一种制备链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法，通过应用藻胆蛋白ｂｅｔａ１５５裂合酶催化藻蓝胆素与链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类脱辅基蛋白共价结合，制备链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质。本发明专利技术的方法应用生物过程生产链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质，是一种环境友好的生产方法。藻蓝蛋白类荧光蛋白质能应用于食品、保健与医药功能材料领域，特别是应用为生物和医学分子监测领域的荧光探针。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术中色素蛋白质材料领域，具体涉及新型链霉亲和素标记的藻蓝蛋 白类荧光蛋白质的制备方法。技术背景藻胆蛋白(phycobiliprotein)是蓝藻和红藻光合作用捕光复合物的功能组分。根据 其吸收光谱和荧光光谱特征，藻胆蛋白可以分为藻红蛋白(phycoerythrin，简称CPE)、 藻红蓝蛋白(phycoerythrocyanin，简称PEC)、藻蓝蛋白(phycocyanin，简称CPC)和 变藻蓝蛋白(allophycocyanin，简称APC)。 CPE、 PEC、 CPC和APC含alpha和beta亚基， 每个亚基中藻胆色素(phycobilin )通过硫醚键与藻胆蛋白脱辅基蛋白 (即o-phycobiliprotein)半胱氨酸残基的巯基共价结合，其种类及其与脱辅基蛋白的相 互作用决定藻胆蛋白的光谱性质。藻胆色素与脱辅基蛋白共价结合形成特定的构象，使得 CPE主要吸收约560nm的可见光，发射约580nm的荧光；PEC吸收约570nm的可见光，发 射约630nm的荧光；CPC吸收约620咖的可见光，发射约640nm的荧光；APC吸收约650 66本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备链霉亲和素标记的藻蓝蛋白类荧光蛋白质的方法，其特征在于包括下述步骤：　（１）采用基因工程方法，将ｂｅｔａ１５５裂合酶基因或其同源基因克隆于表达载体中，得到ｂｅｔａ裂合酶表达质粒；　（２）用基因工程方法将藻蓝蛋白类脱辅基蛋 白基因或其同源基因和链霉亲和素基因拼接后克隆于第二个表达载体中，可以表达链霉亲和素和藻蓝蛋白的融合蛋白，得到链霉亲和素标记的脱辅基蛋白表达质粒；　（３）用基因工程方法将ＰＣＢ生物合成酶基因ｈｏ１和ｐｃｙＡ或其同源基因同时克隆于第三个表 达载体中或分别克隆于第四个表达载体中，得到ＰＣＢ合成质粒；　（４）将ｂｅｔａ裂合酶表达质粒、链霉亲和素...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵开弘，周明，夏坤，佟顺刚，
申请(专利权)人：广州天宝颂原生物科技开发有限公司，华中科技大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]