一种用于分离脐带间充质干细胞的方法及其消化液技术

本发明专利技术公开了一种用于分离脐带间充质干细胞的方法及其消化液，涉及干细胞技术领域，该方法包括采用脐带消化液对脐带组织进行消化，脐带消液包括有浓度为0.05～0.5％的II型胶原酶、浓度为0.05～0.5％的IV型胶原酶、以及浓度为0.1％的透明质酸酶，采用该消化液能够有效提高细胞的分离效率以及分离的细胞数量，且获得的脐带间充质干细胞具有表面标志物表达量高的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种用于分离脐带间充质干细胞的方法及其消化液
本专利技术涉及干细胞
，具体而言，涉及一种用于分离脐带间充质干细胞的方法及其消化液。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)是中胚层来源的，具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞。事实上，MSC广泛存在于全身多种组织中，几乎来源于机体所有的组织器官，如骨髓、骨膜、脂肪组织、牙髓、滑膜、脐带、胎盘、羊水以及胎儿组织等。不同来源的间充质干细胞具有相似的形态，表达相同的表面标记，具有相似的生物学特征方面，如可在体外培养扩增，并能在特定条件下分化为神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞在内的多组织系统的细胞。MSC除了具有多向组织细胞分化能力之外，还在造血、免疫炎症反应、血管新生等人体重要功能中起重要调节作用。脐带间充质干细胞(UC-MSC)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞。脐带间充质是一类低免疫原性细胞，且具有很强的免疫调节功能，脐带间充质干细胞拥有MSC的全部特性，并且含量丰富，易于分离培养。与其他来源的MAC相比，UC-MSC更原始，是介于胚胎干细胞和成体干细胞之间的干本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于分离脐带间充质干细胞的方法，其特征在于，其包括脐带消化步骤；所述脐带消化步骤包括：采用脐带消化液与分离后的脐带组织混合孵育；所述脐带消化液包括有PBS、II型胶原酶、IV型胶原酶以及透明质酸酸，在所述脐带消化液中，II型胶原酶的浓度为0.05～0.5％，IV型胶原酶的浓度为0.05～0.5％，透明质酸酶的浓度为0.05～0.3％。

【技术特征摘要】
1.一种用于分离脐带间充质干细胞的方法，其特征在于，其包括脐带消化步骤；所述脐带消化步骤包括：采用脐带消化液与分离后的脐带组织混合孵育；所述脐带消化液包括有PBS、II型胶原酶、IV型胶原酶以及透明质酸酸，在所述脐带消化液中，II型胶原酶的浓度为0.05～0.5％，IV型胶原酶的浓度为0.05～0.5％，透明质酸酶的浓度为0.05～0.3％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脐带消化液中，II型胶原酶的浓度为0.1～0.3％，IV型胶原酶的浓度为0.1～0.3％，透明质酸酶的浓度为0.05～0.2％。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述脐带消化步骤中，采用所述脐带消化液消化脐带组织后，得到未消化完的脐带组织以及第二消化液，采用150～350目的筛网过滤第二消化液，离心得到第二份消化后的细胞。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在采用所述脐带消化液消化脐带组织后，所述方法包括：将未消化完的脐带组织与胰酶混合，30～45℃恒温孵育后得到第三份消化后的细胞。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在采用所述脐带消化液消化脐带组织之前，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：施琳，
申请(专利权)人：汇麟生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11