一种ＤＮＡ的荧光检测方法及其试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种ＤＮＡ的荧光检测方法及其试剂盒。该方法将捕获探针连接在磁性颗粒表面后通过ＤＮＡ之间的杂交捕获靶向ＤＮＡ，靶向ＤＮＡ的另一段核苷酸序列与荧光素修饰的信号探针杂交，形成磁性颗粒－靶向ＤＮＡ－荧光标记的信号探针的三明治夹心结构，同时加入上述的捕获探针或信号探针的竞争性探针与靶向ＤＮＡ竞争结合，最后加入具有信号倍增功能的水溶性的共轭高分子对信号放大检测，从而检测出靶向ＤＮＡ。本发明专利技术可以显著提高基因及基因突变检测的选择性和灵敏度，无需进行核酸扩增，操作快速简便，在生物检测、疾病的早期诊断和治疗中有着重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，特别涉及一种DNA的荧光检测方法及其试剂盒。
技术介绍
基因(DNA或RNA)是遗传信息的载体，在生物的个体生长、发育、繁殖、遗传和变异等生命过程中起着极为重要的作用。基因检测在临床诊断、单核苷酸多态性分析、基因测序、环境分析、反控等领域具有重要的意义。随着人们对自身健康的日益关注，对肿瘤、癌症等重大疾病早期诊断技术的要求也越来越高，因此迫切需要发展高灵敏度的基因检测技术。基因突变是单核苷酸多态性的形式之一，与多种疾病的发生有着密切的关系，最新研究表明，有四百多种疾病的发生与基因突变有关。为了在发病早期就能检测到极微量致病基因的存在，常常需要对待测基因进行PCR扩增或采用其它形式的信号放大方法，如纳米金放大、共轭高分子放大、酶联放大等(L. Pang， J. Li， J. Jiang， G. Shen， R. Yu， Anal.Biochem. 2006， 358， 99 ;D. Q. Tang， D. J. Zhang， D. Y. Tang， H. Ai， J. Immunol. Methods 2006，316， 144 ;X. Yao， X. L本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＤＮＡ的荧光检测方法，包括以下步骤：１）将捕获探针连接在磁性颗粒表面；２）加入待测的靶向ＤＮＡ和荧光素修饰的信号探针，该捕获探针能与靶向ＤＮＡ的一段核苷酸序列杂交，该信号探针能与靶向ＤＮＡ的另一段核苷酸序列杂交，通过ＤＮＡ之间的杂交，形成磁性颗粒－靶向ＤＮＡ－荧光素修饰的信号探针的三明治夹心结构；３）最后除去游离的荧光素修饰的信号探针后，加入具有信号倍增功能的水溶性的共轭高分子，对该信号探针上的荧光信号进行放大检测，从而检测出靶向ＤＮＡ；其特征是步骤２）在杂交时还加入上述捕获探针或信号探针的竞争性探针，与靶向ＤＮＡ竞争结合。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋世平，刘兴奋，李江，王丽华，樊春海，
申请(专利权)人：中国科学院上海应用物理研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]