抗体纳米磁珠包被物及其制备方法与应用技术

本申请属于体外诊断免疫检测试剂领域，具体涉及一种抗体纳米磁珠包被物及其制备方法与应用

【技术实现步骤摘要】
抗体纳米磁珠包被物及其制备方法与应用


[0001]本申请属于体外诊断免疫检测试剂领域，具体涉及一种抗体纳米磁珠包被物及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]机体内抗原能刺激免疫系统产生能特异性识别抗原的具有保护作用的抗体
。
根据人体内的抗原性不同可以将抗体分为5类即
IgG
，
IgA
，
IgM
，
IgG
，
IgE。
不同的
Ig
，其铰链区的长度不同，链间和链内的二硫键的数量
、
位置也不相同
。
对于同一类
IgG,
因铰链区氨基酸的组成和重链二硫键的数量
、
位置不同还可分为4种亚型（
IgG1
，
IgG2
，
IgG3
，
IgG4
）
。IgG1
型抗体富含半胱氨酸，在可变区
Fab
端含有与抗原表位互补的空间构象
。
血清中
IgG1
抗体易受到氧自由基的攻击而发生非共价的聚集从而影响抗体蛋白的结合特异性以及稳定性，铰链区不稳定的二硫键与其非共价聚集相关
。
机体内这种聚集可以被超氧化物歧化酶抑制，体外可选择配合还原剂
。
[0003]化学发光免疫分析（
CLIA
），该方法以纳米磁珠作为检测手段，直接或者间接利用磁珠的活性功能位点连接抗原抗体，同时化学发光试剂吖啶酯类化合物直接标记抗体或抗原，吖啶酯在碱性条件下（
NaOH、H2O2）的作用下能跳跃到激发态，回到基态的能量以辉光的形式释放，仪器通过捕捉到辉光强度来评估待测抗原
/
抗体的水平
。
因此连接在磁珠上的抗原
/
抗体的稳定性和特异性对试剂检测的时效性和真实性具有重要意义
。
[0004]磁珠包被物通过将抗原或者抗体结合到磁珠的表面而得到
。
磁珠包被物能够作为免疫检测试剂的组成部分，以应用于免疫检测和免疫诊断中，例如化学发光平台的免疫检测和免疫诊断
。
一般地，通过将待测样品与磁珠包被物表面的抗原或者抗体进行免疫反应以捕获待测样品中的待检测物，再利用化学发光技术对捕获到的待检测物进行定量或者定性检测
。
磁珠包被物作为免疫检测试剂的重要成分，对免疫检测试剂的性能影响巨大
。
[0005]然而，现有的磁珠包被物的稳定性相对较差，磁珠团聚等问题，不能满足实际需要
。

技术实现思路

[0006]基于此，本申请提供一种抗体纳米磁珠包被物及其制备方法与应用
。
[0007]本申请一方面提供一种抗体纳米磁珠包被物的制备方法，包括以下步骤：
[0008]将抗体与抗氧化肽通过偶联剂偶联，制备抗体复合物；及将所述抗体复合物与纳米磁珠混合反应，制备抗体纳米磁珠包被物
。
[0009]在其中一个实施例中，所述抗氧化肽包括脂肪类氨基酸和芳香类氨基酸中的一种或多种
。
[0010]在其中一个实施例中，所述抗氧化肽包括精氨酸，半胱氨酸，赖氨酸和酪氨酸侧链中的一种或多种
。
[0011]在其中一个实施例中，所述偶联剂包括1‑
（3‑
二甲氨基丙基）
‑3‑
乙基碳二亚胺盐
酸盐和
N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺中的一种或两种
。
[0012]在其中一个实施例中，所述抗体与所述抗氧化肽的摩尔比为1：
200~1
：
500。
[0013]在其中一个实施例中，所述抗体与偶联剂的摩尔比为1：
100:~1
：
200。
[0014]在其中一个实施例中，所述抗体包括
IgG1、IgG2、IgG3
和
IgG4
中的一种或多种
。
[0015]本申请另一方面还提供一种抗体纳米磁珠包被物，所述的抗体纳米磁珠包被物的制备方法制得
。
[0016]本申请还提供一种检测试剂，包括所述的纳米磁珠包被物
、
磁珠工作液以及吖啶工作液
。
[0017]本申请另一方面还提供一种检测试剂盒，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂含有能与抗原特异性结合的经标记物标记的抗体，所述第二试剂含有所述的抗体纳米磁珠包被物，所述纳米磁珠包被物也能与所述抗原特异性结合，且所述纳米磁珠包被物与所述抗原结合的位点，与所述经标记物标记的抗体与所述抗原结合的位点不同
。
[0018]相比与传统技术，本申请的有益效果包括：
[0019]本申请提供一种抗体纳米磁珠包被物的制备方法，将抗体经过抗氧化肽修饰；再将经过抗氧化肽修饰后的抗体片段
、
偶联剂及纳米磁珠混合反应，制备抗体纳米磁珠包被物
。
[0020]在本申请中，将抗氧化肽偶联到抗体蛋白上，连接到抗体上的抗氧化肽在磁珠包被物的储存中直接清除氧自由基的攻击，抑制铰链区二硫键的断裂，保持抗体的结构稳定和避免发生非共价聚集，增加稳定性
。
并且由于自身并不具有空间结构的优势不会造成抗原活性表位的遮挡，不会影响样本待测物和抗体的特异性结合，由本申请的方法制备得到的抗体纳米磁珠包被物稳定性高，磁珠也不会团聚，并且方法便捷，容易操作
。
具体实施方式
[0021]下面结合实施方式和实施例，对本申请作进一步详细的说明
。
应理解，这些实施方式和实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围，提供这些实施方式和实施例的目的是使对本申请公开内容理解更加透彻全面
。
还应理解，本申请可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式和实施例，本领域技术人员可以在不违背本申请内涵的情况下作各种改动或修改，得到的等价形式同样落于本申请的保护范围
。
此外，在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本申请更为充分地理解，应理解，本申请可以无需一个或多个这些细节而得以实施
。
[0022]除非另有定义，本申请所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请的
的技术人员通常理解的含义相同
。
[0023]术语
[0024]在本申请提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样
。
除非与本申请的申请目的和
/
或技术方案相冲突，否则，本申请涉及的引用文献以全部内容
、
全部目的被引用
。
本申请中涉及引用文献时，相关技术特征
、
术语
、
名词
、
短语等在引用文献中的定义本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
抗体纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将抗体与抗氧化肽通过偶联剂偶联，制备抗体复合物；及将所述抗体复合物与纳米磁珠混合反应，制备抗体纳米磁珠包被物
。2.
根据权利要求1所述的抗体纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述抗氧化肽包括脂肪类氨基酸和芳香类氨基酸中的一种或多种
。3.
根据权利要求1所述的抗体纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述抗氧化肽包括精氨酸，半胱氨酸，赖氨酸和酪氨酸侧链中的一种或多种
。4.
根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述偶联剂包括1‑
（3‑
二甲氨基丙基）
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐和
N
‑
羟基硫代琥珀酰亚胺中的一种或两种
。5.
根据权利要求
1~4
任一项所述的抗体纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述抗体与所述抗氧化肽的摩尔比为1：
200~1
：
500。6.
根据权利要求

【专利技术属性】
技术研发人员：侯文璇，陈永堂，祝亮，钱纯亘，杜鹃，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：