特异于冠状病毒刺突蛋白的抗体及其用途制造技术

本公开提供了一种冠状病毒刺突

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】特异于冠状病毒刺突蛋白的抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及冠状病毒刺突
(S)
蛋白特异性抗体及其用途
。

技术介绍

[0002]冠状病毒
(coronavirus)
于
1937
年首次在鸡身上发现，然后在
1965
年通过狗
、
猪
、
鸟等动物，在人类身上发现
。
冠状病毒命名的原因是由于类似于日冕现象，即在日全食期间太阳的光球层被月亮覆盖，日冕在太阳周围发出白光
。
[0003]已知冠状病毒主要引起人和动物的肺炎和肠炎，偶尔会引起神经系统感染和肝炎
。
冠状病毒是一种大小为约
100nm
至约
120nm
的正义
RNA
病毒，属于冠状病毒科，并具有球形外膜
。
冠状病毒总共由5种结构蛋白组成：最外面的刺突蛋白
(S)、
血凝素
‑
酯酶
(HE)
蛋白
、
跨膜
(M)
蛋白
、
小膜
(E)
蛋白和核壳
(N)
蛋白
。
其中，刺突蛋白是一种作为配体与细胞受体结合并诱导宿主细胞与病毒融合的蛋白质，已知其突变频率最高
。
[0004]迄今为止，冠状病毒被认为是一种很少感染人类并且主要感染动物如狗
、
猪
、<br/>牛等的病原体
。
即使当冠状病毒感染人类时，作为引起呼吸道症状的众多病毒之一，它仅引起发冷或肠道疾病如腹泻等，对儿童不是很危险
。
然而，由于冠状病毒的新毒株
(
变体
)
已被鉴定为引起全世界数百例死亡和数千例患者的严重急性呼吸综合征
(SARS)、
中东呼吸综合征
(MERS)
和
2019
冠状病毒病
(COVID
‑
19)
的病原体，因此它们已逐渐开始受到关注
。
[0005]COVID
‑
19
于
2019
年底首先被鉴定，并已在全球范围内传播，导致进行性大流行，是由
SARS
‑
冠状病毒
‑2引起的传染病
。
截至
2020
年5月7日，全球
187
个国家报告病例超过
375
万例，死亡人数达
26.3
万例，
124
万例恢复健康
。
常见症状有发烧
、
咳嗽
、
疲劳
、
呼吸急促以及嗅觉和味觉丧失
。
在大多数情况下，症状轻微，但有些会发展为病毒性肺炎
、
多器官衰竭和细胞因子风暴
。
从出现症状到发病的时间一般为5天左右，但也可能在2天到
14
天之间
。
病毒主要通过密切接触，有时通过咳嗽
、
打喷嚏和说话时产生的飞沫在人与人之间传播
。
它在出现症状后的前3天内最具传染性，并且在症状出现前或甚至疾病末期均可传播
。
诊断
COVID
‑
19
的标准方法使用来自鼻咽拭子的实时逆转录聚合酶链式反应
(rRT
‑
PCR)。
[0006]SARS
‑
冠状病毒
‑2已知是属于乙型冠状病毒属的变异冠状病毒，并且被认为来源于蝙蝠
(
其是各种冠状病毒的主要携带者
)(Antiviral Res.,101:45
–
56)
，并且其确切的感染途径尚未完全阐明
。
[0007]另一方面，由于迄今为止开发的抗病毒剂表现出严重的副作用，因此在它们的应用中需要非常小心
。
这些治疗剂是无效的，并且也出现副作用
。
此外，还没有新的具有优异的感染抑制作用和低毒性的冠状病毒治疗剂用于预防和治疗
SARS
‑
冠状病毒
‑2的发病，并且对其开发的需求正在增加
。
[0008]本专利技术人致力于开发
SARS
‑
CoV
‑2的新型治疗剂，结果发现，特异于
SARS
‑
CoV
‑
2S
蛋白的受体结合结构域
(RBD)
的新型抗体对冠状病毒，特别是
SARS
‑
CoV
‑2具有治疗作用，从而完成了本专利技术
。

技术实现思路

[0009]本专利技术的一个目的是提供一种特异性结合冠状病毒刺突蛋白的抗体或其抗原结合片段
。
[0010]本专利技术的另一个目的是提供一种编码本专利技术抗体或抗原结合片段的多核苷酸
、
包含该多核苷酸的表达载体和包含该表达载体的转化体
。
[0011]本专利技术的另一个目的是提供一种制备本专利技术抗体或抗原结合片段的方法
。
[0012]本专利技术的另一个目的是提供一种用于诊断冠状病毒感染的组合物，所述组合物包含本专利技术抗体或抗原结合片段，以及包括该组合物的试剂盒
。
[0013]本专利技术的另一个目的是提供一种用于提供诊断冠状病毒感染的信息的方法，该方法包括使用本专利技术抗体或抗原结合片段检测生物样品中存在的冠状病毒的步骤
。
[0014]本专利技术的另一个目的是提供一种用于预防或治疗冠状病毒的药物组合物，该药物组合物包括本专利技术抗体或抗原结合片段
。
[0015]本专利技术的另一个目的是提供一种使用本专利技术抗体或抗原结合片段治疗冠状病毒的方法
。
附图说明
[0016]图1显示了通过
SDS
‑
PAGE
确认的纯化抗原的大小和纯度
。
[0017]图2显示了在表达和纯化通过文库筛选获得的抗
SARS
‑
CoV
‑2抗体后，通过
SDS
‑
PAGE
确认的抗
SARS
‑
CoV
‑2抗体的大小和纯度
。
具体地，通过非还原性
PAGE
确认完整抗体的大小
(
大约
150kDa)
，通过还原性
PAGE
确认抗体的重链
(
大约
50kDa)
和轻链
(
大约
25kDa)
的大小
。
[0018]图3显示了进行夹心
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种特异性结合冠状病毒刺突蛋白的抗体或其抗原结合片段
。2.
根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：选自包括以下任一序列的组的任何一个或多个重链可变区：
SEQ ID NO:5
‑
45、SEQ ID NO:87
‑
91
和
SEQ ID NO:97
‑
115
；以及选自包括以下任一序列的组的任何一个或多个轻链可变区：
SEQ ID NO:46
‑
86、SEQ ID NO:92
‑
96
和
SEQ ID NO:116
‑
131。3.
根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：选自包括以下任一序列的组的任何一个或多个重链可变区：
SEQ ID NO:87
‑
91
和
SEQ ID NO:100
‑
115
；以及选自包括以下任一序列的组的任何一个或多个轻链可变区：
SEQ ID NO:92
‑
96
和
SEQ ID NO:116
‑
131。4.
根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述冠状病毒是
SARS
‑
CoV、SARS
‑
CoV
‑2或
MERS
‑
CoV。5.
根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与两种或更多种冠状病毒具有交叉反应性
。6.
根据权利要求5所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述与两种或更多种冠状病毒具有交叉反应性的抗体或其抗原结合片段包含：选自包括以下任一序列的组的一个或多个重链可变区：
SEQ ID NO:6
‑
12、SEQ ID NO:14
‑
22、SEQ ID NO:24、25、32、37
和
45、SEQ ID NO:87
‑
91
和
SEQ ID NO:97
‑
99
；以及选自包括以下任一序列的组的一个或多个轻链可变区：
SEQ ID NO:47
‑
53、SEQ ID NO:55
‑
63、SEQ ID NO:65、66、73、78
和...

【专利技术属性】
技术研发人员：金董植，李秀娥，长新娥，姜志勋，赵基俊，朴秀彬，韩永，
申请(专利权)人：财团法人牧岩生命科学研究所，
类型：发明
国别省市：