开关式核酸适体探针及其在肿瘤活细胞及活体检测中的应用制造技术

本发明专利技术属于核酸检测技术领域，具体公开了一种开关式核酸适体探针及其应用，该核酸适体探针包括探针本体和分别连接于该探针本体两端的荧光发生单元和荧光熄灭单元，探针本体包含有对目标肿瘤细胞具有特异性识别功能的核酸适体片段和与该核酸适体片段形成互补序列的核酸片段，核酸适体片段和核酸片段通过一７～１５ｎｍ长的连接片段连接形成一发夹型结构；核酸片段竞争性杂交核酸适体片段的能力弱于目标肿瘤细胞。本发明专利技术探针的应用可以是对缓冲液中肿瘤活细胞的特异性检测、对血清中肿瘤活细胞的有效检测及活动物体内肿瘤的实时荧光成像和活体检测中的至少一种。本发明专利技术的探针具有较高稳定性、特异性和灵敏性，其应用操作简单、快速、灵敏、特异、成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于核酸检测
，尤其涉及一种核酸适体探针及其在肿瘤检测中的应用。
技术介绍
肿瘤是威胁人类健康的常见疾病。对肿瘤细胞进行准确的免疫分型有利于实现肿 瘤的早期诊断和治疗，从而提高肿瘤治愈率。抗原-抗体反应是免疫学诊断的基础，过去几 十年间抗体技术的迅速发展对肿瘤诊断及治疗相关研究做出了巨大贡献，然而近年来核酸 适体的出现却使得抗体技术受到前所未有的挑战。核酸适体(又称Aptamer)是利用核苷酸之间严格的识别能力和亲和力而设计的 人工合成寡核苷酸，并通过指数富集配体的系统进化(systematic evolution of ligands by exponentialenrichment, SELEX)技术筛选而获得。核酸适体不仅具有类似抗体对靶标 高特异性和高亲和力的特点，更在许多方面优于抗体，如分子量小、无免疫原性、靶标种类 丰富(包括酶、生长因子、抗原、基因调节因子、细胞黏附分子、完整的肿瘤细胞等)、合成方 法简单且重复性好、修饰灵活以及便于长期贮存和常温运输等等。这些特性使得核酸适体 作为肿瘤诊断探针得到了广泛的关注和认可，而基于核酸适体的肿瘤识别与检测方法正本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种开关式核酸适体探针，其特征在于：该核酸适体探针包括探针本体和分别连接于该探针本体两端的荧光发生单元和荧光熄灭单元，所述探针本体包含有对目标肿瘤细胞具有特异性识别功能的核酸适体片段和与该核酸适体片段形成６～１２对碱基互补序列的核酸片段，所述核酸适体片段和核酸片段通过一７～１５ｎｍ长的连接片段连接形成一发夹型结构；所述核酸片段竞争性杂交所述核酸适体片段的能力弱于所述目标肿瘤细胞杂交核酸适体片段的能力。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王柯敏，石慧，何晓晓，叶晓生，伍旭，郭秋平，周冰，
申请(专利权)人：湖南大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]