鸡SIRT1重组蛋白基因、重组蛋白及其制备方法与应用技术

技术编号:20857595 阅读:54 留言:0更新日期:2019-04-13 11:20
本发明专利技术公开了一种鸡SIRT1重组蛋白基因,还公开了含有上述基因的重组表达载体和转基因重组大肠杆菌。本发明专利技术还公开了一种鸡SIRT1重组蛋白及其制备方法与应用。本发明专利技术所提供的鸡SIRT1的基因DNA序列能在大肠杆菌中进行可溶性重组蛋白的表达,重组蛋白的制备方法操作简便、表达量高、成本低廉,通过本发明专利技术所提供的方法,通过SIRT1基因片段的优化实现、提高了其在大肠杆菌中的表达,并实现了可溶性重组蛋白的表达,通过玻璃珠研磨法和镍柱亲和一步纯化法,可得到高纯度的鸡SIRT1重组蛋白。

【技术实现步骤摘要】
鸡SIRT1重组蛋白基因、重组蛋白及其制备方法与应用
本专利技术涉及基因工程领域中重组基因的原核表达和纯化方法,特别涉及一种鸡SIRT1重组蛋白基因、重组蛋白及其制备方法与应用。技术背景SIRT1作为依赖NAD+的去乙酰化酶,可以使组蛋白和非组蛋白去乙酰化,能从蛋白质组参与蛋白的结构和功能的调节,从而改变细胞和机体的染色质结构、影响基因的表达调控和细胞代谢过程,生物学功能涉及细胞的生长周期、凋亡、代谢状态和炎症及应激反应。SIRT1的功能活性连接了成细胞、机体的能量代谢和基因转录。当机体摄入过多的能量物质时,肝脏能将这些过量的能量物质转化为脂肪,并转运到脂肪组织贮存起来。长期摄入过多的能量最终会导致肥胖、脂肪肝和其他肥胖相关的代谢性疾病。目前SIRT1被认为是一个治疗肥胖及相关疾病的一个重要靶点。在家禽生产中,脂肪沉积过影响动物的健康、生殖繁育、瘦肉产出率,影响饲料利用率和产蛋率下降等问题,同时脂肪成分主要来自自身肝脏的重新合成。因此,研究肝脏的脂肪代谢及其调控机制对于控制家禽的脂肪沉积极为重要。本专利技术利用基因工程在大肠杆菌体系中表达鸡重组蛋白SIRT1,可以深入解析其分子结本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸡SIRT1重组蛋白基因,其特征在于,碱基序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种鸡SIRT1重组蛋白基因,其特征在于,碱基序列如SEQIDNO:1所示。2.含有权利要求1所述鸡SIRT1重组蛋白基因的重组表达载体。3.含有权利要求1所述鸡SIRT1重组蛋白基因的转基因重组大肠杆菌菌株。4.权利要求1所述鸡SIRT1重组蛋白基因在制备鸡SIRT1重组蛋白中的应用。5.一种鸡SIRT1重组蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。6.权利要求5所述鸡SIRT1重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)根据鸡SIRT1基因编码的氨基酸多肽序列,以减少其在大肠杆菌中的稀有密码子和减少二级结构为原则,优化得到鸡Sirt1基因的cD...

【专利技术属性】
技术研发人员:郁建锋顾志良胡悦葛友祯王倩茜徐璐
申请(专利权)人:常熟理工学院
类型:发明
国别省市:江苏,32

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