口蹄疫病毒疫苗组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种参与引发对口蹄疫病毒的免疫应答的多肽、多核苷酸以及包含它们的组合物。本发明专利技术还涉及一种引发受试者对口蹄疫病毒的免疫应答的方法。本发明专利技术还涉及一种用于预防口蹄疫的药物组合物，其包含参与引发对口蹄疫病毒的免疫应答的多肽、多核苷酸或质粒。此外，本发明专利技术涉及一种在受试者中预防口蹄疫的方法。本发明专利技术涉及一种在受试者中预防口蹄疫的方法。本发明专利技术涉及一种在受试者中预防口蹄疫的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】口蹄疫病毒疫苗组合物


[0001]本专利技术涉及参与引发对口蹄疫病毒的免疫应答的多肽、多核苷酸、质粒以及包含它们的疫苗组合物。本专利技术还涉及在受试者中引发对口蹄疫病毒的免疫应答的方法。本专利技术还涉及用于预防口蹄疫的药物组合物，其包含参与引发对口蹄疫病毒的免疫应答的多肽、多核苷酸或质粒。此外，本专利技术涉及一种在受试者中预防口蹄疫的方法。

技术介绍

[0002]口蹄疫(Foot
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and
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Mouth Disease,FMD)是一种影响偶蹄动物(偶蹄目Artiodactyla)的病毒性疾病，包括牛、猪、绵羊、山羊、鹿等家畜和各种野生动物，其特征是在嘴巴、鼻子、乳头、蹄子等处形成水泡。口蹄疫具有高度传染性，死亡率高达40％或以上，这使其成为一种具有社会经济影响的疾病。为此，世界动物卫生组织(OIE)将FMD归类为A类疾病并进行管理，在大多数国家，FMD已被定为一类传染病。此外，在过去十年中，几乎每个大陆都发生了FMD疫情，造成了严重的经济损失。
[0003]口蹄疫病毒(FMDV)是一种正义、单链RNA病毒，属于小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)的口蹄疫病毒属(Aphthovirus)。它不仅侵袭性强，而且感染范围广。其潜伏期可能因动物而异，但短至约6至10天。此外，由于它在出现任何临床症状之前已经从体内排出，因此很容易发生传播。它通过呼吸系统、消化系统、生殖系统等传播。特别是通过呼吸系统释放的病毒可以通过空气传播长达250公里。
[0004]根据VP1编码区的序列，FMDV可分为O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3和亚洲1(Asia 1)7个血清型，VP1在结构蛋白基因区中具有最多的突变，并且对于确定免疫原性(如中和抗体的形成)很重要。此外，根据遗传特征，每个血清型可分为多达约80个亚型。
[0005]在亚洲(包括韩国、东南亚)和欧洲，O血清型的FMD最为常见，因此针对O血清型的FMD疫苗已被积极研究和接种。然而，迄今为止开发的针对O血清型的FMD疫苗并不能有效地防御最近在包括韩国在内的亚洲出现的口蹄疫病毒。因此，迫切需要开发一种针对O血清型FMDV的新型疫苗。
[0006]另一方面，由于主要发生在韩国的口蹄疫是O血清型，因此对A血清型病毒的准备不足。然而，2017年2月在韩国延川市发生的口蹄疫为A血清型，这使得情况变得严重。
[0007]此外，已知Asia 1血清型在口蹄疫血清型中相对较弱，但自2005年中国出现Asia 1血清型口蹄疫以来，Asia 1型在东亚地区开始不断出现(Hammond J.2009.OIE/FAO世界参考实验室报告,1月
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3月2009,口蹄疫.世界参考实验室,皮尔布赖特:1
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33)。这些属于基因型V的病毒，被证实与在印度分离的病毒有遗传关系(Jong hyun Park等,2008a,"世界口蹄疫分子流行病学分析及近期分布(Molecular epidemiological analysis and recent distribution of foot
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and
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mouth disease in the world)",预防兽医学杂志)。考虑到韩国周边地区口蹄疫的现状，除了A血清型和O血清型外，还需要为Asia1血清型进入韩国的情况做好准备。
[0008]针对特定血清型病毒的疫苗不具有针对其他血清型病毒的免疫力，并且存在属于
同一血清型的两个毒株的DNA序列差异高达总基因的30％的情况。因此，由于FMDV有多种血清型和亚型，疫苗应针对每种血清型单独应用。此外，由于一种血清型存在许多突变，因此很难开发出有效的疫苗。而且，即使接种口蹄疫疫苗，也存在免疫力只能维持几个月的缺点。
[0009]如上所述，针对一种血清型口蹄疫的疫苗对另一种血清型没有免疫力，因此应接种二价或更高的多价疫苗，以防止两种或多种病毒同时出现。因此，需要能够通过一次接种产生针对两种或更多种血清型的抗原的多价疫苗。

技术实现思路

[0010]技术问题
[0011]本专利技术一个目的是提供一种能够引发针对口蹄疫病毒的免疫应答的多肽，以及编码该多肽的多核苷酸。
[0012]本专利技术的另一个目的是提供一种能够引发对口蹄疫病毒的免疫应答的质粒。
[0013]本专利技术的另一个目的是提供一种口蹄疫病毒疫苗组合物。
[0014]本专利技术的另一个目的是提供一种在受试者中引发对口蹄疫病毒的免疫应答的方法。
[0015]本专利技术的另一个目的是提供一种预防口蹄疫的药物组合物。
[0016]本专利技术的另一个目的是提供一种在受试者中预防口蹄疫的方法。
[0017]技术方案
[0018]为了实现上述目的，本专利技术一方面提供了一种多肽，其包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与其具有90％以上同一性的氨基酸序列。SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与其具有90％以上序列同一性的氨基酸序列可以是对应于O血清型口蹄疫病毒的VP1区的序列。
[0019]如本文所用，术语“同一性”是指与给定多肽序列或多核苷酸序列对应的程度，并且可以以百分比表示。在本说明书中，与给定多肽序列具有相同或相似活性的序列的同一性可以用“％同一性”表示。同一性可以通过使用标准软件来确定，标准软件例如BLAST 2.0，该软件可以计算诸如分数、同一性、相似性等参数，或通过在严格定义的条件下使用杂交测试比较序列来确定。待定义的合适的杂交条件可以通过本领域技术人员熟知的任何方法来确定。
[0020]SEQ ID NO：1的氨基酸序列是通过最近在亚洲出现的O血清型口蹄疫病毒的VP1重组获得的。包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与其具有90％以上同一性的氨基酸序列的多肽可以有效地充当能够引发针对口蹄疫病毒、特别是O血清型口蹄疫病毒的免疫应答的抗原。
[0021]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种多肽，其包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与其具有90％以上同一性的氨基酸序列，以及口蹄疫病毒的VP2至VP4蛋白的氨基酸序列。
[0022]优选地，在所述多肽中，SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与其具有90％以上同一性的氨基酸序列可以连接到对应于源自口蹄疫病毒的VP2、VP3和VP4蛋白的氨基酸序列。例如，它们可以以VP4区氨基酸序列—VP2区氨基酸序列—VP3区氨基酸序列—SEQ ID NO：1氨基酸序列的顺序连接。VP2至VP4蛋白的氨基酸序列可优选来源于口蹄疫病毒，特别是O血清型
口蹄疫病毒。
[0023]每个氨基酸序列之间可以包括额外的氨基酸序列。例如，在每个VP区域的序列之间可以包含弗林蛋白酶切割位点(furin cleavage site)的氨基酸序列。例如，弗林蛋白酶切割位点可以是序列RGRKRRS、序列AGGGGAAGAAAGAGGAGAAGC或序列AGGGGACGCAAGAGGCGCTCA。
[0024]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多肽，所述多肽包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列或包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列。2.一种多肽，所述多肽包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列或包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列，以及选自口蹄疫病毒的VP2、VP3和VP4蛋白的氨基酸序列中的至少一种。3.根据权利要求2所述的多肽，其中，所述口蹄疫病毒的VP2、VP3和VP4蛋白来源于O血清型的口蹄疫病毒。4.一种多核苷酸，所述多核苷酸包含编码SEQ ID NO：1的氨基酸序列或与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有90％以上同一性的氨基酸序列的核苷酸序列，或者SEQ ID NO：2的核苷酸序列或与SEQ ID NO：2的核苷酸序列具有90％以上同一性的核苷酸序列。5.一种包含权利要求4所述的多核苷酸的质粒。6.根据权利要求5所述的质粒，所述质粒包含SEQ ID NO：3的核苷酸序列。7.根据权利要求5所述的质粒，所述质粒还包含编码口蹄疫病毒的VP2、VP3和VP4蛋白中的至少一种的核苷酸序列。8.根据权利要求7所述的质粒，其中，所述口蹄疫病毒的VP2、VP3和VP4蛋白来自于O血清型口蹄疫病毒。9.一种用于口蹄疫的疫苗组合物，所述疫苗组合物包含权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：金银眞，严泰起，宋暻珠，金旼志，陆根荣，
申请(专利权)人：株式会社准绳生命科学，
类型：发明
国别省市：