一种耐热的酯酶编码基因、载体、工程菌及其编码蛋白的用途制造技术

技术编号:20755890 阅读:51 留言:0更新日期:2019-04-03 12:23
本发明专利技术公开了一种耐热的酯酶编码基因、载体、工程菌及其编码蛋白的用途,所述的基因具有SEQ ID NO:1所示的碱基序列,本发明专利技术与现有技术相比,所述的基因在保障所编码蛋白质不变的前提下,对1257个核苷酸中的937个核苷酸进行了替换,起始密码子ATG,终止密码子TAA;A碱基248个,占比19.7%;T碱基328个,占比26.1%;C碱基299个,占比23.8%;G碱基382个,占比30.4%,GC含量也由菌株中的原始核苷酸占比的75.2%下降至54.2%。所制的基因工程菌在16‑30℃和0.01‑0.1mM IPTG条件下,在大肠杆菌中成功获得异源表达。

【技术实现步骤摘要】
一种耐热的酯酶编码基因、载体、工程菌及其编码蛋白的用途
本专利技术涉及酯酶编码基因、载体、工程菌及其编码蛋白的用途,特别是涉及耐热的酯酶编码基因、载体、工程菌及其编码蛋白的用途。
技术介绍
酯酶(Esterases,EC3.1.1.X)属于典型的α/β水解酶超家族,是一大类能够催化酯键水解和形成的酶类。酯酶催化反应具有底物范围广,反应过程中有立体特异性和区域专一性等优点,并且酯酶在催化底物合成和水解时不需要辅助因子,在有机溶剂中稳定性很高,因此酯酶被广泛应用于洗涤剂、食品工业、纺织工业、制药工业、临床诊疗、化妆品、生物柴油、农业和环境治理等领域。工业上对酯酶的需求与日俱增,酯酶已经成为除蛋白酶和淀粉酶之外在全球销售总量位居第三位的酶类,因此寻找适于工业生产的具有优良催化性能的酯酶成为全球研究者们感兴趣的课题。目前,变铅青链霉菌(Streptomyceslividans)全基因组序列已被测序,从已公布的数据库中寻找酯酶的编码基因并对其进行异源表达及酶学性质研究,以获得有价值的酯酶成为获取该酶的有效途径。但由于酯酶是一类对细胞有毒性的物质,在异源宿主表达时常会对宿主细胞造成毒性导致细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐热的酯酶编码基因,其特征在于:具有SEQ ID NO:1所示的碱基序列。

【技术特征摘要】
2018.05.29 CN 20181053811691.一种耐热的酯酶编码基因,其特征在于:具有SEQIDNO:1所示的碱基序列。2.含有权利要求1所述的一种耐热的酯酶编码基因的载体,其特征在于:所述的载体通过以下方法制备:将estB'与pET28b质粒连接,构建具卡那霉素Kan抗性的重组表达载体pET28b-estB'。3.含有权利要求1所述的一种耐热的酯酶编码基因的工程菌,其特征在于:所...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱国萍王宝娟王敖李全发王鹏王源秀吴爽曹正宇刘冯楠
申请(专利权)人:安徽师范大学
类型:发明
国别省市:安徽,34

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