非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR检测试剂及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种以非洲猪瘟病毒基因片段为靶目标设计合成的生物制剂，尤其是能够对非洲猪瘟病毒进行检测的试剂以及这种试剂的制备方法和应用。本发明专利技术系选择非洲猪瘟病毒特异和保守的ＶＰ７３基因片段为靶目标，根据ＶＰ７３基因的特点和引物、探针设计的原则，设计合成引物和探针。将设计的多对引物和探针进行最佳配对筛选实验，并经过大量的反应条件优选、对比试验和验证试验，得到最适合的引物和探针。本发明专利技术所述的非洲猪瘟病毒荧光定量ＰＣＲ检测试剂包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为６６ｂｐ。本试剂可对非洲猪瘟病毒进行快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种以非洲猪瘟病毒基因片段为靶目标设计合成的生物制剂，尤其是能够对非洲猪瘟病毒进行检测的试剂以及这种试剂的制备方法和应用。
技术介绍
非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是猪的一种接触性病毒病，本病攻击巨噬单核细胞，典型特征是死亡率高、皮肤有变红的区域和内脏器官严重出血，在首次发生该病的国家和地区，死亡率可高达100％。在自然条件下，非洲猪瘟病毒寄存在钝缘蜱(Ornithodoros)和隐性感染的非洲野猪、疣猪、南非野猪和大野猪中。目前只发现猪表现临床症状。非洲猪瘟1909年在东非的肯尼亚首次在欧洲移民带来的家猪群中被发现后，至今非洲猪瘟在非洲、西班牙、葡萄牙和意大利等一些国家相继发生。非洲猪瘟给养猪业和爆发的国家的经济带来了巨大损失。1982年非洲猪瘟进入西非的喀麦隆，导致这个国家损失了80％的猪。在海地发生的非洲猪瘟，使这个国家宰杀了所有的家猪和大部分野猪，养猪业受到了毁灭性的打击。美国科学家认为，如果非洲猪瘟在美国发生，要清除一次疫情，根据发生范围，花费大约在七百五十万到五亿五千万美元，如果清除失败，第二年的损失将是二十亿美元。国际兽疫局本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种非洲猪瘟病毒荧光定量ＰＣＲ检测试剂，其特征在于包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为６６ｂｐ，引物和探针序列为：引物：ＡＳＦＶ－ＶＰ７３－Ｆ：５’－ＴＧＡＴＡＴＧＧＴＧＧＧＣＣＡＣＣＡＴ－３’ＡＳＦＶ－ＶＰ７３－Ｒ：５’－ＣＣＣＴＧＡＡＴＣＧＧＡＧＣＡＴＣＣＴ－３’探针：（ＦＡＭ）５’－ＴＡＴＴＧＧＧＴＧＣＡＴＧＴＣＡＴＴＣＧＴＣＣＴＧＧ－３’（ＴＡＭＲＡ）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：花群义，周晓黎，董俊，杨云庆，徐自忠，肖荣海，尹尚莲，
申请(专利权)人：云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]