本发明专利技术提供了A型口蹄疫病毒样颗粒抗原，其由A型口蹄疫病毒流行株VP2、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，VP2、VP3、VP1抗原蛋白分别由特定序列的核苷酸序列编码。由该A型口蹄疫病毒样颗粒抗原制备的疫苗，具有针对A型口蹄疫病毒流行株良好的免疫原性。其与O型口蹄疫病毒样颗粒抗原制备的疫苗能分别针对A型口蹄疫病毒流行株、O型口蹄疫病毒进行保护。O型口蹄疫病毒进行保护。
【技术实现步骤摘要】
口蹄疫病毒样颗粒抗原、及其疫苗组合物、制备方法和应用
[0001]本专利技术属于病毒性抗原及该抗原的医药配制品。具体地，本专利技术涉及一种口蹄疫病毒样颗粒抗原、其制备的疫苗组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)为一种急性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疾病，是哺乳类动物中感染性最强的疾病，其中偶蹄类动物染病更会造成全球重大的经济损失。遭受口蹄疫危害的动物包括牛、羊和猪。致病因子为口蹄疫病毒(FMDV)，是小核糖核酸病毒属家族的一种口疮病毒。该病毒分为7个血清型(A、O、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3型)，其中我国主要流行O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒。疫苗免疫是控制此病、保护家畜免受危害的有效措施。
[0003]随着A型口蹄疫的不断传播，我国流行的A型口蹄疫病毒发生了极大的变化，与以往不同的是，在自然流行的过程中，A型口蹄疫病毒主要引起牛、羊感染和发病，猪的病例较少；然而目前流行的A型口蹄疫对牛、猪都有致病性，且毒力高于之前A型病毒10倍之多。市场上缺少一种生物安全性及免疫效果均有优势的疫苗。
[0004]病毒样颗粒(VLPs)是一种在体外和/或体内表达时能够自主包装成病毒外壳结构的类病毒粒子，它们是具有病毒的相似外壳结构但不具有病毒复制能力的假病毒。VLPs疫苗能有效地激发机体产生抗感染，抗肿瘤免疫，基于病毒样颗粒设计的疫苗是一种较为理想的疫苗形式。因此，筛选理想的口蹄疫毒株序列制备病毒样颗粒是当务之急，也符合国家提出的有效防控重大动物疫病，保障畜牧业健康可持续发展的需要。
技术实现思路
[0005]为解决现有技术中A型口蹄疫病毒流行株的问题，本专利技术提供了A型口蹄疫病毒样颗粒抗原，其中，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原由A型口蹄疫病毒流行株VP2、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，所述A型口蹄疫病毒VP2抗原蛋白如Seq ID No.1所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述A型口蹄疫病毒VP3抗原蛋白如Seq ID No.2所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述A型口蹄疫病毒VP1抗原蛋白如Seq ID No.3所示核苷酸序列或其简并序列编码。
[0006]所述口蹄疫病毒样颗粒抗原具有良好的免疫原性，其制备的疫苗组合物仅一次免疫就能提供对A型口蹄疫病毒流行株的完全保护。同时所述口蹄疫病毒样颗粒抗原具有良好的稳定性，在4℃下放置3个月，再通过磷钨酸负染及电镜观察仍可见病毒样颗粒依旧饱满，无聚集现象。
[0007]所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原来源于现在的流行株，能针对现在的流行野毒株产生完全保护。
[0008]本专利技术还提供一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的所述的A型口蹄疫病毒样颗粒抗原和药学上可接受的载体。
[0009]本专利技术的A型流行株口蹄疫病毒样颗粒疫苗在抗原含量仅为160μg/ml时，免疫后
第14日也能达到1:128以上的抗体效价，且能维持长时期高滴度抗体效价，能针对整个育肥期产生保护；显示了良好的免疫原性。
[0010]作为本专利技术的一种实施方式，本专利技术所述的疫苗组合物中，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原含量为160～240μg/ml。
[0011]A型流行株口蹄疫病毒样颗粒抗原含量可选自160μg/ml、170μg/ml、180μg/ml、190μg/ml、200μg/ml、210μg/ml、220μg/ml、230μg/ml、240μg/ml。
[0012]即使当A型流行株口蹄疫病毒样颗粒抗原含量仅为160μg/ml，免疫后第14日也能达到1:128以上的抗体效价，即能产生免疫保护，且能维持长时期的高滴度的抗体效价。
[0013]作为本专利技术的一种优选实施方式，本专利技术所述的疫苗组合物中，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原含量为160μg/ml、或200μg/ml、或240μg/ml。
[0014]作为本专利技术的一种实施方式，本专利技术所述的疫苗组合物中，所述药学上可接受的载体包括佐剂，所述佐剂选自：(1)矿物油、铝胶佐剂、皂苷、阿夫立定、DDA；(2)油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂；或(3)丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物；以及RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽、Montanide ISA 206、Gel佐剂中的一种或几种；优选地，皂苷为Quil A、QS-21、GPI-0100；优选地，所述佐剂为ISA 206佐剂。
[0015]所述佐剂含量为5％-60％V/V，优选从30％-60％V/V，更优选50％V/V。
[0016]作为本专利技术的一种实施方式，本专利技术所述的疫苗组合物中，所述疫苗组合物还包括免疫量的O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原和/或免疫量的O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒样颗粒抗原；其中，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原由O型口蹄疫SEA拓扑型病毒流行株VP4、VP2、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，其中，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP4抗原蛋白如Seq ID No.4所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP2抗原蛋白如Seq ID No.5所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP3抗原蛋白如Seq ID No.6所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP1抗原蛋白如Seq ID No.7所示核苷酸序列或其简并序列编码；以及所述O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒样颗粒抗原由O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒流行株VP0、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，其中，所述O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒VP0抗原蛋白如Seq ID No.8所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒VP3抗原蛋白如Seq ID No.9所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒VP1抗原蛋白如Seq ID No.10所示核苷酸序列或其简并序列编码。
[0017]本专利技术的O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原具有良好的免疫原性，疫苗免疫后第14日即能达到1:128以上的O型口蹄疫SEA拓扑型抗体效价。所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原具有良好的稳定性，在4℃下放置3个月，再通过磷钨酸负染及电镜观察仍可见病毒样颗粒依旧饱满，无聚集现象。
[0018]本专利技术的O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒样颗粒抗原具有良好的免疫原性，疫苗免疫后第14日即能达到1:128以上的O型口蹄疫CATHAY拓扑型抗体效价。所述O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒样颗粒抗原具有良好的稳定性，在4℃下放置3个月，再通过磷钨酸负染及电镜观察仍可见病毒样颗粒依旧饱满，无聚集现象。
[0019]作为本专利技术的一种优选实施方式，本专利技术所述的疫苗组合物中，所述O型口蹄疫SE本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.A型口蹄疫病毒样颗粒抗原，其中，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原由A型口蹄疫病毒流行株VP2、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，所述A型口蹄疫病毒VP2抗原蛋白如Seq ID No.1所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述A型口蹄疫病毒VP3抗原蛋白如Seq ID No.2所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述A型口蹄疫病毒VP1抗原蛋白如Seq ID No.3所示核苷酸序列或其简并序列编码。2.一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的权利要求1所述的A型口蹄疫病毒样颗粒抗原和药学上可接受的载体。3.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原含量为160～240μg/ml；优选地，所述A型口蹄疫病毒样颗粒抗原含量为160μg/ml、或200μg/ml、或240μg/ml。4.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，所述药学上可接受的载体包括佐剂，所述佐剂选自：(1)矿物油、铝胶佐剂、皂苷、阿夫立定、DDA；(2)油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂；或(3)丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物；以及RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽、Montanide ISA 206、Gel佐剂中的一种或几种；优选地，皂苷为Quil A、QS-21、GPI-0100；优选地，所述佐剂为ISA 206佐剂。所述佐剂含量为5％-60％V/V，优选从30％-60％V/V，更优选50％V/V。5.根据权利要求2所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物还包括免疫量的O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原和/或免疫量的O型口蹄疫CATHAY拓扑型病毒样颗粒抗原；其中，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒样颗粒抗原由O型口蹄疫SEA拓扑型病毒流行株VP4、VP2、VP3、VP1抗原蛋白组装而成，其中，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP4抗原蛋白如Seq ID No.4所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP2抗原蛋白如Seq ID No.5所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP3抗原蛋白如Seq ID No.6所示核苷酸序列或其简并序列编码，所述O型口蹄疫SEA拓扑型病毒VP1抗原蛋白如Seq ID No.7所示核苷酸序列...
【专利技术属性】
技术研发人员：田克恭，逄文强，肖燕，张许科，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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