The present invention discloses a mutant of deputy protein, which is obtained by mutating the 288th position of the wild type Deputy protein amino acid sequence (SEQ ID No.1) into alanine. The amino acid sequence of the mutant of the Deputy protein is shown in SEQ ID No.2. A red carotenoid protein was obtained by combining the Deputy protein mutant with the pigment group. The invention also discloses a method for preparing red carotenoid protein, which expresses red carotenoid protein (OCP (W288A) in genetically engineered bacteria by a single induction method through a combination expression mode of two plasmids. The process is simple, time-consuming and the production cycle is only about 18 hours. The output of OCP (W288A) is large, and the yield is 10 times higher than that of the existing technology. The value is 2.4, which can be used for single crystal preparation.
【技术实现步骤摘要】
一种红色类胡萝卜素蛋白的制备方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种红色类胡萝卜素蛋白的制备方法。
技术介绍
藻类和植物可以利用光来进行光合作用。其中蓝细菌和红藻为了能在水中生长，增加捕光效率，其光合作用机体进化出了一种独特的超分子捕光天线复合体，即藻胆体(PBS)。但是在强烈的阳光下暴晒，光合作用系统特别是反应中心又会产生致命的光氧化作用。因此蓝细菌和红藻又进化出一种可调节的光保护作用系统，可避免过量的光对藻胆体造成伤害。这种保护机制称为非光化学淬灭(NPQ)，主要是依靠藻胆体(PBS)和橙色类胡萝卜素蛋白(OCP)之间的相互作用，消耗多余的激发能量。橙色类胡萝卜素蛋白(OCP)是一种光敏蛋白和光强传感器。在高亮度的蓝光照射下，暗稳态的橙色类胡萝卜素蛋白(OCPO)，会转换成一种红色的激发态(OCPR)，同时触发非光化学淬灭(NPQ)作用，淬灭来自藻胆体的荧光。橙色类胡萝卜素蛋白(OCP)有两个结构域，N端的结构域(NTD)由α-螺旋组成，C端的结构域(CTD)由α-螺旋/β-折叠组成，色素基团与脱辅基蛋白非共价结合。晶体结构表明，橙色类胡萝卜素蛋白(OC...
【技术保护点】
1.一种脱辅基蛋白突变体，其特征在于：是将野生型脱辅基蛋白氨基酸序列(SEQ ID No.1)第288位突变为丙氨酸得到的，脱辅基蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种脱辅基蛋白突变体，其特征在于：是将野生型脱辅基蛋白氨基酸序列(SEQIDNo.1)第288位突变为丙氨酸得到的，脱辅基蛋白突变体的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。2.根据权利要求1所述的脱辅基蛋白突变体，其特征在于：脱辅基蛋白突变体由SEQIDNo.2所示序列N端序列进行修饰得到，N端序列修饰方法选自以下任一种：a)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入A；b)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入GSS；c)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入GSSSQDC。3.根据权利要求2所述的脱辅基蛋白突变体，其特征在于：N端序列修饰方法选自以下任一种：a)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入A-亲和标记序列；b)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入GSS-亲和标记序列；c)在N端起始氨基酸甲硫氨酸后插入GSS-亲和标记序列-SQDC；优选的，亲和标记序列为His6-tag；优选的，脱辅基蛋白突变体的氨基酸序列如SEQIDNo.3～SEQ...
【专利技术属性】
技术研发人员：付卫雷，吴明，卢艳华，陈彦蓉，夏坤，
申请(专利权)人：广州天宝颂原生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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