复合酶法水解猪血生产血肽素制造技术

复合酶法水解猪血生产血肽素属生化技术领域，本发明专利技术涉及血球蛋白空间结构展开和分 子链断裂水解。主要过程为鲜血离心提取红细胞，溶胀后与血浆混合，调整pH 2-3，加等 量95％乙醇和2.8％H2O2，加氢氧化钠80℃保温2h，调pH8加木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性 蛋白酶等37℃酶解4h后调节pH3.0，加胃蛋白酶37℃酶解4h，灭酶干燥得血肽素产品。 本技术含血球蛋白内部基团展开、亚铁血红素氧化、复合酶水解等，水解率90％以上， 解决了常规工艺血球蛋白水解难，过程复杂难题；本方法生产的血肽素产品肽含量达60％以 上，同时保存了血液中AgI免疫功能因子等，有增强机体免疫的功能，适合屠宰场等血综合 加工。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提出的血浆蛋白复合酶法水解生产血肽素的方法及其应用，属于生物
科技专利技术。2
技术介绍
自1993年以来，我国肉类产量一直处于世界第一位，生猪产量接近世界总产量的一半， 从产血量来看，牛的总出血量为活牛重的4.2%，猪为3.5%，羊为3.2%，目前我国的 动物血液总产量超过1.2乂10、，但利用率很低，资源浪费十分严重。猪血液回收利用比较先进的国家是欧州各国，丹麦、瑞典两国每年生产血粉达IO，OOO 一 15,000吨，瑞典屠宰血液利用率100%,欧洲其他国家的利用率平均约为90%，我国大 中型肉联厂及冷冻厂基本上都将猪血利用起来，利用率大约45%，动物血液是一种宝贵的 资源，但多年来我国一直未得到充分的开发利用，新鲜血液中除80%左右的水分外，蛋白 质含量大于17%，矿物质(钾、钠、镁、磷)多以无机盐的形式存在，100g血液中铁的含量 高达40rag以上。本专利技术采用哺乳动物血液为原料，利用生物技术将血液中的大分子蛋白质物质控制降 解为小肽和氨基酸(混合物称为血肽素，该低聚物混合体具有较好的可溶性)，同时最大限 度保留了血液中的有机铁、铜、维生素等全价营养素，它含有18种氨基酸，以氨计蛋白质 含量大于70%，有机铁素含量大于2000mg/kg，另含少量铜、锌、钙等元素；血肽素产 品是采用生物技术生产的一种全天然组分和高附加值的产品，可以提供易于人体吸收的有 机铁及血红蛋白降解多肽和氨基酸等营养因子，是预防和改善缺铁性贫血和营养性贫血的 食疗佳品，缺铁性贫血是一个世界性问题，在我国也十分普遍，以婴儿、学龄前儿童、育 龄妇女和青少年中较为常见，日前国内对合理利用动物血液改善缺铁贫血现象的呼声很高， 血肽素产品的推出对改善缺铁性贫血人群的健康状况，提高生活质量和工作效率将起到积 极的作用。血球蛋白质分子的空间结构为球形，故称血球蛋白，分子的基团和键被紧紧包裹在球 形空间结构的内部，这样就造成水解的难度，就是强酸、强碱水解都很难水解完全，这些 原因造成目前市场上还没有成功生产血肽素的产品，基于这些情况，本专利技术解决了三个方 面的问题(1)、采用氧化还原法将亚铁氧化成高铁离子，反应的同时加入试剂改变血球蛋 白分子的空间结构，使其球形结构展开利于酶分子的活性基团的接住水解；(2)、本专利技术采 用了氧化脱色、水解一步到位法，缩减了工艺，降低了生产成本；(3)、本专利技术采用了复合酶法水解使得水解彻底，产品得率、质量高。3
技术实现思路
pH值不大于2.5时，亚铁血红素与珠蛋白的结合最疏松，而珠蛋白的pl大于3.0，首3先调整血液pH值3.0使亚铁血红素与珠蛋白结合疏松，利于分离，在此种情况下加入一定 比例的乙醇反应，使得乙醇与珠蛋白中的一些基团反应，形成凝胶状态，此时加入HA将分 离出的亚铁血红素中的亚铁氧化成三铁离子，这样容易颜色由血红色变成淡黄色，这样水解后的产品色 泽好。经过上述工艺处理后，添加复合酶法水解血红蛋白，目前水解各种蛋白大都采用强酸强 碱水解，水解时间长，部分氨基酸被破坏，中和后产生大量的NaCl很难完全去除，本专利技术 采用复合酶法协同水解，解决了单酶水解成度低的难题，又解决了强酸强碱水解破坏氨基酸 的难题。具体实施例方式(1) 、取新鲜猪血加入0.6%—1.0%的柠檬酸三钠，搅拌均匀使其充分溶解，4000—5000rmp离心20分钟，收集沉淀；向沉淀中加入l: 1的蒸馏水使红细胞溶胀、破碎，为了达到血红细胞充分破碎，每隔30分钟高速搅拌一次10分钟，4个小时后将此血液与血浆混 合。(2) 、将上述混合液用6NHC1调整pH为2. 0—3. 0，调整好pH后向血液中加入等体积 的95%的乙醇，边加边搅拌，溶液开始变粘稠后加入2.8% (血液体积计)的仏02搅拌均匀， 静止30分钟，此时亚铁血红素变成三铁血红素，溶液由以前的鲜红色变成淡黄色并形成胶 状，血红蛋白的球形结构展开利于下一步水解。(3) 、向溶液中加入3: 1的20%氢氧化钠，8(TC保温2小时。(4) 、调节pH7.6-7.8，分别加入木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶(枯草芽胞杆菌 产)200-400U/ml、 350-550U/ml、 550-700U/ml (以血液体积计)，37。C ±0. 5。C保温4h以上。(5) 、将上述水解液调整pH为2. 0-3. 0，加入450U/ml的胃蛋白酶(以血液体积计)， 37。C土0.5。C水解4h以上。(6) 、将上述酶解完全的酶解液加热煮沸5分钟灭酶，然后进行喷雾干燥得淡黄色血肽 素产品。权利要求1、向溶血血液中加入92％以上的等体积食用级乙醇，使血球蛋白分子的球形结构展开，利于酶分子与其基团接触水解。2、 向上述液中加入11202使亚铁离子氧化成三价铁离子，使得溶液的颜色由鲜红色变成 淡黄色，达到絳色的目的，产品颜色为淡黄色。3、 复合酶法水解过程中，酶的种类以及配比，水解时间、温度控制等要素:木瓜蛋白酶、 胰蛋白酶、碱性蛋白酶(枯草芽胞杆菌产)分别加入200-400U/ml、 350-550U/ml 、 550-700U/ml (以血液体积计)，水解温度为35—39。C， pH7. 2-7. 8，水解时间3—5h。4、 将上述水解液调整pH2.0-3.0之间，加入450U/ml的胃蛋白酶(以血液体积计)，35 一39。C水解4h以上，此时血液中蛋白质水解率达到95°/。以上。全文摘要复合酶法水解猪血生产血肽素属生化
，本专利技术涉及血球蛋白空间结构展开和分子链断裂水解。主要过程为鲜血离心提取红细胞，溶胀后与血浆混合，调整pH 2-3，加等量95％乙醇和2.8％H₂O₂，加氢氧化钠80℃保温2h，调pH8加木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶等37℃酶解4h后调节pH3.0，加胃蛋白酶37℃酶解4h，灭酶干燥得血肽素产品。本技术含血球蛋白内部基团展开、亚铁血红素氧化、复合酶水解等，水解率90％以上，解决了常规工艺血球蛋白水解难，过程复杂难题；本方法生产的血肽素产品肽含量达60％以上，同时保存了血液中AgI免疫功能因子等，有增强机体免疫的功能，适合屠宰场等血综合加工。文档编号C12P21/06GK101509030SQ20091005865公开日2009年8月19日 申请日期2009年3月20日 优先权日2009年3月20日 公开号200910058656.8专利技术者凯 伍, 刚 孙, 戢长明, 游敬刚, 潘红梅, 功 陈 申请人:四川省食品发酵工业研究设计院;四川四海食品股份有限公司 被以下专利引用 (1),本文档来自技高网...

【技术保护点】
向溶血血液中加入９２％以上的等体积食用级乙醇，使血球蛋白分子的球形结构展开，利于酶分子与其基团接触水解。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：潘红梅，孙刚，游敬刚，陈功，伍凯，戢长明，
申请(专利权)人：潘红梅，孙刚，游敬刚，陈功，伍凯，戢长明，
类型：发明
国别省市：90