抗甲状腺球蛋白单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种新的抗甲状腺球蛋白(Tg)单克隆抗体、包括该抗体的试剂盒、及其相关应用。本发明专利技术的抗Tg单克隆抗体可以特异性结合甲状腺球蛋白，表现出针对甲状腺球蛋白的高灵敏度和高特异性，不仅能够用于甲状腺球蛋白的检测，也可以用于甲状腺球蛋白抗体的检测，对临床上甲状腺疾病的诊断、检测和治疗具有重要意义。义。义。

【技术实现步骤摘要】
CDR2和V
L CDR3；其中，V
H CDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:13所示；V
H CDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:14所示；V
H CDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:15所示；V
L CDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:16所示；V
L CDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:17所示；V
L CDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:18所示。
[0010]在第二方面，本专利技术提供了一种核酸分子，其编码第一方面所述的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段。
[0011]在第三方面，本专利技术提供了一种载体，其包含第二方面所述的核酸分子。
[0012]在第四方面，本专利技术提供了一种表达细胞，其包含第二方面所述的核酸分子或第三方面所述的载体。
[0013]在第五方面，本专利技术提供了第一方面所述的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段在制备用于诊断甲状腺疾病的诊断剂中的用途。
[0014]在第六方面，本专利技术提供了一种用于诊断甲状腺疾病的试剂盒，其包括第一方面所述的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段以及使用说明。r/>[0015]综上，本专利技术提供了一种新的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段，其表现出特异性结合甲状腺球蛋白的高灵敏度和高特异性，由此能够用于甲状腺球蛋白以及抗甲状腺球蛋白抗体的定量检测，并且可以实现皮克级浓度的灵敏检测，对临床上甲状腺疾病如桥本病、格雷夫斯病、甲状腺腺瘤和甲状腺癌等的诊断、监测和治疗具有重要意义，例如能够有助于区分亚急性甲状腺炎和人为甲状腺毒症，用于区分完全没有甲状腺和甲状腺发育不全或其他病理状况，以及用于分化型甲状腺癌(DTC)患者的术后随访等。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0017]图1示出了本专利技术的单克隆抗体与甲状腺球蛋白以及血红蛋白(作为对照)的结合反应结果。
[0018]图2示出了本专利技术的重组单克隆抗体T5、T6、T7和T8与甲状腺球蛋白以及以及血红蛋白(作为对照)的结合反应结果。
[0019]图3示出了根据本专利技术的一个实施方案中通过夹心法采用磁微粒化学发光免疫分析时多个校准品浓度与发光强度的相关结果。
[0020]图4示出了根据本专利技术的一个实施方案的抗体组合T1
’
+T2
’
与罗氏试剂盒进行临床样本测值比对的回归分析结果。
[0021]图5示出了根据本专利技术的一个实施方案中通过竞争法采用磁微粒化学发光免疫分析时多个校准品浓度与发光强度的相关结果。
[0022]图6示出了根据本专利技术的一个实施方案的抗体组合T3
’
+T6与罗氏试剂盒进行临床样本测值比对的回归分析结果。
具体实施方式
[0023]在下文中，将结合附图对本专利技术进行详细的描述。需理解，以下描述仅以示例方式来对本专利技术进行说明，而无意于对本专利技术的范围进行限制，本专利技术的保护范围以随附权利要求为准。并且，本领域技术人员理解，在不背离本专利技术的精神和主旨的情况下，可以对本专利技术的技术方案进行修改。若并未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0024]除非另外定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所述主题所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。在对本专利技术进行详细描述之前，提供以下定义以更好地理解本专利技术。
[0025]在提供数值范围的情况中，例如浓度范围、百分比范围或比率范围，应当理解，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限与下限之间的、到下限单位的十分之一的各中间值以及在所述范围内的任何其他所述值或中间值包含在所述主题内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括在较小范围中，并且此类实施方案也包括在所述主题内，受限于所述范围中的任何特定排除的极限值。在所述范围包括一个或两个极限值的情况中，排除那些所包括的极限值中的任一个或两个的范围也包括在所述主题中。
[0026]在本专利技术的上下文中，很多实施方案使用表述“包含”、“包括”或者“基本/主要由
……
组成”。表述“包含”、“包括”或“基本/主要由
……
组成”通常情况下可以理解为开放式表述，表示不仅包括该表述后面具体列出的各要素、组分、组件、方法步骤等外，还包括其他的要素、组分、组件、方法步骤。另外，在本文中，表述“包含”、“包括”或者“基本/主要由
……
组成”在某些情况下也可以理解为封闭式表述，表示仅包括该表述后面具体列出的各要素、组分、组件、方法步骤，而不包括任何其他的要素、组分、组件、方法步骤。此时，该表述等同于表述“由
……
组成”。
[0027]为了更好地理解本教导并且不限制本教导的范围，除非另外指出，否则在说明书和权利要求中使用的表示数量、百分比或比例的所有数字以及其他数值在所有情况下都应理解为由术语“约”进行修饰。因此，除非相反地指出，否则在以下说明书和所附权利要求书中阐述的数值参数为近似值，其可以根据寻求获得的所需性质而变化。至少，每个数值参数应该至少根据所报告的有效数字的数值并通过应用普通的舍入技术来进行解释。
[0028]如本文所用，术语“抗体”是指通常由两对多肽链(每对具有一条“轻”(L)链和一条“重”(H)链)组成的免疫球蛋白分子。抗体轻链可分类为κ和λ轻链。重链可分类为μ、δ、γ、α或ε，并且可以据此分别将抗体的同种型定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在轻链和重链内，可变区和恒定区通过大约12或更多个氨基酸的“J”区(铰链区)连接，重链还包含大约3个或更多个氨基酸的“D”区。各重链由重链可变区(V
H
)和重链恒定区(C
H
)组成。重链恒定区由3个结构域(C
H1
、C
H2
和C
H3
)组成。各轻链由轻链可变区(V
L
)和轻链恒定区(C
L
)组成。轻链恒定区由一个结构域C
L
组成。抗体的恒定区可介导免疫球蛋白与宿主组织或因子，包括免疫系统的各种细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q)的结合。V
H
和V
L
区还可被细分为具有高变性的区域(称为互补决定区(CDR))，其间散布有较保守的称为框架区(FR)的区域。对于每条重链或轻链，其可变区各自包含三个CDR，即CDR1、CDR2和CDR3。因此，各V...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包括重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；其中，V
H CDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:13所示；V
H CDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:14所示；V
H CDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:15所示；V
L CDR1的氨基酸序列由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:16所示；V
L CDR2的氨基酸序列由SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:17所示；V
L CDR3的氨基酸序列由SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:12或SEQ ID NO:18所示。2.根据权利要求1所述的抗甲状腺球蛋白单克隆抗体或其抗原结合片段，其中，1)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:1
‑
3所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:4
‑
6所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；2)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:7
‑
9所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:10
‑
12所示的轻链互补决定区V
L
CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；3)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:13
‑
15所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:16
‑
18所示的轻链互补决定区V
L
CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；4)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:16
‑
18所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；5)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:3所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L
CDR2和V
L CDR3；6)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:15所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L
CDR2和V
L CDR3；7)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；8)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:15所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L
CDR2和V
L CDR3；9)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:15所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别
由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L
CDR2和V
L CDR3；10)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；11)所述重链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9所示的重链互补决定区V
H CDR1、V
H CDR2和V
H CDR3，所述轻链可变区包括氨基酸序列分别由SEQ ID NO:4
‑
6所示的轻链互补决定区V
L CDR1、V
L CDR2和V
L CDR3；或者12)所述重链可变区包括氨基酸序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳海桥，陈慧沣，覃杨柳，李燕飞，袁克湖，
申请(专利权)人：珠海重链生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：