检测CHO细胞DNA的方法技术

本发明专利技术提供了检测CHO细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测CHO细胞基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合CHO细胞基因组DNA上SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2所示区段。利用所述引物对的PCR检测方法操作简便快捷、灵敏度高、能区分大肠杆菌或人类，甚至与仓鼠细胞高度同源的小鼠或大鼠的干扰性DNA。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测领域。具体地说，本专利技术涉及CHO细胞DNA的检测方法。
技术介绍
在现代，生物重组制品已广泛应用于医药健康领域，发挥着越来越重要的作用。这些生物制品包括重组蛋白药物、基因重组疫苗、生物抗原抗体以及各种细胞因子等。重组生物制品的应用与人类健康事业息息相关，国际上对其的质量控制和安全性检测都具有极其严格的要求。重组生物蛋白绝大多数由大规模的基因改造工程宿主细胞生产，细胞中复杂的非目标产物是终产物中主要的杂质来源，直接影响生物制品的安全性。其中残余的生物遗传物质DNA是一个非常重要的污染，因此，对它的检测是重要的质量控制环节。在重组生物蛋白制品中，残余DNA多来源于培养的宿主细胞。这些宿主细胞多为外源哺乳动物细胞以及肿瘤来源细胞。理论上，存在于生物制品中的微量DNA杂质，都有可能传递与肿瘤或病毒相关的基因，并导致癌变或其它病理变化。当一定量的残留DNA与制品一同进入人体后，含有致癌基因的DNA片段就可能诱发肿瘤的产生；如果生物制品中含有某些可以整合病毒的DNA，则这种DNA通过表达后具备感染性，从而导致一系列的不良后果。从1984年开始，国际官方机构陆续推出了针本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测CHO细胞基因组DNA的引物对，其特征在于，所述引物对包括正向引物和反向引物，其中所述正向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQ?IDNO:1所示区段的第64?92位；其中的反向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQID?NO:1所示区段的第125?147位，并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为78?84bp。

【技术特征摘要】
1.一种检测CHO细胞基因组DNA的引物对，其特征在于，所述弓I物对包括正向弓I物和反向引物，其中所述正向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQ IDNO:1所示区段的第64-92位；其中的反向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQID NO:1所示区段的第125-147位，并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为78-84bp。2.如权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述正向引物如SEQID N0:3所示，所述反向引物如SEQ ID N0:4所示。3.—种检测体系，其特征在于，所述检测体系包含权利要求1或2所述的引物对。4.如权利要求3所述的检测体系，其特征在于，所述检测体系还包含第二引物对，所述第二引物对包括正向引物和反向引物，其中所述正向弓I物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQID N0:2所示区段的第1-22位；所述反向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQ ID NO:2所示区段的第86-110位，并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为80-110bp。5.如权利要求3或4所述的检测体系，其特征在于，所述检测体系还包含探针。6.如权利要求3-5中任一项所述的检测体系，其特征在于，所述检测体系的检测灵敏度为IO6-1 fg/Ul，优选地，所述检测体系的检测灵敏度为0.1 fg/yl。7.一种CHO细胞基因组DNA的检测方法，所述方法包括:利用权利要求1或2所述的引物对或权利要求3-5中任一项所述的检测体系，对待测样品进行PCR，并检测PCR扩增产物。8.—种PCR试剂盒，所述试剂盒中包括容器以及位于所述容器中的权利要求1或2所述的引物对。9.如权利要求8所述的PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括第二引物对，所述第二引物对包括正向引物和反向引物，其中所述正向引物结合于CHO细胞基因组DNA上SEQ ID NO:2所示区段...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙玮洁，杨志行，吴婉欣，文明，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心，
类型：发明
国别省市：