脂肪酸的体积用量以香菇多糖的质量计为2 4ml/g，优选为 2ml/g。 本专利技术所述的催化剂质量浓度80 98%硫酸的用量可用如下方式表示每4 8mL短链脂肪酸加入质量浓度80 98%硫酸的量以其含有的H2S04计相当于0. 05mL98% 的硫酸，即相当于1滴浓硫酸的量，优选为每6mL短链脂肪酸加1滴浓硫酸。所述的催化剂 优选浓硫酸，即质量浓度为98%的硫酸。 脂肪酸是指一端含有一个羧基的脂肪族碳氢链，通常把碳原子数在6个以下的脂 肪酸称为短链脂肪酸，在本专利技术的制备方法中，所述短链脂肪酸优选为乙酸、丙酸或丁酸。 所述的原料短链脂肪酸的碱金属盐可以是钠盐、钾盐等，本专利技术选择原料短链脂 肪酸的碱金属盐中和剩余硫酸，可避免引入其他杂质污染产物。本专利技术在加入短链脂肪酸 的碱金属盐后需进一步搅拌反应，优选反应时间为1. 5 5. 0小时。 本专利技术所述的香菇多糖和短链脂肪酸在浓硫酸催化下进行反应，可通过控制反应时间以控制香菇多糖酯的酯化度，在本专利技术所述的反应时间范围内一般延长反应时间有助于提高酯化度。本专利技术优选反应温度为常温，优选反应时间为15 20小时。 本专利技术推荐所述的萃取剂萃取具体按照如下操作往固体粗品中加入萃取剂泡洗，静置8 IO小时。 本专利技术所述的减压蒸馏以及最后滤液的蒸干需将温度控制在8(TC以下，优选控制 在60 80°C，以防止温度过高，酯化产物发生分解。 本专利技术推荐所述制备方法具体按照如下步骤进行将香菇多糖、短链脂肪酸混合 均匀后，加入催化剂于20 3(TC搅拌反应15 20小时，然后加入原料短链脂肪酸的钠盐 搅拌反应1. 5 5. 0小时，反应结束后，控制温度在60 8(TC条件下减压蒸馏直至得到 固体粗品，所得固体粗品中加入二氯甲烷泡洗，静置8 10小时后过滤，所得滤液经60 8(TC条件下以下旋转蒸发蒸出二氯甲烷和过量的短链脂肪酸得到粘稠的液体，放置固化即 得香菇多糖酯。 本专利技术制得的香菇多糖酯可以根据需要，通过控制反应条件，获得一定酯化度的多糖酯，且一级结构保持良好；本专利技术所制得的香菇多糖酯具有良好的抗病毒活性。 与现有技术相比，本专利技术提供的新的制备方法反应条件温和、生产成本低、设备投资少，易于实现工业化；并且本专利技术制得的香菇多糖酯可保持一级结构不被破坏，又可以改变多糖的空间构象，使之充分发挥效用；大大提高了抗病毒等活性，从而有望在有害病毒的预防和治疗上取得突破。附图说明 图1为未经酯化的香菇多糖红外图谱。 图2为实施例2反应12小时的有一定酯化度的多糖红外图谱。 图3为实施例1反应20小时的酯化度较高的多糖红外图谱。 图4为实施例1得到的残渣的红外图谱。 图5、图6、图7、图8分别是实施例3、4、5、6得到的多糖红外图谱。 具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于 此 实施例14 取香菇多糖粉末15. 5g于圆底烧瓶中，向其中加入31.5ml乙酸，搅拌摇匀后向其 中加入5滴浓硫酸，在多功能搅拌器上搭好装置后在常温下搅拌反应20小时左右。 向圆底烧瓶中加入2. 0g乙酸钠白色晶体后开始搅拌反应。4小时左右，搭好装置 蒸馏，将其用油浴水泵抽真空加热蒸出乙酸，大概在油浴温度为60°C时开始蒸出液体，十几 分钟后，在7『C左右的温度下蒸馏，抽真空直至得棕褐色干燥固体取出固体于圆底烧瓶中， 向其中加入足够的二氯甲烷(约150毫升)泡洗着，静置10小时。之后将此溶液抽滤得滤 渣和滤液，将此滤液在旋转蒸发仪上蒸出二氯甲烷、多余的乙酸后得粘稠的液体，久置固化 得产物，称量得13. 3g，红外分析，结果如图3所示，表明为酯化产物，羟基消失。 滤渣于真空干燥箱中(76°C )干燥后称量得9. 7g，取其一半滤渣①(4. 8g， 土黄色 粉末)放入烧杯中搅拌泡洗15小时后，抽滤得滤渣②，将其放入真空干燥箱中(76°C)干燥 得固体(2.8g，深褐坚硬块状固体)，红外分析，没有酯键吸收峰存在，如图4所示。残渣处 理，用以证明酯化产物都已被分离，在残渣中已经没有多糖酯。 实施例2 香菇多糖与乙酸在常温下搅拌反应时间为12小时左右，其他反应条件同实施例 1。所得产物的红外分析图谱如图2所示，结果显示，此时多糖已有一定的酯化度。 实施例3 底物香菇多糖与乙酸按照lg : 4ml左右的比例，乙酸浓硫酸按照6ml : 1滴的 比例，其他反应条件同实施例1。所得产物的红外分析图谱如图5所示，结果显示，此时多糖 已有一定的酯化度。 实施例4 将萃取剂二氯甲烷改为正己烷，其他条件同实施例l，最后得到酯化产物10.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种香菇多糖酯的制备方法，其特征在于所述制备方法包括如下步骤：将香菇多糖、短链脂肪酸混合均匀后加入催化剂质量浓度８０～９８％硫酸，于２０～３０℃搅拌１５～３０小时，然后加入所述短链脂肪酸的碱金属盐中和剩余的硫酸，反应完全后，控制温度在８０℃以下减压蒸馏直至得到固体粗品，所得固体粗品用萃取剂萃取，过滤所得滤液控制温度在８０℃以下蒸干后即得香菇多糖酯，所述萃取剂选自下列一种或任意几种的组合：二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、石油醚。

【技术特征摘要】
一种香菇多糖酯的制备方法，其特征在于所述制备方法包括如下步骤将香菇多糖、短链脂肪酸混合均匀后加入催化剂质量浓度80～98％硫酸，于20～30℃搅拌15～30小时，然后加入所述短链脂肪酸的碱金属盐中和剩余的硫酸，反应完全后，控制温度在80℃以下减压蒸馏直至得到固体粗品，所得固体粗品用萃取剂萃取，过滤所得滤液控制温度在80℃以下蒸干后即得香菇多糖酯，所述萃取剂选自下列一种或任意几种的组合二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、石油醚。2. 如权利要求1所述的香菇多糖酯的制备方法，其特征在于所述短链脂肪酸的体积用 量以香菇多糖的质量计为2 4ml/g。3. 如权利要求2所述的香菇多糖酯的制备方法，其特征在于每4 8mL短链脂肪酸中 加入的质量浓度80 98%硫酸的量以其含有的H2S04计相当于0. 05mL的浓硫酸。4. 如权利要求1 3之一所述的香菇多糖酯的...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨胜利，钱俊青，沈润溥，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]