The invention discloses a thermostable carboxylesterase gene estC', a recombinant plasmid, a recombinant engineering bacterium, a coding protein and application. The recombinant engineering bacterium Rosetta (DE3) pLysS/pET28b estC'could realize the heterologous expression of EstC under the conditions of 16 At 65mg/L, 0.5U esterase EstC could degrade 80% of the total esterase at 45 ~C for 14 h. The invention can provide services for industrial applications in the fields of pesticide degradation, environmental treatment, etc., especially when high temperature catalysis is needed, the carboxylesterase is more suitable.
【技术实现步骤摘要】
羧酸酯酶基因、重组质粒、重组工程菌及编码蛋白和应用
本专利技术涉及生物工程领域，特别涉及一种耐热羧酸酯酶基因、重组质粒、重组工程菌及其编码蛋白和在农药降解中的应用。
技术介绍
羧酸酯酶(EC3.1.1.3,carboxylesterhydrolases)是一大类偏好于催化酰基链长度小的底物(≤10)的酯键水解和形成的酶类，该酶具有优良的化学选择性、区域选择性和立体选择性，可以应用于农药降解、环境治理以及医药合成等领域。有机磷类农药一直在农业生产中被广泛使用，但也带来诸如环境污染、农药残留等问题。与传统化学法降解农药相比，羧酸酯酶可以专一性的催化有机磷农药中的酯键断裂，继而生成无毒或低毒的醇或酸，是一种绿色高效的降解方式。变铅青链霉菌(Streptomyceslividands)TK24属于放线菌目链霉菌科链霉菌属，具有丰富的次级代谢多样性，可产生包括酯酶在内的多种水解酶类。链霉菌蛋白表达常需要糖基化等蛋白质翻译后修饰过程，故在大肠杆菌(Escherichiacoli)中进行异源表达时，由于大肠杆菌表达系统缺乏完善的蛋白质翻译后修饰系统，且变铅青链霉菌TK24基因组...
【技术保护点】
1.一种耐热羧酸酯酶基因estC'，其特征在于其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
【技术特征摘要】
1.一种耐热羧酸酯酶基因estC'，其特征在于其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。2.一种重组质粒，其特征在于其包含如权利要求1所述的耐热羧酸酯酶基因estC'。3.一种耐热羧酸酯酶基因重组工程菌，其特征在于其包含如权利要求2所述的重组质粒。4.如权利要求3所述的一种耐热羧酸酯酶基因重组工程菌，其特征是该重组工程菌为Rosetta(DE3)pLysS/pET28b-estC'。5.如权利要求4所述的耐热羧酸酯酶基因重组工程菌，其特征在于该工程菌的表达耐热酯酶基因的编码蛋白的条件为：IPTG的诱导浓度为0.01-0.5mM，诱导表达温度为16-25℃...
【专利技术属性】
技术研发人员：王宝娟，吴爽，高鹏，王鹏，朱国萍，师雪芹，常欣，熊声麒，杨刚，汪勇，王剑飞，
申请(专利权)人：安徽师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34
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