一种降解邻甲基苯酚菌种的筛选方法，它涉及一种菌种的筛选方法。它解决了现有生物强化法筛选的菌株对煤化工废水中其他化学物质的抗性低，导致邻甲基苯酚的降解率低的问题。方法：一、取污泥废水混合物曝气后接种并培养，沉降后取上层菌液，投加药剂，培养后得菌悬液ａ；二、将菌悬液ａ接种并筛选培养，得培养物Ｉ；三、将培养物Ｉ接种并筛选培养，得培养物ＩＩ；四、将培养物ＩＩ接种于并筛选培养，得培养物ＩＩＩ；五、将培养物ＩＩＩ接种并筛选培养，得培养物ＩＶ；六、将培养物ＩＶ接种并富集培养，即得降解邻甲基苯酚菌种。本发明专利技术获得的菌株对煤化工废水中其他化学物质的抗性更强，对浓度为８００ｍｇ／Ｌ的邻甲基苯酚的降解率达到了９９．８％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种菌种的筛选方法。
技术介绍
煤化工企业排放的废水水质复杂，C0Dcr为2000 5000mg/L， B0D5/C0Dcr为0. 25 0. 4，总酚浓度为500 1200mg/L，挥发酚为150 300mg/L，氨氮为150 500mg/L，并含有少量的多环芳香族化合物、杂环化合物、石油烃和氰化物、硫化物等。在很多煤化工实际生产中产生的酚类物质可以占到总COD的一半以上，因此煤化工废水处理效果的关键就在于酚类物质的处理。煤化工废水中基本的酚类物质有苯酚，间苯二酚，邻苯二酚，对苯二酚，间甲基苯酚，对甲基苯酚，邻甲基苯酚，2-甲基-1 ， 3-苯二酚，3-甲基-1和2-苯二酚，其中邻甲基苯酚是最难被降解的物质之一。 目前降解邻甲基苯酚使用的生物强化法，通常采用单一的酚作为碳源直接从菌群中筛选高效降解菌种，由于碳源的单一性，导致此方式获得的菌株对煤化工废水中其他化学物质的抗性低，在实际的煤化工废水处理中，菌种的存活率低，无法实现菌种特有的降解性能，导致邻甲基苯酚的降解率低，仅为30. 5 51. 8%，影响出水效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有生物强化法筛选的菌株对煤化工废水中其他化学物质的抗性低，导致邻甲基苯酚的降解率低的问题，而提供。 降解邻甲基苯酚菌种的筛选方法按以下步骤实现一、取煤化工好氧段废水处理系统的污泥废水混合物，在34 36t:下曝气48 50h，然后按1 : 5的体积比将曝气后的污泥废水混合物接种于混合酚浓度为400mg/L的培养基中，在34 36。C下震荡培养18 24h后沉降30 40min，取上层菌液，然后向上层菌液中投加药剂，搅拌均匀后在34 36t:下震荡培养18 24h，得菌悬液a;二、按l : 20的体积比将菌悬液a接种于邻甲基苯酚浓度为200mg/L的筛选培养基中，然后在34 36。C下震荡培养18 24h，得培养物I;三、按1 : 20的体积比将培养物I接种于邻甲基苯酚浓度为400mg/L的筛选培养基中，然后在34 36t:下震荡培养18 24h，得培养物II;四、按l : 20的体积比将培养物II接种于邻甲基苯酚浓度为600mg/L的筛选培养基中，然后在34 36。C下震荡培养18 24h，得培养物III;五、按l : 20的体积比将培养物III接种于邻甲基苯酚浓度为800mg/L的筛选培养基中，然后在34 36。C下震荡培养18 24h，得培养物IV ;六、采用平板划线分离法将培养物IV接种于富集培养基上，在34 36t:下震荡培养18 24h，即得降解邻甲基苯酚菌种；其中步骤一中混合酚浓度为400mg/L的培养基为每升培养基中由0. 2gMgS04 H20、0. lgFeS04 H20、0. lgMnS04 H20、0. 2gCaCl2、0. 5gK2HP04、0. 5gNH2P04、0. 45g(NH4)2S04、0. lgNaCl、400mg混合酚和余量的蒸馏水组成，并调节pH至6. 9 7. 1，混合酚由苯酚、甲基酚、二甲基苯酚和苯二酚按质量比30 : io : io : 25混合而成；步骤一中投加药剂的每升菌悬液a中有0. 1 0. 3g MgS04 H20、0. 05 0. lgFeS04 H20、0. 05 0. lg MnS04 H20、0. 1 0. 3g CaCl2、0. 4 0. 6g K2HP04、0. 4 0. 6gKH2P04、0. 4 0. 5g(NH4)2S04、0.05 0. lg NaCl和1. 5 2. 5g葡萄糖；步骤二中邻甲基苯酚浓度为200mg/L的筛选培养基为每升培养基中由0. 1 0. 3gMgS04 H20、0. 05 0. lgFeS04 H20、0. 05 0. lgMnS04 H20、0. 1 0. 3gCaCl2、0. 4 0. 6gK2HP04、0. 4 0. 6gKH2P04、0. 4 0. 5g(NH4)2S04、0. 05 0. lgNaCl、200mg邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤三中邻甲基苯酚浓度为400mg/L的筛选培养基为每升培养基中由0. 1 0. 3gMgS04 H20、0. 05 0. lgFeS04 H20、0. 05 0. lgMnS04 H20、0. 1 0. 3gCaCl2、0. 4 0. 6gK2HP04、0. 4 0. 6gKH2P04、0. 4 0. 5g (NH4) 2S04、0. 05 0. lgNaCl、400mg邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤四中邻甲基苯酚浓度为600mg/L的筛选培养基为每升培养基中由0. 1 0. 3gMgS04 H20、0. 05 0. lgFeS04 H20、0. 05 0. lgMnS04. H20、0. 1 0. 3gCaCl2、0. 4 0. 6gK2HP04、0. 4 0. 6gKH2P04、0. 4 0. 5g (NH4) 2S04、0. 05 0. lgNaCl、600mg邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤五中邻甲基苯酚浓度为800mg/L的筛选培养基为每升培养基中由0. 1 0. 3gMgS04 H20、0. 05 0. lgFeS04 H20、0. 05 0. lgMnS04 H20、0. 1 0. 3gCaCl2、0. 4 0. 6gK2HP04、0. 4 0. 6gKH2P04、0. 4 0. 5g (NH4) 2S04、0. 05 0. lgNaCl、800mg邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤六中富集培养基由1000mL蒸馏水、4. 5 5. 5g牛肉膏、9 llg蛋白膝、19 21g琼脂禾口 4. 5 5. 5gNaCl制成，并调节pH至7. 5 8. 0。 本专利技术中以多种酚作为碳源，针对邻甲基苯酚进行特定筛选，所以获得的菌株对煤化工废水中其他化学物质的抗性更强，具有针对邻甲基苯酚特定的高降解性能。本专利技术中所得降解邻甲基苯酚菌种是酚降解菌群中的一份子，所以在投加入反应系统后，能迅速适应变化的环境配合菌群中其他菌株的降解，从而增强了对邻甲基苯酚的降解率，改善了菌群的结构，提高整体的降解效果。本专利技术中所得降解邻甲基苯酚菌种，在24h内对浓度为800mg/L的邻甲基苯酚的降解率达到了 99. 8% ;在废水3600C0D mg/L、酚浓度850mg/L、氰化物浓度35mg/L、氨氮浓度150mg/L、 Ph值为7. 5时投加本专利技术中所得降解邻甲基苯酚菌种到反应器中，水力停留时间24h， 35 °C下降解率由原来的COD 35 % 、酚45 % 、氰化物45 % ，增加为C0D45 % 、酚65 % 、氰化物55 % 、氨氮50 % ，说明本专利技术中所得降解邻甲基苯酚的菌种不仅对邻甲基苯酚一种物质起到高效降解的作用，同时对其他酚、氰化物也具有降解的作用，且降解效果明显提高，不造成菌群的失调致使某种产物积累，菌种的存活率高，提高了整体的降解效果。本专利技术的筛选方法成本低廉，简单易行。具体实施例方式具体实施方式一 本实施方式降解邻甲基苯酚菌种的筛选方法按以下步骤实现一、取煤化工好氧段废水处理系统的污泥废水混合物，在34本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种降解邻甲基苯酚菌种的筛选方法，其特征在于降解邻甲基苯酚菌种的筛选方法按以下步骤实现：一、取煤化工好氧段废水处理系统的污泥废水混合物，在３４～３６℃下曝气４８～５０ｈ，然后按１∶５的体积比将曝气后的污泥废水混合物接种于混合酚浓度为４００ｍｇ／Ｌ的培养基中，在３４～３６℃下震荡培养１８～２４ｈ后沉降３０～４０ｍｉｎ，取上层菌液，然后向上层菌液中投加药剂，搅拌均匀后在３４～３６℃下震荡培养１８～２４ｈ，得菌悬液ａ；二、按１∶２０的体积比将菌悬液ａ接种于邻甲基苯酚浓度为２００ｍｇ２００ｍｇ邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤三中邻甲基苯酚浓度为４００ｍｇ／Ｌ的筛选培养基为每升培养基中由０．１～０．３ｇＭｇＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＦｅＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＭｎＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．１～０．３ｇＣａＣｌ↓［２］、０．４～０．６ｇＫ↓［２］ＨＰＯ↓［４］、０．４～０．６ｇＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］、０．４～０．５ｇ（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］、０．０５～０．１ｇＮａＣｌ、４００ｍｇ邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤四中邻甲基苯酚浓度为６００ｍｇ／Ｌ的筛选培养基为每升培养基中由０．１～０．３ｇＭｇＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＦｅＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＭｎＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．１～０．３ｇＣａＣｌ↓［２］、０．４～０．６ｇＫ↓［２］ＨＰＯ↓［４］、０．４～０．６ｇＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］、０．４～０．５ｇ（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］、０．０５～０．１ｇＮａＣｌ、６００ｍｇ邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤五中邻甲基苯酚浓度为８００ｍｇ／Ｌ的筛选培养基为每升培养基中由０．１～０．３ｇＭｇＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＦｅＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．０５～０．１ｇＭｎＳＯ↓［４］.Ｈ↓［２］Ｏ、０．１～０．３ｇＣａＣｌ↓［２］、０．４～０．６ｇＫ↓［２］ＨＰＯ↓［４］、０．４～０．６ｇＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］、０．４～０．５ｇ（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］、０．０５～０．１ｇＮａＣｌ、８００ｍｇ邻甲基苯酚和余量的蒸馏水组成；步骤六中富集培养基由１０００ｍＬ蒸馏水、４．５～５．５ｇ牛肉膏、９～１１ｇ蛋白膝、１９～２１ｇ琼脂和４．５～５．５ｇＮａＣｌ制成，并调节ｐＨ至７．５～８．０。／Ｌ的筛选培养基...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：方芳，韩洪军，王伟，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]
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