一种抗体组合物及应用于检测血液中YKL-40浓度的方法技术

本发明专利技术涉及一种抗体组合物及应用于检测血液中YKL

【技术实现步骤摘要】
一种抗体组合物及应用于检测血液中YKL
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40浓度的方法


[0001]本申请涉及生物领域，具体的涉及一种抗体组合物及应用于检测血液中YKL
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40浓度的方法。

技术介绍

[0002]YKL
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40是一种40kda肝素和几丁质结合的糖蛋白,也被称为人软骨糖蛋白39(PC
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GPC39)。简称YKL
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40的依据是前三种n
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端基氨基酸、酪氨酸(Y)、赖氨酸(K)和亮氨酸(L)的一个字母编码和YKL
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40的表观分子量。人类YKL
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40基因位于染色体1Q31
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Q32上高度保守的区域以及YKL
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40的晶体结构已被描述。YKL
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40属于由不同种类的几丁质酶组成的糖基水解酶的18个家族,但YKL
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40没有任何酶的特性。
[0003]YKL
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40是分泌的体外的由多种细胞产生,似乎特别涉及到固有免疫系统的激活和细胞外基质重塑的细胞过程。YKL
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40诱导单核细胞成熟为巨噬细胞,由分化后期的巨噬细胞和激活的巨噬细胞分泌。研究表明,CD14+单核细胞向CD14、CD16+巨噬细胞的分化和成熟过程中,CD16+巨噬细胞表达YKL
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40。YKL
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40也被证明是血管细胞的粘附和迁移因子,并被分化血管平滑肌细胞(VSMCS)切断。YKL
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40蛋白表达于人类外膜血管内的VsmCS以及在不同组织的巨噬细胞和VSMCS亚群中,炎症和细胞外基质重塑与动脉粥样硬化斑块中相同。有关YKL
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40调节其作用的生理功能和机制的知识仍然很少。对不同类型的正常人体组织的免疫组织化学研究表明,具有高细胞活性的细胞。高水平的代谢活动和/或增殖,尤其具有高水平的YKL
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40表达。
[0004]两性血清或血浆YKL
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40水平无差异。在血清中,健康人的血清YKL
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40浓度没有明显的日变化、周变化或长期变化。同样,血清YKL
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40的浓度不受体育锻炼的影响。在糖尿病、肥胖或房颤患者的研究中,YKL
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40与HSCRP之间似乎没有或只有微弱的相关性在明显冠心病患者的研究中,YKL
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40与HSCRP呈正相关。相反的CRP是一种系统性炎症标记物,主要由肝细胞分泌,以应对诸如ILL
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6、YKL
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40等炎症原介质。然而,所有调查YKL
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40与IL
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6之间关系的研究均发现两者之间存在正相关。此外,在病态肥胖患者中发现单核细胞化学反应蛋白
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1(McP
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1)和YKL
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40之间存在紧密联系。McP
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1与脂肪组织中单核细胞贩运和巨噬细胞浸润有关它也是心血管死亡的重要预测因子。病态肥胖患者的YKL
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40水平升高,但尽管YKL
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40与巨噬细胞成熟和活化之间存在明显的联系,但没有研究发现YKL
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40与体重指数之间的联系。YKL
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40已经成为心血管疾病的一个有希望的标志。它对筛查有用,因为它可以在早期亚临床疾病中检测到,而且它似乎也有可能成为心血管事件和死亡率的预测者。
[0005]此外研究表明,YKL
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40在乳腺癌和结肠癌细胞中的异位表达分别导致肿瘤的形成并形成广泛的血管生成表型,重组YKL
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40蛋白促进血管内皮细胞的生成,而YKL
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40抑制肿瘤的血管生成。此外,对人类乳腺癌的免疫组化分析显示,YKL
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40的表达与血管密度有关。因此,在高分化和晚期癌症和复发性癌症中,高水平的YKL
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40可以用YKL
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40在血管生成和纤维化生成中的作用来解释,因为高分化肿瘤的特征是高血管化和细胞外基质的高周转。在患有各种类型的高度分化和晚期癌症以及复发性癌症的患者中也观察到YKL
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40水平升
高。因此，通过检测YKL
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40成为癌症检测的一个重要的标志物。
[0006]另外，采用ELISA方法共检测112例肝硬化患者以及114例健康者血清中YKL
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40蛋白水平，并进一步分析其在肝硬化中的诊断价值及其与肝硬化患者肝功能和现有肝纤维化指标的相关性。肝硬化组血清YKL
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40蛋白水平高于正常对照组(P＜0.001)；将肝硬化组和对照组作比较，ROC曲线分析血清YKL
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40蛋白对肝硬化的诊断效能，曲线下面积为0.934，YKL
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40在cutoff值为92.5ng/ml时，敏感度为81.3％，特异度为90.4％；通过相关性分析发现血清YKL
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40蛋白水平与肝功能Child
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Pugh分级和FIB
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4指数正相关。YKL
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40对肝硬化具有良好的诊断效力，能辅助诊断肝硬化并有助于判断肝硬化的严重程度。
[0007]但是目前，针对YKL
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40的单克隆抗体的开发还不够成熟，提供的可选的特别是高活性的特异性结合YKL
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40的单克隆抗体还不够多，有待于进一步的研究。

技术实现思路

[0008]本专利技术针对现有技术的需要，提供了一种针对YKL
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40的单克隆抗体及其应用方法。
[0009]具体的，所述的YKL
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40单克隆抗体命名为YKL
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40
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3C8，其重链可变区序列如SEQ ID NO：1所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO：2所示。
[0010]在一些实施方案中，所述抗YKL
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40抗体部分包含a)VH和b)VL，并且VH包含：SEQ ID NO:1的氨基酸序列，或其变体，所述变体与SEQ ID NO:1具有至少约80％(如至少约80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一个)的序列同一性；以及VL包含：SEQ ID NO:2的氨基酸序列，或其变体，所述变体与SEQ ID NO:2具有至少约80％(如至少约80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％中的任一个)的序列同一性。
[0011]在一些实施方案中，提供了具有一个或多个氨基酸替换的抗体变体。替代性诱变的目的位点包括HVR(或CDR)和FR。保守替换可以将氨基酸替换引入目的抗体中，并筛选具有所需活性的产品，例如，保留/改善的抗原结合，降低的免疫原性，或改善的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向YKL
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40蛋白的单克隆抗体，其特征在于命名为YKL
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40
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3C8，其重链可变区序列如SEQ ID NO：1所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO：2所示。2.一种抗体组合物，其特征在于所述抗体组合物含有权利要求1所述的单克隆抗体以及其他检测用的试剂。3.一种试剂盒，其特征在于含有权利要求2所述的抗体组合物。4.如权利要求1所述的单克隆抗体在制备用于检测样品中YKL
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4...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡俊，喻长杰，贾鹏飞，
申请(专利权)人：艾可泰科浙江控股有限公司，
类型：发明
国别省市：