用于A型口蹄疫病毒的疫苗组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于A型口蹄疫病毒的疫苗组合物和一种在受试者中引起针对A型口蹄疫病毒的免疫应答的方法。根据本发明专利技术，一种疫苗组合物和引起免疫应答的方法可用于有效防御出现在韩国和邻近东亚国家(如中国大陆)的A型口蹄疫病毒的亚洲区域型。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于A型口蹄疫病毒的疫苗组合物
本专利技术涉及参与引起针对A血清型的口蹄疫病毒的免疫应答的多肽、多核苷酸、质粒和包含它们的疫苗组合物。此外，本专利技术涉及在受试者中引起针对A血清型的口蹄疫病毒的免疫应答的方法。
技术介绍
口蹄疫(FMD)是一种病毒性疾病，能够感染偶蹄类动物(偶蹄目)，例如牛、猪、绵羊、山羊、鹿等家畜，以及各种野生动物，其特征是在口、鼻、乳头、蹄等处形成水泡。口蹄疫具有高度传染性，死亡率达40％以上，是一种具有社会经济影响力的疾病。为此，世界动物卫生组织(OIE)将口蹄疫列为A类疾病并进行管理，在大多数国家，口蹄疫被定为一类传染病。此外，在过去十年中，几乎每个大陆都发生了口蹄疫疫情，造成了严重的经济损失。口蹄疫病毒(FMDV)是一种正义、单链RNA病毒，属于小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthovirus)。它不仅侵袭性强，而且感染范围广。它的潜伏期因动物而异，但最短约为6至10天。而且，由于它在显示出任何临床症状之前就已经从体内排出，因此很容易传播。它通过呼吸系统、消化系统、生殖系统等传播。特别是通过呼吸系统释放的病毒，可通过空气传播250公里。根据VP1编码区的序列，FMDV可分为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和亚洲1(Asia1)共7个血清型，根据其基因特性，每个血清型可分为约80个亚型。到目前为止，亚洲(包括韩国)和欧洲发生的口蹄疫多为O血清型，因此韩国多采用O血清型疫苗接种。然而，关于最近在韩国一些地区发生的口蹄疫，已证实是A血清型病毒引起了额外的感染。A血清型FMDV有三个区域型(topotypes)：ME-SA(中东-南亚)、AFRICA(非洲)和ASIA(亚洲)。即使在这些区域型中，突变率也很高，因此在许多情况下无法抵御病毒的攻击。因此，有必要开发多种抗A血清型病毒的疫苗。特别是，最近在韩国发生的口蹄疫是由一种属于Sea-97谱系的病毒引起的，这种病毒在亚洲地区持续发生感染。虽然目前已有针对A血清型FMDV的疫苗，但该病毒的抗原性较低，因此可以推测，即使接种疫苗，其保护性免疫力也较低。因此，为了有效预防口蹄疫，避免因感染造成的经济损失，对A血清型FMDV病毒，特别是Sea-97谱系病毒的疫苗的需求很大。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种能够引起针对A血清型FMDV的免疫应答的多肽以及编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供一种能够引起针对A血清型FMDV的免疫应答的质粒。本专利技术的另一个目的是提供一种用于A血清型FMDV的疫苗组合物。本专利技术的另一个目的是提供一种在受试者中引起针对A血清型FMDV的免疫应答的方法。为了实现上述目的，本专利技术的一个方面提供了一种多肽，该多肽具有SEQIDNO:1的氨基酸序列或具有与该序列有90％或以上一致性的氨基酸序列。SEQIDNO:1的氨基酸序列或与该序列有90％或以上序列一致性的氨基酸序列可能是与A血清型FMDV的VP1区域对应的序列。在本公开中，术语“一致性”是指与一个给定的多肽序列或多核苷酸序列所对应的程度，可以用百分比表示。在本说明书中，与给定多肽序列具有相同或相似活性的序列的一致性可以用“％一致性”表示。一致性可以通过使用标准软件来识别，例如，BLAST2.0，该软件可计算诸如分数、一致性、相似性等参数，或者可以通过在严格定义的条件下使用杂交测试比对序列来识别。所要定义的适当杂交条件可以通过本领域技术人员熟知的任意方法来确定。优选地，SEQIDNO:1的氨基酸序列可以来自A血清型的FMDV亚洲区域型，更优选的是来自A血清型的FMDV亚洲区域型Sea-97。更优选地，SEQIDNO:1的氨基酸序列可以来自GDMM/CHA/2013-S(KF450794)、CAM/2/2008(HQ116294)、MAY/4/2012(KT223560)、A/VIT/3/2008(HQ116371)、MAY/97或VN/T11D/2013菌株。在一种实施方式中，在检查GDMM/CHA/2013-S，CAM/2/2008，MAY/4/2012，和A/VIT/3/2008病毒的VP1区序列的共有序列后，以VN/T11D/2013病毒的VP1为基础，重组产生中和抗体的重要错配位点和序列对，以制备SEQIDNO:1的氨基酸序列。术语“重组”或“重组”是指以自然界不存在或未发现的排列方式，将一种多核苷酸或多肽与另一种多核苷酸或多肽进行的半合成或合成。优选地，与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有90％或以上序列一致性的氨基酸序列，可以是SEQIDNO:2的氨基酸序列。在一种实施方式中，在检查了GDMM/CHA/2013-S、CAM/2/2008、MAY/4/2012和A/VIT/3/2008病毒的VP1区序列的共有序列之后，以MAY/97病毒的VP1为基础，重组产生中和抗体的重要错配位点和序列对，以制备SEQIDNO:2的氨基酸序列。SEQIDNO:1的氨基酸序列和SEQIDNO:2的氨基酸序列均与最近发生在韩国的亚洲区域型Sea-97谱系的A型FMDV，以及韩国动植物检疫机构持有的MAY/97或VN/T11D/2013病毒具有高度序列一致性。特别是，SEQIDNO:1的氨基酸序列与最近在韩国出现的亚洲区域型Sea-97谱系的A型FMDV具有更高的序列一致性。因此，具有SEQIDNO:1或SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽可以有效地作为一种能够引起针对A血清型FMDV免疫应答的抗原。根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种多肽，该多肽具有SEQIDNO:1的氨基酸序列或具有与SEQIDNO：1的氨基酸序列有90％或以上一致性的氨基酸序列，以及FMDV的VP2至VP4蛋白的氨基酸序列。优选地，在所述多肽中，SEQIDNO:1的氨基酸序列或与该序列具有90％或以上一致性的氨基酸序列，可以与源自FMDV的VP2、VP3和VP4蛋白对应的氨基酸序列连接。例如，它们可以按以下顺序连接：VP4区的氨基酸序列—VP2区的氨基酸序列—VP3区的氨基酸序列—SEQIDNO:1的氨基酸序列(或SEQIDNO:2的氨基酸序列)。在每个氨基酸序列之间可以包括额外的氨基酸序列。例如，在每个VP区域的序列之间可以包括弗林蛋白酶切割位点(furincleavagesite)的氨基酸序列。此外，该多肽可以进一步含有IgE前导序列和/或2A氨基酸序列。例如，多肽可含有IgE前导序列—VP4区的氨基酸序列—VP2区的氨基酸序列—VP3区的氨基酸序列—SEQIDNO:1的氨基酸序列(或SEQIDNO:2的氨基酸序列)—2A氨基酸序列(最好是按照上述顺序)。在这种情况下，优选地，在每个区域的序列之间还可以进一步包括弗林蛋白酶切割位点的氨基酸序列。优选地，VP2至VP4蛋白的氨基酸序列可源自A血清型FMDV，更优选地源自A24/克鲁塞罗病毒(A24/Cruzeirovirus)。优选地，VP2至VP4蛋白的氨基酸序列可以各自是包含在SEQIDNO：3的氨基酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽，该多肽具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列或具有与SEQ ID NO：1的氨基酸序列有90％或以上一致性的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171229 KR 10-2017-0184875;20181128 KR 10-2018-011.一种多肽，该多肽具有SEQIDNO：1的氨基酸序列或具有与SEQIDNO：1的氨基酸序列有90％或以上一致性的氨基酸序列。


2.一种多肽，该多肽具有SEQIDNO：1的氨基酸序列或具有与SEQIDNO：1的氨基酸序列有90％或以上一致性的氨基酸序列，以及口蹄疫病毒的VP2至VP4蛋白的氨基酸序列。


3.根据权利要求2所述的多肽，其中，口蹄疫病毒的VP2至VP4蛋白来自于A血清型的口蹄疫病毒。


4.一种多核苷酸，该多核苷酸编码SEQIDNO：1的氨基酸序列或与SEQIDNO：1的氨基酸序列具有90％或以上一致性的氨基酸序列。


5.一种质粒，该质粒包括权利要求4所述的多核苷酸。


6.根据权利要求5所述的质...

【专利技术属性】
技术研发人员：金银真，严泰起，宋暻珠，金旼志，
申请(专利权)人：株式会社准绳生命科学，
类型：发明
国别省市：韩国;KR