用于新颖抗原结合模块的特异性测试的通用报告细胞测定法制造技术

本发明专利技术一般性涉及使用细胞培养物的特异性测定法,特别是用于测试不同型式的新颖抗原结合模块的嵌合抗原受体(CAR)表达性报告T(CAR‑T)细胞测定法。而且,本发明专利技术涉及用包含靶抗原结合模块的改造的嵌合抗原受体(CAR)转染/转导的CAR‑T细胞的用途,该靶抗原结合模块能够特异性结合抗原结合分子的识别域。本发明专利技术还涉及用于特异性测试候选抗原结合模块和/或表达改造的CAR的核酸分子和载体的方法和试剂盒。

A general report cell assay for the specificity test of novel antigen binding modules

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于新颖抗原结合模块的特异性测试的通用报告细胞测定法专利
本专利技术一般性涉及使用细胞培养物的特异性测定法,特别是用于测试不同型式的新颖抗原结合模块的嵌合抗原受体(CAR)表达性报告T(CAR-T)细胞测定法。而且,本专利技术涉及用包含靶抗原结合模块的改造的嵌合抗原受体(CAR)转染/转导的CAR-T细胞的用途,该靶抗原结合模块能够特异性结合抗原结合分子的识别域。本专利技术还涉及用于特异性测试候选抗原结合模块和/或表达改造的CAR的核酸分子和载体的方法和试剂盒。专利技术背景化疗直到现在仍然是癌症的最常用治疗之一。另外,基于抗体的疗法在过去15年里得到发展,现在在血液学恶性和实体瘤的治疗中代表化疗办法的有价值组合或备选。与化疗不一样,抗体疗法靶向癌细胞上的特定抗原,因而容许更加定点的治疗,由此降低对健康组织的副作用。在开发基于抗体的治疗性试剂的过程中,需要各种测定法来鉴定最好的候选,带入临床试验中并最终推向市场。在第一个早期临床前阶段中,不得不生成抗体并分析它们的靶物特异性,以及它们对靶物的亲和力。可以使用各种蛋白质-蛋白质相互作用测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于评估抗原结合模块的特异性的方法,其包含下述步骤:/na)提供包含抗原结合域和识别域的抗原结合分子,其中该抗原结合域包含该抗原结合模块,其中该抗原结合模块是对靶抗原特异性的；/nb)使该抗原结合分子与在表面上包含该靶抗原的靶细胞接触,特别是其中该靶细胞是癌细胞；/nc)使该抗原结合分子与嵌合抗原受体(CAR)表达性报告T(CAR-T)细胞接触,其中该报告CAR-T细胞包含:/ni.能够特异性结合该识别域的CAR,其中该CAR与应答元件可操作偶联；/nii.在该应答元件控制下的报告基因；和/nd)通过测定该报告基因的表达来测定T细胞激活以建立该抗原结合模块的特异性。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171221 EP 17209201.71.一种用于评估抗原结合模块的特异性的方法,其包含下述步骤:
a)提供包含抗原结合域和识别域的抗原结合分子,其中该抗原结合域包含该抗原结合模块,其中该抗原结合模块是对靶抗原特异性的；
b)使该抗原结合分子与在表面上包含该靶抗原的靶细胞接触,特别是其中该靶细胞是癌细胞；
c)使该抗原结合分子与嵌合抗原受体(CAR)表达性报告T(CAR-T)细胞接触,其中该报告CAR-T细胞包含:
i.能够特异性结合该识别域的CAR,其中该CAR与应答元件可操作偶联；
ii.在该应答元件控制下的报告基因；和
d)通过测定该报告基因的表达来测定T细胞激活以建立该抗原结合模块的特异性。


2.权利要求1的方法,其中该识别域是免疫球蛋白域。


3.权利要求1或2任一项的方法,其中该识别域是Fc域。


4.权利要求3的方法,其中该Fc域是突变型Fc域,其中该突变型Fc域与非突变型亲本Fc域相比包含至少一处氨基酸替代,其中该CAR能够特异性结合该突变型Fc域但不能够特异性结合该非突变型亲本Fc域。


5.权利要求4的方法,其中该突变型Fc域包含选自由依照EU编号方式的L234,L235,I253,H310,P331,P329和H435组成的组的位置处的至少一处氨基酸突变,特别是其中该氨基酸突变是L234A,L235A,I253A,N297A,H310A,P329G和/或H435A。


6.权利要求4或5任一项的方法,其中该突变型F...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·达罗斯基，C·L·S·德隆，L·J·哈尼施，C·约斯特，C·克莱因，E·莫斯纳，V·普尔科，W·徐，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH