利用转座子构建病毒活载体重组疫苗的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用转座子构建病毒活载体重组疫苗的方法，以绿色荧光蛋白为报告基因、分别构建表达狂犬病病毒糖蛋白和猪瘟Ｅ２蛋白基因的表达盒，并克隆至转座子穿梭载体，在转座酶的介导作用下，分别与提纯的犬２型腺病毒和疱疹病毒Ｉ型全基因组发生重组，再利用转染试剂（脂质体等）将重组产物分别转染ＭＤＣＫ和Ｖｅｒｏ细胞，即可获得４株以绿色荧光蛋白为报告基因的重组病毒，即：表达糖蛋白的重组犬２型腺病毒、表达Ｅ２蛋白的重组犬２型腺病毒、表达糖蛋白的重组疱疹病毒Ｉ型和表达Ｅ２蛋白的重组疱疹病毒Ｉ型。免疫试验证明，表达Ｅ２基因的犬２型腺病毒和疱疹病毒Ｉ型活载体重组疫苗均可在猪体内诱导抗猪瘟病毒感染的免疫反应，表达糖蛋白基因的犬２型腺病毒和疱疹病毒Ｉ型活载体重组疫苗均可在犬体内诱导抗狂犬病病毒感染的免疫反应。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用转座子构建病毒活载体重组疫苗的方法，其特征为：在转座酶的作用下，使携带外源基因表达盒的转座子与载体病毒的全基因组发生重组，然后将重组产物转染病毒的包装细胞，获得表达外源基因的重组病毒，经常纯化后制成重组疫苗。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：扈荣良，刘晔，范志强，张菲，张守峰，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]