水痘带状疱疹病毒的抗原变体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种抗原变体及其用途，该抗原变体是水痘带状疱疹病毒的表面蛋白(gE)中的一种蛋白质，该蛋白质表现出高表达水平和高免疫原性。因此，当使用该抗原变体作为疫苗组合物时，与活病毒疫苗相比，疫苗组合物具有更优异的安全性，并且抗原变体在宿主细胞中的表达水平高于其他抗原，因此可用作疫苗，所述疫苗用于预防或治疗水痘或由水痘带状疱疹病毒引起的带状疱疹。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】水痘带状疱疹病毒的抗原变体及其用途
本专利技术涉及水痘带状疱疹病毒抗原变体及其用途，更具体地，涉及具有高表达水平和高免疫原性的水痘带状疱疹病毒抗原变体，其选自水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原变体，和一种用于预防或治疗水痘或带状疱疹的疫苗组合物，其包含水痘带状疱疹病毒抗原变体作为活性成分。
技术介绍
水痘带状疱疹病毒(VZV)是一种主要在儿童和青少年中引起水痘的病毒。一旦发生感染，VZV会在感觉根和颅神经神经节细胞中保持休眠状态数年，并在免疫力降低时重新激活并在成年后引起带状疱疹。水痘具有高度传染性。一旦发生感染，就会在全身引起水疱样皮疹，并伴有发烧和全身不适。在大多数正常儿童中，水痘很少会发展到严重的状况，最终会发展为自限性疾病。然而，已知在接受器官移植或化学疗法的患者中，有很多水痘发展为严重症状的病例发生(AdrianaWeinberg等，传染病杂志，200(7)：1068，2009；JudithBreuer等，疫苗专家评论，2017年，DOI：10.1080/14760584.2017.1394843)。带状疱疹的最初症状是全身酸痛，如全身疼痛，或严重的瘙痒、刺痛和灼烧感，并伴有如同被刀刺伤一样剧烈的疼痛感。带状疱疹是一种疾病，几天后会出现水疱，随着皮肤损伤的增加疼痛会增加，老年患者往往抱怨疼痛更严重。即使在带状疱疹被治愈的情况下，也可能留下神经痛作为后遗症。众所周知，在60岁或60岁以上的人群中，神经痛可能使他们无法入睡，使他们抱怨慢性疲劳，即使在轻微接触或摩擦时也会感到剧烈疼痛，甚至导致抑郁，尽管这种神经痛在40岁或以下的成年人中相对罕见。针对水痘的代表性预防疫苗包括例如VARIVAX(默克公司)和VARILRIX(葛兰素史克生物制品公司)等产品，它们是使用Oka菌株开发的，该菌株是1970年开发的减毒菌株。在韩国，产品如Suduvax(绿十字公司)，是使用1980年开发的MAV/06菌株生产的，可商购。所讨论的市售活疫苗显示出平均80％的保护效力，这意味着即使在接种疫苗后，仍有20％的疫苗接种者发生了感染。稳定性问题不断被指出，例如由疫苗中所含活病毒引起的水痘和带状疱疹的发生。ZOSTAVAX(默克公司)是使用Oka毒株生产的减毒活疫苗，被开发为针对带状疱疹的预防性疫苗。由于该疫苗中含有大量病毒，因此该疫苗已在美国和韩国获得批准并销售的条件是应用于50岁或50岁以上的成年人，而不是儿童或青少年。最近，葛兰素史克生物制品公司开发了一种由病毒表面蛋白(gE)和佐剂组成的疫苗，该疫苗旨在用于50岁或以上的成年人，并已在临床试验中证明具有预防作用(美国专利号7,939,084，于2011年1月7日授权)。在疫苗开发的早期，主要用减毒活细胞或死细胞作抗原。然而，由于安全性问题和病原体中存在的免疫抑制物质，此类抗原的开发正转向蛋白质抗原的开发，所述蛋白质抗原具有清楚的结构和组成，并可以为疾病防御建立所必需的免疫力。因此，本专利技术人经过深入的努力，开发了一种在宿主细胞中具有高表达水平的蛋白抗原，所述蛋白抗原在不影响免疫原性的前提下，提高水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原的产量。结果，专利技术人生产了不同长度的水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体并测量了其表达水平，从而在抗原变体中鉴定了高表达水平的特定氨基酸序列。从而完成了本专利技术。专利技术公开内容技术问题本专利技术的目的是提供一种具有高表达水平和高免疫原性的特异性抗原变体，其选自水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原变体。本专利技术的另一个目的是提供编码抗原变体的基因，包含该基因的重组载体和用该重组载体转化的宿主细胞。本专利技术的又一个目的是提供一种用于预防或治疗水痘或带状疱疹的疫苗组合物，其包含抗原变体作为活性成分。本专利技术的又一个目的是提供一种预防或治疗水痘或带状疱疹的方法，其使用包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物。本专利技术的又一个目的是提供包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物的用途，用于预防或治疗水痘或带状疱疹。本专利技术的又一个目的是提供包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物的用途，用于制备预防或治疗水痘或带状疱疹的药物。技术问题的解决方案为了实现上述目的，在本专利技术中，提供了一种水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，其特征在于该抗原变体包括选自以下组的任一氨基酸残基的羧基端截断的变体：氨基酸序列由SEQIDNO：1所示的水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原中的第525位至第543位氨基酸残基。另外，在本专利技术中，提供了编码抗原变体的基因，包含该基因的重组载体和用该重组载体转化的宿主细胞。另外，在本专利技术中，提供了一种用于预防或治疗水痘或带状疱疹的疫苗组合物，其包含抗原变体作为活性成分。另外，在本专利技术中，提供了一种预防或治疗水痘或带状疱疹的方法，使用包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物。另外，在本专利技术中，提供了包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物的用途，用于预防或治疗水痘或带状疱疹。另外，在本专利技术中，提供了包含抗原变体作为活性成分的疫苗组合物的用途，用于制备预防或治疗水痘或带状疱疹的药物。附图说明图1示意性地示出了本专利技术的实验过程。图2显示了各种长度的水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原的氨基酸序列。图3示出了比较水痘带状疱疹病毒抗原的gE片段表达水平的蛋白质印迹结果。图4示出了通过蛋白质印迹比较包含在由葛兰素史克生物学公司生产的水痘带状疱疹病毒疫苗Shingrix中的表面蛋白抗原(GSKgE546氨基酸)，和由本专利技术人生产的抗原变体(MogamgE537氨基酸)的表达水平的结果。图5示出了通过抗gE特异性IgGELISA比较包含在由葛兰素史克生物学公司生产的水痘带状疱疹病毒疫苗Shingrix中的表面蛋白抗原(GSKgE546氨基酸)，和由本专利技术人生产的抗原变体(MogamgE537氨基酸)的体液免疫应答结果。图6示出了通过小鼠IFN-γELISA比较包含在由葛兰素史克生物学公司生产的水痘带状疱疹病毒疫苗Shingrix中的表面蛋白抗原(GSKgE546氨基酸)，和本专利技术人生产的抗原变体(MogamgE537氨基酸)的细胞介导的免疫应答(CMI)的结果。图7说明了通过抗gE特异性IgGELISA比较水痘带状疱疹病毒抗原的gE片段的体液免疫应答的结果。图8示出了通过抗gE特异性IgGELISA比较作为水痘带状疱疹病毒抗原的gE片段的体液免疫应答结果，随后总结显示出抗原特异性抗体反应的响应者的数量。专利技术实施的最佳方式除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域的技术人员通常理解的相同含义。通常，本文使用的术语是本领域公知的且通常使用的。在本专利技术中，为了提高生产力而不影响免疫原性，从水痘带状疱疹病毒蛋白抗原中开发出在宿主细胞中具有高表达水平的抗原，进行通过产生不同长度的表面蛋白(gE)抗原变体，然后测量其表达水平的实验。在结果中，本专利技术人生产的水痘带状疱疹病毒表面蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，包括一变体，该变体是水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原中选自第525位至第543位个氨基酸残基的任何一个氨基酸残基的羧基末端的截断，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180523 KR 10-2018-00582191.一种水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，包括一变体，该变体是水痘带状疱疹病毒表面蛋白(gE)抗原中选自第525位至第543位个氨基酸残基的任何一个氨基酸残基的羧基末端的截断，其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。


2.如权利要求1所述的水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，其中SEQIDNO:1所示氨基酸序列中的第40个氨基酸残基是苏氨酸。


3.如权利要求1所述的水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，其中SEQIDNO:1所示氨基酸序列中的第536个氨基酸残基是亮氨酸。


4.如权利要求1所述的水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体，其中所述抗原变体由SEQIDNO:2至8和SEQIDNO:21至23所示的任一氨基酸序列表示。


5.一种基因，其编码如权利要求1-4中任一项所述的水痘带状疱疹病毒表面蛋白抗原变体。


6.如权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：南效廷，池可英，金恩美，
申请(专利权)人：财团法人牧岩生命科学研究所，
类型：发明
国别省市：韩国;KR