一种磷酸化多肽富集的辅助装置制造方法及图纸

一种磷酸化多肽富集的辅助装置，包括圆台型聚丙烯吸头、实验室用玻璃棉、富集微珠、扁头夹子、注射器，将实验室用玻璃棉揉成一束，塞进聚丙烯吸头较细的一端，使用扁头夹子夹紧吸头较细的一端以固定玻璃棉，富集微珠填充在吸头内玻璃棉上方。注射器接头为圆台型，其圆心角与聚丙烯吸头的圆心角大小相同，且注射器接头外壁涂有一层硅胶。聚丙烯吸头容积为200微升，长83mm，较细的一端吸孔直径为0.2mm。注射器为50毫升注射器。该辅助装置便于微量磷酸化多肽的富集，同时能降低磷酸化多肽的损失。

An Auxiliary Device for Accumulation of Phosphorylated Peptides

【技术实现步骤摘要】
一种磷酸化多肽富集的辅助装置
本技术涉及磷酸化多肽的富集实验领域，尤其是一种磷酸化多肽富集的辅助装置。
技术介绍
蛋白质磷酸化翻译后修饰在生命体中具有重要的意义，蛋白质的磷酸化可以改变蛋白质催化基团的性质、改变蛋白质的构象、改变蛋白质在细胞内的定位等，它是细胞内已知的最快速普遍的信号转导方式。蛋白质的磷酸化和去磷酸化几乎调控着生命体内所有的生命过程，包括细胞的增值、发育、分化和凋亡、生命体的新陈代谢、神经活动、肌肉运动等等。磷酸化蛋白质的研究需要对磷酸化的多肽分子进行富集，常规的富集实验是将富集微珠和样本溶液、清洗溶液、置换溶液、洗脱溶液等在EP管中进行混合震荡孵育、离心后利用移液枪手动将上清液体和微珠进行分离，由于微珠颗粒小、质量轻，手动的分离往往不是带走了部分微珠造成样本的损失，就是剩余太多清洗溶液，导致非磷酸化多肽的残留，使富集效率下降。本技术提供的辅助装置是利用一种新型的过滤装置来分离微珠颗粒和多种溶液。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本技术提供一种磷酸化多肽富集的辅助装置，能够提高富集微珠和清洗溶液的分离效率，同时能降低富集微珠的损失，从而降低磷酸化多肽在富集过程中的损失。一种磷酸化多肽富集的辅助装置，包括圆台型聚丙烯吸头、实验室用玻璃棉、富集微珠、扁头夹子、注射器，将实验室用玻璃棉揉成一束，塞进聚丙烯吸头较细的一端，使用扁头夹子夹紧吸头较细的一端以固定玻璃棉，所述富集微珠填充在吸头内玻璃棉上方。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述扁头夹子的夹头内侧有纹路，所述纹路垂直于吸头。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述吸头较粗的一端外壁均匀伸出至少两根固定杆。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述吸头较粗的一端外壁延伸出一圈固定沿。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述注射器接头为圆台型，其圆心角与聚丙烯吸头的圆心角大小相同，且注射器接头外壁涂有一层硅胶。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述聚丙烯吸头较粗的一端硬，较细的一端软。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述聚丙烯吸头容积为200微升，长83mm，较细的一端吸孔直径为0.2mm。上述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，所述注射器为50毫升注射器。本技术的优点：(一)本辅助装置可以高效完全的分离微珠和清洗溶液、能几乎完全保留微珠不损失、以及几乎完全分离液体不残留。(二)利用该吸头最多可以容纳200微升的样本。(三)特殊的吸头细而长，能使少量的富集微珠填充在更长的一段区域，使得清洗和洗脱溶液能够更充分的与微珠进行接触，使得清洗和洗脱效果得到提高。(四)实验室级别的玻璃棉具有非常纤细的直径可以高效过滤富集微珠。(五)特质的玻璃棉具有极少吸附性以保证样本不损失。(六)使用注射器施压可以及时控制液体流过的时间，以保证磷酸化肽段得到充分的亲和或洗脱时间。(七)本装置适用于IMAC微珠、TiO2微珠等各种富集纯化微珠的固液分离。附图说明图1为本技术实施例1的吸头结构示意图；图2为本技术实施例2的吸头结构示意图；图3为本技术实施例3的吸头结构示意图；图4为吸头加注射器的结构示意图。图中1、吸头，101、富集微珠，102、玻璃棉，103、固定杆，104、固定沿，2、注射器，201、接头，202、刻度。具体实施方式【实施例1】一种磷酸化多肽富集的辅助装置，包括圆台型聚丙烯吸头1、实验室用玻璃棉102、富集微珠101、扁头夹子、注射器2，将实验室用玻璃棉102揉成一束，塞进聚丙烯吸头1较细的一端，使用扁头夹子夹紧吸头较细的一端以固定玻璃棉，所述富集微珠填充在吸头内玻璃棉上方。本装置适用于IMAC微珠、TiO2微珠等各种富集纯化微珠的固液分离。所述玻璃棉的英文名称为GlassWool，货号与规格为20411，由Sigma-Aldrich公司生产。【实施例2】基于实施例1，所述吸头1较粗的一端外壁均匀伸出至少两根固定杆103，可以为两根、三根、四根等。固定杆利于将吸头固定在架子上等，方便放置。【实施例3】基于实施例1，所述吸头1较粗的一端外壁延伸出一圈固定沿104。相比于实施例2的固定杆103，固定沿具有接触面积更大、更易于操作且运输时不会捅破包装袋的优点。【实施例4】基于以上任一实施例，所述磷酸化多肽富集的辅助装置，所述注射器接头201为圆台型，其圆心角与聚丙烯吸头的圆心角大小相同，且注射器接头201外壁涂有一层硅胶。注射器接头上还设有刻度202。同样地，聚丙烯吸头上也可设刻度。由于使用时，注射器需要加压使溶液缓慢流过富集微珠，所以注射器接头的圆心角与吸头的圆心角大小相同，使注射器能与吸头贴合，利于密封从而便于加压；所述注射器接头外壁涂有一层硅胶，能够使注射器接头与吸头更贴合，进一步提高密封效果。【实施例5】基于以上任一实施例，以下为优选技术特征，可以与以上任一实施例择一或择多组合。优选地，所述扁头夹子的夹头内侧有纹路，所述纹路垂直于吸头。纹路垂直于吸头可以防止微珠被带出。优选地，所述聚丙烯吸头较粗的一端硬，较细的一端软。较粗的一端硬，便于手持与固定，较细的一端软，利于夹子夹紧。优选地，所述聚丙烯吸头容积为200微升，长83mm，较细的一端吸孔直径为0.2mm。优选地，所述注射器为50毫升注射器。富集方法如下：1.取出20μLIMACslurry到低吸附EP管，离心使beads沉淀后，吸去上清。2.用50μL60％ACN/1％AA溶解抽干的肽段样品，将上清溶液移入到装有beads的EP管中，用枪吸吹几次。3.将EP管置于金属振荡器上，室温剧烈震荡1500rpm,1h。4.将含Beads的溶液一起加入到特制磷酸化富集辅助装置中。5.使用50mL注射器加压使溶液以20μL/min的流速流出。6.加入50μL0.1MNaCl/25％ACN/0.1％aceticacid，使用注射器加压使溶液缓慢流过富集微珠，并重复清洗一次。7.加入50μL60％ACN/1％AA，使用注射器加压使溶液缓慢流过富集微珠，并重复清洗一次。8.加入50μLH2O，使用注射器加压使溶液缓慢流过富集微珠，并重复清洗一次。9.加入40μL6％NH3H2O，使用注射器加压使溶液以20μL/min的流速流过富集微珠，收集流出的液体。10.重复步骤9两次，共收集120μL的磷酸化多肽溶液。11.将获得的溶液浓缩干燥就可以用质谱进行上机检测。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷酸化多肽富集的辅助装置，其特征在于，包括圆台型聚丙烯吸头、实验室用玻璃棉、富集微珠、扁头夹子、注射器，将实验室用玻璃棉揉成一束，塞进聚丙烯吸头较细的一端，使用扁头夹子夹紧吸头较细的一端以固定玻璃棉，所述富集微珠填充在吸头内玻璃棉上方。

【技术特征摘要】
1.一种磷酸化多肽富集的辅助装置，其特征在于，包括圆台型聚丙烯吸头、实验室用玻璃棉、富集微珠、扁头夹子、注射器，将实验室用玻璃棉揉成一束，塞进聚丙烯吸头较细的一端，使用扁头夹子夹紧吸头较细的一端以固定玻璃棉，所述富集微珠填充在吸头内玻璃棉上方。2.根据权利要求1所述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，其特征在于，所述扁头夹子的夹头内侧有纹路，所述纹路垂直于吸头。3.根据权利要求1所述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，其特征在于，所述吸头较粗的一端外壁均匀伸出至少两根固定杆。4.根据权利要求1所述的一种磷酸化多肽富集的辅助装置，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宜子，陈希，韩强强，尚骏，杜博贾，陈继锋，
申请(专利权)人：谱度众合武汉生命科技有限公司，
类型：新型
国别省市：湖北,42