一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用。本发明专利技术提供了蛋白质，为以下1)、2)或3)所述的蛋白质：1)氨基酸序列是序列表中序列1所示的蛋白质；2)在序列表中序列1所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。本发明专利技术的壳聚糖酶在枯草芽孢杆菌中成功表达，重组菌经高密度发酵胞外酶活力为1103.4U/mL，蛋白含量为4.7mg/mL。本发明专利技术所述壳聚糖酶产酶水平高，安全性好，且制备的壳聚糖酶酶学性质优良、水解效率高，因而在食品、医药、饲料等行业具有重要的应用价值。

Preparation and Application of a Chitosanase from Bacillus Barengraz

The invention discloses a preparation method and application of chitosanase from Bacillus Barengraz. The present invention provides proteins for the following proteins: 1) amino acid sequence is the protein shown in sequence 1 in sequence list; 2) fusion protein obtained from the N-terminal or/or C-terminal linkage label of the protein shown in sequence 1; 3) protein obtained by substitution and/or deletion and/or addition of one or more amino acid residues of the protein shown in 1) or 2). Proteins with the same function. The chitosanase of the invention is successfully expressed in Bacillus subtilis. The extracellular enzyme activity of the recombinant bacteria after high-density fermentation is 103.4U/mL, and the protein content is 4.7mg/mL. The chitosanase produced by the invention has high enzyme production level, good safety, excellent enzymatic properties and high hydrolysis efficiency, so it has important application value in food, medicine, feed and other industries.

【技术实现步骤摘要】
一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用
本专利技术涉及生物
，具体是一种巴伦葛兹类芽孢杆菌壳聚糖酶的制备方法与应用。
技术介绍
壳聚糖是几丁质部分脱乙酰的产物，由随机分布的D-氨基葡萄糖(GlcN)和N-乙酰-D-氨基葡萄糖(GlcNAc)以β-1,4-糖苷键连接而成的直链天然多聚物。壳寡糖是壳聚糖降解的产物，聚合度(degreeofpolymerization,DP)一般在2-10之间。壳寡糖除了分子量低和水溶性好外，还具有许多生理活性，如抑菌性、抗氧化、抗肿瘤、降胆固醇、降血压、防感染以及控制关节炎等，因而广泛应用于食品、医药、农业、饲料等行业(Liaqatetal.CarbohydratePolymers,2018:184-243)。壳聚糖酶(EC3.2.1.132)是专一水解壳聚糖的酶类，从壳聚糖链中随机切割β-1,4-糖苷键，产物为不同聚合度的壳寡糖及氨基葡萄糖。根据氨基酸序列同源性的差异，壳聚糖酶分属于6个糖苷水解酶家族[GlycosideHydrolases(GH)family]：GH5、GH7、GH8、GH46、GH75和GH80(Thadathilet本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛋白质，为如下1)或2)或3)：1)氨基酸序列是序列表中序列1所示的蛋白质；2)在序列表中序列1所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.蛋白质，为如下1)或2)或3)：1)氨基酸序列是序列表中序列1所示的蛋白质；2)在序列表中序列1所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的蛋白质。2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。3.如权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下(a1)或(a2)或(a3)所示的DNA分子：(a1)编码区包括序列表中序列2的DNA分子；(a2)与(a1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；(a3)在严格条件下与(a1)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。4.含有权利要求2或3所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系。5.权利要求1所述蛋白质在作为壳聚糖酶中的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨绍青，江正强，马帅，闫巧娟，刘翊昊，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11