糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒包括：糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成糖类抗原724的检测。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，经过实验，其检测灵敏度达到0.2U/mL，相对于传统的糖类抗原724的检测方法灵敏度至少提高了10倍，这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的检测精度较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外检测领域，尤其涉及一种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
肿瘤已对人类生存构成了严重的威胁，对人类的健康及生活质量造成巨大损伤。治疗肿瘤的关键在于及时发现，及早治疗以及治疗后复查。糖类抗原是临床上应用广泛的一类肿瘤标志物，它包括糖蛋白与脂糖，常表现为粘蛋白形式。其抗原决定簇可定位在糖链上或者在蛋白核上。根据糖基表位的不同和抗原表位大小的差异，一般可分为CA50、CA125、CA153、CA199、CA242、CA724，人体本来糖类抗原含量是非常微量的，甚至没有，但是当恶性肿瘤发生时可能会诱发机体分泌高浓度的糖类抗原，因此糖类抗原可为肿瘤的前期筛查、临床诊断、疗效监控、癌细胞转移以及术后复查提供数据依据。目前临床检测糖类抗原724(CA724)的常见方法有酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、酶促化学发光法，但这些方法都存在着一些不足之处。传统的糖类抗原724(CA724)的检测方法主要采用酶联免疫吸附法，然而，受限于酶联免疫的特点，传统的糖类抗原724的检测方法在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染，并且由于检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测精度较差。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种检测灵敏度较高的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。一种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，包括：糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。在一个实施例中，所述糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，所述糖类抗原724单克隆抗体与所述羧基化的磁微粒的质量比为1：25～35。在一个实施例中，所述化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体中，所述糖类抗原724单克隆抗体与所述化学发光标记物的质量比为50：1～10。在一个实施例中，所述羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm～1μm。在一个实施例中，所述化学发光标记物为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。在一个实施例中，还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液。在一个实施例中，所述A液为H2O2溶液，所述B液为NaOH溶液。在一个实施例中，还包括糖类抗原724定标品。在一个实施例中，所述糖类抗原724定标品为浓度分别为0U/mL、5U/mL、20U/mL、50U/mL、150U/mL和300U/mL的糖类抗原724的溶液。一种上述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：取羧基化的磁微粒的悬浮液，磁分离去上清后用MES缓冲液重悬，接着加入EDC水溶液，活化羧基化的磁微粒的表面羧基，接着加入糖类抗原724单克隆抗体，室温下混悬2h～10h，磁分离去除上清后用Tris缓冲液重悬，得到糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒；以及取糖类抗原724单克隆抗体，加入碳酸盐缓冲液后混匀，然后加入化学发光标记物后混匀，室温下避光反应1h～2h后除杂，得到化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成糖类抗原724的检测。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，经过实验，其检测灵敏度达到0.2U/mL，相对于传统的糖类抗原724的检测方法灵敏度至少提高了10倍，这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的检测精度较高。附图说明图1为一实施方式的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的制备方法的制备流程示意图；图2为实施例3得到的糖类抗原724标准曲线图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。一实施方式的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，包括：糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。优选的，糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，糖类抗原724单克隆抗体与羧基化的磁微粒的质量比为1：25～35。优选的，化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体中，糖类抗原724单克隆抗体与化学发光标记物的质量比为50：1～10。优选的，羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm～1μm。化学发光标记物可以为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。其中，化学发光标记物优选为吖啶酯。在其他的实施例中，上述糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒还包括化学发光底物液。化学发光底物液包括A液和B液。A液可以为H2O2溶液，B液可以为NaOH溶液。本实施例中，A液为浓度为0.1mol/L的H2O2溶液，B液为浓度为0.25mol/L的NaOH溶液。在其他的实施例中，上述糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒还包括糖类抗原724定标品。糖类抗原724定标品为浓度分别为0U/mL、5U/mL、20U/mL、50U/mL、150U/mL和300U/mL的糖类抗原724的溶液。具体的，糖类抗原724定标品可以采用标准品缓冲液将糖类抗原724配制成浓度分别为0U/mL、5U/mL、20U/mL、50U/mL、150U/mL和300U/mL的糖类抗原724的溶液。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒用于糖类抗原724检测时，利用全自动化学发光免疫分析仪对糖类抗原724定标品进行检测，绘制标准曲线，内置于电脑软件；接着测试实际样本，根据样本发光值计算样本浓度；最后对糖类抗原724全自动化学发光免疫分析系统进行性能(灵敏度、线性、精密度、干扰性)的评价。这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成糖类抗原724的检测这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，经过实验，其检测灵敏度达到0.2U/mL，相对于传统的糖类抗原724的检测方法灵敏度至少提高了10倍，这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的检测精度较高。此外，这种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒还具有以下优点：1、选择吖啶酯作为标记材料，并应用于化学发光免疫分析系统，该发光体系为直接化学发光，与传统的酶促化学发光相比，该反应不需要酶的参与，更加节约成本；2、选用吖啶酯的化学发光免疫分析系统线性范围宽，能达到0.2U/mL～300U/mL，而传统的糖类抗原724的检测方法的检线性范围为2U/mL～100U/mL；3、吖啶酯化学发光免疫分析系统重复性高，批内及批间差均在5％以内，这是其它化学发光免疫分析系统难以达到的；4、化学发光免疫分析系统已实现样本的定量，通过内置标准曲线到测试软件，只需测试样本就可直接得到样本的浓度值；5、化学发光免疫分析系统可以实现全自动化，试剂及样本的添加全有仪器完成，操作更加简便，减少了人为的误差。结合图1，上述糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：取羧基化的磁微粒的悬浮液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.一种糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述糖类抗原724单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，所述糖类抗原724单克隆抗体与所述羧基化的磁微粒的质量比为1：25～35。3.根据权利要求1所述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的糖类抗原724单克隆抗体中，所述糖类抗原724单克隆抗体与所述化学发光标记物的质量比为50：1～10。4.根据权利要求1所述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm～1μm。5.根据权利要求1所述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。6.根据权利要求1所述的糖类抗原724化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液。7.根据权利要求6所述的糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙峰，陈永棠，夏福臻，钱纯亘，代洪飞，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44