乙肝患者T细胞免疫状态检测方法技术

本发明专利技术公开一种乙肝患者Ｔ细胞免疫状态检测方法，使用人工合成的多肽在体外培养乙肝患者外周血淋巴细胞中进行刺激，利用酶联免疫斑点实验方法，检测经上述刺激后分泌人γ干扰素的淋巴细胞数的多少，从而确定乙肝患者的Ｔ细胞免疫激活状态。由于合成多肽不含有重组蛋白中的宿主杂蛋白，不存在非特性激活免疫细胞的作用；实验的特异性得到了大大的提高。正常对照组中，几乎没有非特异性的斑点。合成多肽的批间的生物学活性的稳定性大大地提高，实验结果的批间差异大大地缩小。合成多肽可以在４度条件下，保存六个月，活性没有明显地减少。大大的有利于试剂盒的使用。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种乙肝患者T细胞免疫状态检测方法。
技术介绍
乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个全球性问题，单独在我国即有超出一亿以上的人口是乙肝病毒的长期携带者。病毒的长期携带者，尤其是“大三阳”(表面抗原阳性、e抗原阳性、核心抗体阳性)的患者；最终会导致肝硬化和肝癌。因此，治疗乙型肝炎是一项重要的、刻不容缓的工作。遗憾的是，人类至今没有找到一项根治乙肝病毒的有效方法。近几年的研究发现，机体对病毒的反应与其自身的免疫状态是密切相关的。当患者的免疫系统中的T细胞处于对乙肝病毒的激活状态时，机体在药物的配合下，就会产生对病毒的抑制，并最终有利于病毒的清除。反之，当患者免疫系统中的T细胞对乙肝病毒不识别时；药物的作用不会起到清除病毒的作用。由此来看，建立一种检测乙肝患者的T细胞免疫状态的方法，就可以帮助医生对患者进行个体差别的治疗，提高治疗效果；因此，是一件重要的工作。免疫系统的细胞功能检测，一直是生物学技术的一个难点。近年来，酶联免疫斑点实验(ELISPOT)的采用，克服了这一难点。酶联免疫斑点实验具有极高的灵敏度，在十万个免疫细胞中，只要有一个激活态的细胞，即可检测出来。同时，操作简本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乙肝患者Ｔ细胞免疫状态检测方法，其特征是包括如下步骤：　　　　（１）使用下述多肽中的一种或二种的组合或三种的组合在体外培养乙肝患者外周血淋巴细胞中进行刺激：　　　　多肽一：即乙肝病毒核心抗原的１２９－１４０位氨基酸ＰＰＡＹＲＰＰＮＡＰＩＬ，其氨基酸序列为：Ｐｒｏ　　Ｐｒｏ　　Ａｌａ　　Ｔｙｒ　　Ａｒｇ　　Ｐｒｏ　　Ｐｒｏ　　Ａｓｎ　　Ａｌａ　　Ｐｒｏ　　Ｉｌｅ　　Ｌｅｕ；　　　　多肽二：即核心抗原的１８－２７位氨基酸ＦＬＰＳＤＦＦＰＳＶ，其氨基酸序列为：Ｐｈｅ　　Ｌｅｕ　　Ｐｒｏ　　Ｓｅｒ　　Ａｓｐ　　Ｐｈｅ　　Ｐｈｅ　　Ｐｒｏ　　Ｓｅｒ　　Ｖａｌ；　　　　多肽三：乙肝病毒核心抗原多肽ＥＹ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴庆军，
申请(专利权)人：深圳市达科为生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]