检测毕赤酵母细胞DNA的引物及方法技术

本发明专利技术提供了检测毕赤酵母细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测毕赤酵母细胞基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操作不仅简便快捷、灵敏度高，还能区分真核宿主细胞，例如Vero细胞、CHO细胞，特别是人细胞的干扰性DNA。

Primer and method for detecting Pichia pastoris cell DNA

The present invention provides detection of Pichia pastoris genomic DNA primer kit, the primers and the primer method for detection of Pichia pastoris cell genome contains DNA, the primers for specific binding to SEQ ID NO:1 shown in sequence. The PCR detection method using the primer pair is not only simple, fast and sensitive, but also can distinguish the eukaryotic host cells, such as Vero cells, CHO cells, especially human cells, and interfere with DNA.

【技术实现步骤摘要】
检测毕赤酵母细胞DNA的引物及方法
本专利技术涉及生物检测领域。具体地说，本专利技术涉及毕赤酵母(PichiaPastoris)细胞DNA的检测引物及方法。
技术介绍
在现代，生物重组制品已广泛应用于医药健康领域，发挥着越来越重要的作用。这些生物制品包括重组蛋白药物、基因重组疫苗、生物抗原抗体以及各种细胞因子等。重组生物制品的应用与人类健康事业息息相关，国际上对其的质量控制和安全性检测都具有极其严格的要求。重组生物蛋白绝大多数由大规模的基因改造工程宿主细胞生产，细胞中复杂的非目标产物是终产物中主要的杂质来源，直接影响生物制品的安全性。其中残余的生物遗传物质DNA是一个非常重要的污染，因此，对它的检测是重要的质量控制环节。在重组生物蛋白制品中，残余DNA多来源于培养的宿主细胞。这些宿主细胞多为原核细胞、外源哺乳动物细胞以及肿瘤来源细胞。理论上，存在于生物制品中的微量DNA杂质，都有可能传递与肿瘤或病毒相关的基因，并导致癌变或其它病理变化。当一定量的残留DNA与制品一同进入人体后，含有致癌基因的DNA片段就可能诱发肿瘤的产生；如果生物制品中含有某些可以整合病毒的DNA，则这种DNA通过表本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测毕赤酵母细胞基因组DNA的引物对，所述引物对包括正向引物和反向引物，其中所述正向引物结合于毕赤酵母细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1所示序列的第84‑103位；其中的反向引物结合于SEQ ID NO:1所示序列的第151‑170位，并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为80‑90bp。

【技术特征摘要】
1.一种检测毕赤酵母细胞基因组DNA的引物对，所述引物对包括正向引物和反向引物，其中所述正向引物结合于毕赤酵母细胞基因组DNA上SEQIDNO:1所示序列的第84-103位；其中的反向引物结合于SEQIDNO:1所示序列的第151-170位，并且所述引物对所扩增获得的扩增产物的长度为80-90bp。2.如权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述引物对中，所述正向引物如SEQIDNO:2所示，所述反向引物如SEQIDNO:3所示，或者，所述正向引物如SEQIDNO:6所示，所述反向引物如SEQIDNO:7所示，或者，所述正向引物如SEQIDNO:10所示，所述反向引物如SEQIDNO:11所示，或者，所述正向引物如SEQIDNO:12所示，所述反向引物如SEQIDNO:13所示；优选地，所述正向引物如SEQIDNO:2所示，所述反向引物如SEQIDNO:3所示。3.一种检测试剂，所述检测试剂包含权利要求1或2所述的引物对。4.如权利要求3所述的检测试剂，其特征在于，所述引物对中，所述正向引物如SEQIDNO:2所示，所述反向引物如SEQIDNO:3所示，或者，所述正向引物如SEQIDNO:6所示，所述反向引物如SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨志行，吴婉欣，宗伟英，王滔，文明，朱冰美，张乐，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心，湖州申科生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33