一种新的多肽——人细胞核调控蛋白56和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人细胞核调控蛋白５６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人细胞核调控蛋白５６的多核苷酸的用途。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽－－人细胞核调控蛋白56，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。在鼠中克隆到的jerky基因编码一个41.7KD的蛋白，此蛋白称为鼠jerky蛋白。jerky蛋白的部分功能已被发现，比如，在鼠的jerky基因中引入插入突变，则会造成jerky基因的失活，从而导致癫痫综合症；它还与很多鼠的细胞核调控蛋白有同源性，因此推测，jerky蛋白还能够结合于DNA起到调控作用。(Nat Genet 1995Sep；11(1):71-5)根据已有的研究，在人体内已经克隆到几种不同的与鼠的jerky基因同源的基因。包括从人胎脑cDNA中发现的jerky基因，荧光原位杂交(FISH)的结果表明，它定位于人的染色体8q24.3位置。(Biochem Biophys Res Commun 1998 Jul20；248(2):307-14)；从人的扁桃体cDNA中克隆到的jerky基因，定位于人染色体11q21位置，它在人的绝大多数组织中表达，特别是脑和骨骼肌中，它编码一个51KD的蛋白，此外，它还与着丝粒结合蛋白-B同源，因此被推测可以与DNA结合起调控作用。(Biochem Biophys Res 1997 Jul 18；236(2):389-95)经研究发现，不同的jerky基因均在人的绝大多数组织中表达，包括脑，肝，肺，脾，睾丸和卵巢等等。此外，在人体内，jerky基因是剂量敏感性的，jerky基因表达量的微小改变都会导致严重的结果。(J Neurosci 1997 Jun 15；17(12):4562-9)缺失jerky等位基因的的动物与野生型相比，会变得对化学诱导的抽搐易感。实验显示，如果在jerky等位基因中插入DNA片段来阻活，会导致鼠的癫痫性抽搐。(J Neurosci 1997 Jun 15；17(12):4562-9)根据遗传学的研究，人类的癫痫性疾病是通过遗传获得的。通过人与鼠类的基因组比较，可以推测jerky基因在人体内的基本作用，但是，要获得对人jerky基因的全面了解，还需要进一步的研究。现将人的jerky基因的功能总结为(1)调控神经系统的信号传递，jerky蛋白会导致神经系统的超兴奋性和抽搐，主要是调控人的原发性癫痫、青少年肌阵挛等癫痫性疾病的发生和发作。(2)jerky基因的表达对内分泌系统也有着重要的调控功能，在垂体、甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、胰岛、性腺、松果体和胸腺等内分泌腺中，由于jerky基因的表达异常，可能会导致以上内分泌腺的分泌失常，从而导致内分泌系统疾病。(3)jerky基因的表达如被完全抑制，则会造成人个体和性的发育失常。(4)jerky蛋白与着丝粒结合蛋白-B的同源性使我们推测其有DNA结合功能。(J Neurosci 1997 Jun 15；17(12):4562-9)；(Biochem BiophysRes 1997 Jul 18；236(2):389-95)；(Biochem Biophys Res Commun 1998Jul 20；248(2):307-14)根据氨基酸同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为一种新的人jerky蛋白56(HJP56)。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽－－人jerky蛋白56以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人jerky蛋白56的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人jerky蛋白56的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人jerky蛋白56的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽－－人jerky蛋白56的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽－－人jerky蛋白56的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人jerky蛋白56异常相关的疾病的方法。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的人jerky蛋白56，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少70％相同性(a)编码上述人jerky蛋白56的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中787-2322位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2350位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。如本专利技术所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的人jerky蛋白56”是指人jerky蛋白56基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人jerky蛋白56。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。人jerky蛋白56多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本专利技术提供了一种新的多肽－－人jerky蛋白56，其基本上是由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人jerky蛋白56的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人jerky蛋白56相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(Ⅰ)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(Ⅱ)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(Ⅲ)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(Ⅳ)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人ｊｅｒｋｙ蛋白５６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博容基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]