一种生物医药技术领域的骨桥蛋白及其护肝用途，所述的蛋白的氨基酸序列如ＳＥＱ？ＩＤＮＯ：１所示；所述的蛋白的氨基酸序列如ＳＥＱ？ＩＤ？ＮＯ：２所示。所述的蛋白在制备用于治疗病毒性的、代谢性的或毒性病原学的急性、亚急性、爆发性或慢性肝病的药物中的用途。本发明专利技术所述蛋白可有效地排除或降低肝损伤的发展和肝细胞的死亡，将可能为今后临床肝损伤的治疗提供新的选择。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种骨桥蛋白。 所述的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:l所示。 所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO :2所示。 本专利技术还涉及一种如上所述的骨桥蛋白的护肝用途。 本专利技术所述的蛋白在制备用于治疗病毒性的、代谢性的或毒性病原学的急性、亚急性、爆发性或慢性肝病的药物中的用途 所述肝病为肝损伤。 所述肝病为化学性肝损伤。 所述化学性肝损伤为药物性肝损伤。 所述药物的制剂为肠外给药制剂。 所述肠外给药制剂为注射剂或注射用无菌粉末中的一种。 与现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果本专利技术在病毒性的、代谢性的或毒性病原学的病因情况下，提供了一种肝保护试剂可排除或降低肝损伤的发展和肝细胞的死亡。在给与肝损伤模型小鼠注射重组的小鼠OPN后小鼠体外周血中的谷丙转氨酶(ALT)(78. 6士59vs 186. 6±109. 0， p = 0. 018)水平显著低于对照组，相反如果给模型小鼠注射抗小鼠OPN抗血清后小鼠外周血中ALT水平要显著高于对照组，因为ALT是肝损伤的一个重要特征性指标之一，说明OPN能够减轻肝脏损伤，保护肝脏。同时，在组织学水平上也体现这一疗效。注射重组小鼠OPN的小鼠肝脏组织切片分析显示肝脏的坏死面积要显著小于对照组(11. 7±3. 4% vs 21. 0±4. 4%， p = 0. 0006)。以上实验数据充分说明了 OPN对肝脏的保护作用。附图说明 图1为注射rmSPPl后小鼠体内转氨酶水平变化示意 图2为注射抗SPP1抗体后小鼠体内转氨酶水平变化示意 图3为注射rmSPPl后小鼠肝再生期间肝损伤的变化示意图； 图4为注射rmSPPl后CC14诱导肝脏再生模型小鼠不同时间点的肝组织切片图； 图5为注射Anti-SPPl后小鼠肝再生期间肝损伤的变化示意图； 图6为注射Anti-SPPl后CC14诱导肝脏再生小鼠不同时间点的肝组织切片图。具体实施例方式以下实例将结合附图对本专利技术作进一步说明。本实施例在以本专利技术技术方案为前 提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的 条件。比例和百分比基于重量，除非特别说明。 术语化学性肝损伤，是指由各种毒性化学物质如细菌产生的内、外毒素，食物中 存在黄曲霉素、亚硝胺、酒精以及多种药物等对肝脏造成的损伤。 以下实施例的所述蛋白质是有着SEQ ID N0:1的氨基酸序列的物质，骨桥蛋白 指全长骨桥蛋白。人的骨桥蛋白序列如序列表中的SEQ ID N0:1所示，重组人全长骨桥蛋 白的氨基酸序列如SEQ ID NO :5所示。 以下实施例中术语骨桥蛋白还包括任何动物来源的骨桥蛋白，如小鼠、大鼠、牛 的骨桥蛋白等，只要其序列能够维持骨桥蛋白的生物活性，在人体内无抗原活性。优选该物 质是rhSPPl蛋白质及其突变体；其功能性活性片段或其类似物；具有高度同源性的同系物 以及编码包含SEQ ID NO :1描述的氨基酸序列的蛋白质的载体例如DNA载体(质粒或病 毒)。功能性活性片段或类似物可通过添加、插入、修饰、取代或缺失以上所列的氨基酸序列 中的一或多个氨基酸残基而形成。术语类似物也包括嵌合蛋白质、融合蛋白、抗独特型 抗体、上述化合物的前体和其它功能等效物或模拟物。 以下实施例的骨桥蛋白还指蛋白突变体和蛋白片段，如骨桥蛋白天然亚型。本实 施例的骨桥蛋白还表示骨桥蛋白表达之后的不同修饰，包括磷酸化、糖基化等形成不同的 蛋白形式。现已经知道人骨桥蛋白具有三个亚型，分别是OPNa(SEQ ID NO :1) 、 0PNb (SEQ IDN0 :2) 、0PNc(SEQ ID NO :3)。 以下实施例术语突变体是指氨基酸序列如SEQ ID NO : 1所述rhOPN的突变体。 相比于天然的OPN蛋白，该突变体与它们野生型相比，具有增强的活性和/或改变了的立体 专一性。天然蛋白的氨基酸序列突变体可通过向以下实施例的核苷酸中引入适当的核苷酸 变化、或通过体外合成所需多肽来制备。这些突变体包括，例如缺失、插入或替换该氨基酸 序列中的残基。可以通过缺失、插入和替换的组合以得到最终的构建体，提供最终的蛋白产CI 蛋白的同源性百分比由GAP(Needleman和Wunsh， 1970)分析(GCG程序)确定，其 中参数g即creation penalty = 5， g即extension penalty = 0. 3。被分析的序歹帐度 至少为15个氨基酸时，GAP分析就在参与测试的两个序列的至少为15个氨基酸的区域进 行测试。更优选地，被分析的序列长度至少为50个氨基酸时，GAP分析就在参与测试的两 个序列的至少为50个氨基酸的区域进行测试。更优选地，被分析的序列长度至少为100个 氨基酸时，GAP分析就在参与测试的两个序列的至少为IOO个氨基酸的区域进行测试。更 优选地，被分析的序列长度至少为250个氨基酸时，GAP分析就在参与测试的两个序列的至5少为250个氨基酸的区域进行测试。甚至更优选地，被分析的序列长度至少为500个氨基酸时，GAP分析就在参与测试的两个序列的至少为500个氨基酸的区域进行测试。 以下实施例涉及的方面还包括0PN蛋白类似物，在它们合成期间或合成后进行了不同的修饰，例如，通过生物素化、苄基化、糖基化、乙酰化、磷酸化、由已知保护/封闭基团的衍生作用、蛋白水解的切割作用、连接到抗体分子或其它细胞配体上等。这些修饰可以用来增加以下实施例0PN蛋白的稳定性和/或生物活性。 组合物 用于以下实施例或者含有以下实施例所述蛋白的组合物。通常，当以下实施例组 合物用于上述用途时，所述蛋白可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合制成不 同给药途径的药物剂型，如片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、口服液、醑剂、酊剂、 气雾剂、粉雾剂、注射剂、注射用无菌粉末、栓剂等。药学上可接受的成分是适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、剌 激和变态反应)即有合理的效益/风险比的物质。药学上可接受的载体是用于将以下实 施例的融合体蛋白传送给动物或人的药学上或食品上可接受的溶剂、悬浮剂或赋形剂。载 体可以是液体或固体。 以下实施例的蛋白可经过口服、静脉内、肌内或皮下途径给药。 上述剂型中可经口服给药的剂型为片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、醑 剂。固态载体包括淀粉、乳糖、磷酸氢钙、微晶纤维素、蔗糖、白陶土、微粉硅胶、滑石粉、低 取代羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮。而液态载体包括无菌水、乙醇、聚乙 二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)。在制备药物组合物 的过程中通常使用的佐剂包括调味剂、着色剂、防腐剂(如羟苯烷基丁酯、苯甲酸钠、山梨 酸)和抗氧化剂(如维生素E、维生素C、焦亚硫酸钠和二丁基羟基甲苯)。 上述剂型中可用于注射途径给药的剂型包括注射剂、注射用无菌粉末，它们是将 药物与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合制成以供注射给药的形式。溶剂包括无菌 水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇。此外，还需加入抑菌剂(如苯甲醇、羟苯丁酯、硫柳汞)、 等渗调节剂(如氯化钠、葡萄糖)、助悬剂(如羧甲基纤维素钠本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种骨桥蛋白，其特征在于，所述的蛋白的氨基酸序列如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１所示。
【技术特征摘要】
一种骨桥蛋白，其特征在于，所述的蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO1所示。2. —种骨桥蛋白，其特征在于，所述的蛋白的氨基酸序列如SEQ IDN0:2所示。3. —种根据权利要求1或者2所述的骨桥蛋白的护肝用途，其特征在于，所述的蛋白在制备用于治疗病毒性的、...
【专利技术属性】
技术研发人员：俞雁，袁运生，韩伟，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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