选择性雄激素受体调节剂及其鉴定、设计和应用的方法技术

本发明专利技术提供选择性雄激素受体调节剂（ＳＡＲＭ），该调节剂对激素依赖性肿瘤具有拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或呈现激动活性，还提供鉴定、设计和应用ＳＡＲＭ的方法。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

已证实选择性雄激素受体调节剂(SARM)对激素依赖性肿瘤呈现拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或更优选呈现激动剂活性。本专利技术涉及应用这些SARM在治疗可通过给予雄激素受体调节剂治愈的病症上的方法。本专利技术还涉及设计和鉴别新SARM的方法，这些SARM对激素依赖性肿瘤呈现拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或更优选呈现激动剂活性。本专利技术还涉及雄激素受体配体结合结构域或配体结合结构域复合物的结构配位，以及应用这些结构配位设计和选择调节雄激素受体的新SARM的方法。
技术介绍
雄激素受体(AR)是配体依赖性转录因子的甾体核-受体超家族的成员，其广泛分布于增殖和非增殖组织，包括前列腺和精囊、雄性和女性生殖器、皮肤、睾丸、卵巢、软骨、皮脂腺、毛囊、汗腺、心肌、骨骼和平滑肌、胃肠道囊状细胞、甲状腺滤泡细胞、肾上腺皮质、肝脏、松果体和多个大脑皮质区及皮质下区，包括脊髓运动神经元(Negro-Vilar，A.JCE&M 1999 54(10)3459-62)。与该甾体受体家族的其它成员一样，AR具有数个功能结构域，包括DNA结合结构域(DBD)和包含雄激素结合结构域的261个残基的配体结合结构域(LBD)(Mw＝30,245Da)，该结合结构域具有接通雄激素功能的作用。人和大鼠雄激素受体的cDNA和氨基酸序列已有报导(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1988 857211-7215)。在药物发现和患者疗法的多个领域中，AR是重要的目标。在肿瘤学中，例如，雄激素受体功能的抑制剂(拮抗剂或部分拮抗剂)可用于治疗雄激素依赖性前列腺癌，而AR的激动剂或部分激动剂用于治疗乳腺癌。对于代谢和内分泌性疾病，例如雄激素受体功能的激动剂或部分激动剂用于治疗与年龄有关的疾病和数种病态中的恶质病病症，包括但不限于AIDS。已在多种骨细胞中证实了功能性AR，服用雄激素有盖于男女的骨骼生长和维持。雄激素疗法的发展一直受到不能够将所要求的雄激素活性与不合要求的或剂量限定的副作用分开的限制。但是，近来在研制选择性雌激素受体调节剂(SERM)上的进展为SARM(即选择性雄激素受体调节剂)给出提示，所述SERM靶向雌激素受体时具有高度组织选择性，同时消除不良副作用(Negro-Vilar，A.JCE&M 1999 54(10)3459-62；Reid等，Investigational New Drugs 1999 17271-284)。美国专利6,017,924基于“顺式-反式”或“共转染”测定，公开了特征在于对雄激素受体具有高度的亲和力、高特异性激动剂、部分激动剂(即部分激活剂和/或组织特异性激活剂)和拮抗剂的非甾体化合物。通过“顺式-反式”或“共转染”测定，确定的特征在于对雄激素受体具有高度的亲和力、高特异性激动剂、部分激动剂(即部分激活剂和/或组织特异性激活剂)和拮抗剂的非甾体化合物还在WO01/16108、WO 01/16133和WO 01/16139中公开。现认为这种共转染测定(Evans等，Science 1988 240889-95)为鉴定模拟天然激素功能的功能性激动剂或部分激动剂或者抑制天然激素功能的拮抗剂提供了方法，并为定量测定敏感细胞内受体蛋白的活性提供了方法。另外，已认为羟基氟他胺，即一种已知的多种组织AR拮抗剂，可作为一种选择性AR调节剂(SARM)，通过成骨细胞影响IL-6的产生(Hofbauer等，J.Bone Miner.Res，1999 141330-1337)。羟基氟他胺和卡索地司都是已知的多种组织完全AR拮抗剂，现已表明在AR-转染的PC3细胞中，其能以类似于DHT的AR依赖性方式激活MAP激酶Erk-1和Erk-2(Peterziel等，Oncogene 186322-6329(1999))。化合物LGD2226是一种非甾体AR激动剂，也可作为选择性雄激素受体调节剂，用于治疗与雄激素有关的疾病，如骨质疏松症、雄性激素替代、雄性或雌性性功能失调和恶质病(SCRIP-WorldPharmaceutical New FILED 12 May 2000；WO 01/16108；WO01/16133；和WO 01/16139)。化合物LG120907是一种非甾体AR激动剂，已表明在大鼠中，与其它临床上所用的AR拮抗剂(卡索地司)相比，其对下丘脑轴和对性欲(繁殖率)的拮抗活性降低。因此LG120907可作为选择性雄激素受体调节剂，用于治疗前列腺癌(Wang等，Poster #P3-126，EndocrineSociety 80thAnnual Meeting(1998)，Hamann等，Presentation #S39-2，Endocrine Society 80thAnnual Meeting(1998))。最近对甾体性激素(如DHT和E2)对AR和ER的非基因性作用的研究报告清楚表明两种受体均调节非特异性参与转录有关的功能(Kousteni等，Cell 104，719-730(2001))。已表明ER和AR的抗凋亡作用是由对转录无作用的配体诱发。还表明对转录有影响的受体不具有抗凋亡作用。相对于含有雄激素受体的其它非肿瘤组织，对含有雄激素受体的肿瘤组织呈现出调节作用差别的SARM(尤其是对肿瘤具有拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织呈现激动活性)，目前既没有公开也没有暗示性公开。本专利技术提供SARM以及鉴别和设计这些SARM的方法，该SARM对激素依赖性肿瘤呈现拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或更优选呈现激动活性。如下所述，例如，可用这些SARM通过抑制肿瘤的生长，同时减轻副作用，如肌肉消瘦/恶质病、失去性欲、骨质疏松症和男子女性型乳房，从而治疗患者的激素依赖性肿瘤(如前列腺癌)。本文所用术语“患者”指动物，优选哺乳动物，如狗、猫，或者最优选人。专利技术概述本专利技术的一个目的是提供鉴别SARM的方法，该SARM对激素依赖性肿瘤呈现拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或更优选呈现激动活性。在一个实施方案中，通过筛选体外或体内对激素依赖性肿瘤细胞系的生长抑制作用，确定对激素依赖性肿瘤细胞的拮抗活性。在该实施方案中，还可用正常非肿瘤细胞系确定潜在SARM的活性。另外，可用带有激素依赖性肿瘤的动物模型确定潜在SARM对肿瘤的拮抗活性以及对动物非肿瘤组织的活性。本专利技术另一目的通过利用AR晶体结构和雌二醇、他莫昔芬或雷洛昔芬的雌激素受体(ER)晶体结构信息，提供设计SARM的方法，该SARM对激素依赖性肿瘤呈现拮抗活性，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或更优选呈现激动活性。本专利技术另一目的提供用于鉴定SARM的分子或分子复合物，其包含表A中雄激素受体配体结合结构域(AR-LBD)氨基酸V685、L700、L701、S702、S703、L704、N705、E706、L707、G708、E709、Q711、A735、I737、Q738、Y739、S740、W741、M742、G743、L744、M745、V746、F747、A748、M749、G750、R752、Y763、F764、A765、L768、F770、M本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抑制其需要患者的激素依赖性肿瘤细胞生长的方法，该方法包括给予所述患者有效量的选择性雄激素受体调节剂，其中所述选择性雄激素受体调节剂对所述激素依赖性肿瘤呈现拮抗作用，而对含雄激素受体的其它非肿瘤组织无活性或呈现激动活性。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：ME萨尔瓦蒂，MM戈塔迪斯，SR小克里斯特克，RM阿塔，JS萨克，
申请(专利权)人：布里斯托尔迈尔斯斯奎布公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]