一种新的多肽——人纤维原生长因子受体46和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人纤维原生长因子受体４６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人纤维原生长因子受体４６的多核苷酸的用途。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人纤维原生长因子受体46，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。人纤维原生长因子受体(FGFR)家族由四个非常相近的成员组成，不同成员之间的氨基酸序列高度保守，家族成员的不同是由于它们与配体的亲和力及组织分布不同而区别。FGFR具有一个由三个类免疫球蛋白区域IgⅠdomain、IgⅡdomain、IgⅢdomain组成的胞外区，胞外区是具有49个氨基酸的分歧结构，一个简单的亲水性的跨膜片段，和一个胞内酪氨酸激酶区域。FGFR的胞外区部分与纤维原生长因子(FGFs)(目前已知FGFs至少有18个成员)相互作用。(Dionne et al.,1999；Mikiet al.,1992)FGF、FGFR与硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的相互作用是酪氨酸激酶信号活性所必须。在配体结合、受体二聚物形成之后，接着胞内区域酪氨酸残基磷酸化(Spivak-Kroizman et al.,1994)。在细胞中不同的FGFR间可发生同源二聚物或异源二聚物的相互作用。活化的受体反过来激活下游的串联信号，最终影响有丝分裂与分化。FGFR的突变可产生分子病理过程，并产生相应的疾病(Passos-Bueno et al.,1999)。已有的研究显示，FGFR1-3基因的多种突变会产生多种临床综合症(Wilkie,1997；Webster and Donohue,1997；Burke et al.,1998)如头颅异常颅缝早闭，外耳道狭窄，窄眼框，眼距过宽，扁平面，上腭畸形，斜视，巨头，小孔头状骨，前额突起，低鼻桥，鼻后孔闭锁，其它眼畸形神经系统异常精神迟缓，胝体异常，颞裂畸形，脑积水，肌张力减退，脑干压迫，脊髓狭窄，癫痫肢体畸形并手并趾，宽拇指，乱甲，短指(趾)畸形，弓形腿，三叉手，放射状肱骨骨性连接，长骨性状，股骨弯曲其它骨异常脊髓颈畸形，短肢，狭窄胸其它异常泌尿生殖系畸形，先天性心脏缺损，皮肤异常研究发现，在正进行发育的肢体芽期间，来自顶部外胚层嵴的信号如FGF对于肢体模式形成是极为重要的。FGF与其受体(FGFR)在新生的肢体胚芽的创伤上皮中合成也提示了类似的肢体发育形成功能。D′Jamoos CA等人发现，在爪蟾变质前下肢创伤上皮存在FGF与其受体FGFR-1a、-2a、-3a、-4a、-4b的表达，在爪蟾变质后下肢创伤上皮不存在FGF受体1a、2a的表达，在爪蟾变质前下肢创伤上皮中运用FGFR抑制因子可形成肢体发育的障碍。(D′Jamoos CA,etal.,1998)碱性的FGF通过自分泌与旁分泌(血管生成)途径在人类肿瘤生成的过程中有重要作用，FGF-2与FGFR可刺激非小细胞肝癌细胞(NSCLC)生长(Berger W,et al.,1999)本专利技术的人的多肽基因与爪蟾的纤维原生长因子受体4b基因在蛋白水平上有33％的同源性，(同源蛋白号AB007037，同源蛋白纤维原生长因子受体，本蛋白422aa,46KD)，其结构域相似于纤维原生长因子受体家族的特征性结构域---具有一个由三个类免疫球蛋白区域IgⅠdomain、IgⅡdomain、IgⅢdomain组成的胞外区，胞外区是具有49个氨基酸的分歧结构，一个简单的亲水性的跨膜片段，和一个胞内酪氨酸激酶区域。基于以上各点，故认为本专利技术的新基因为一编码人纤维原生长因子受体家族的基因，命名为人纤维原生长因子受体46。并以此推断其结构域与纤维原生长因子受体家族结构域相似，具有相似的生物学功能。编码人纤维原生长因子受体46的多聚核苷酸，及其所编码的人纤维原生长因子受体46的发现为研究细胞在正常及病理条件下的分化、增殖的生理生化过程提供了一种方法，也为诊断、治疗与细胞分化增殖紊乱而造成的疾病包括癌症提供了一种新途径。由于如上所述人纤维原生长因子受体46蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人纤维原生长因子受体46蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人纤维原生长因子受体46蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人纤维原生长因子受体46以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人纤维原生长因子受体46的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人纤维原生长因子受体46的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人纤维原生长因子受体46的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人纤维原生长因子受体46的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人纤维原生长因子受体46的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人纤维原生长因子受体46异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中522-1790位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2749位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人纤维原生长因子受体46蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人纤维原生长因子受体46蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人纤维原生长因子受体46表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人纤维原生长因子受体４６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博容基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]