适体在自体免疫疾病的疗法和/或诊断中的用途制造技术

本发明专利技术涉及适体在自体免疫疾病的疗法和/或诊断中的用途。本发明专利技术是针对一种用于自体免疫疾病的疗法和/或诊断中的适体，所述适体包含与SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3的核酸序列和/或与SEQ ID No.1、2和3之一至少80％一致的核酸序列或由其组成，其中所述自体免疫疾病为心肌病、扩张型心肌病(DCM)、围产期心肌病(PPCM)、特发性心肌病、查加斯心肌病、查加斯巨结肠、查加斯巨食道症、查加斯神经病、良性前列腺肥大、硬皮病、牛皮癣、雷诺综合症、先兆子痫、同种异体肾移植排斥、心肌炎、青光眼、高血压、肺动脉高血压、恶性高血压和/或阿兹海默氏病。

Application of aptamers in the treatment and/or diagnosis of autoimmune diseases

The present invention relates to the application of aptamers in the treatment and/or diagnosis of autoimmune diseases. The present invention is directed at an aptamer for the treatment and/or diagnosis of autoimmune diseases, which comprises or consists of nucleic acid sequences consistent with or at least 80% of SEQ ID No.1, SEQ ID No.2, SEQ ID No.3, and/or one of SEQ ID No.1, 2 and 3. The autoimmune diseases are cardiomyopathy, dilated cardiomyopathy (DCM), perinatal cardiomyopathy (PPCM). Idiopathic cardiomyopathy, Chagas cardiomyopathy, Chagas megacolon, Chagas megaesophagus, Chagas neuropathy, benign prostatic hypertrophy, scleroderma, psoriasis, Reynolds syndrome, preeclampsia, allograft rejection, myocarditis, glaucoma, hypertension, pulmonary hypertension, malignant hypertension and/or Alzheimer's disease.

【技术实现步骤摘要】
适体在自体免疫疾病的疗法和/或诊断中的用途本申请是申请日为2012年3月2日、申请号为201280012243.6、专利技术名称为“适体在自体免疫疾病的疗法和/或诊断中的用途”的申请的分案申请。
技术介绍
免疫系统形成了每一动物的必需部分。哺乳动物利用其免疫系统来防御微生物、检测和移除异常细胞(如例如肿瘤细胞)以及使组织再生。因此，生物体依靠两个互相关联的防御机制，即体液免疫和细胞免疫。抗体在与其抗原结合时会触发体液免疫反应。抗体可以按多种方式起作用。除中和抗原以外，抗体也活化补体系统。还存在针对自身抗原的抗体。为了产生这些所谓的自体抗体，可了解分子模拟和/或旁观活化(bystanderactivation)。自体抗体与自身抗原的特异性结合可活化自然杀伤细胞(NK细胞)，这些自然杀伤细胞能够促进这些抗原的降解。自体免疫疾病是基于抗体针对身体自身的组成部分的这种特异性识别和结合，由此触发针对自身细胞或组织的免疫反应。除此种免疫刺激效应以外，自体抗体也可通过其他机制引起致病表型的发展。众所周知，还存在可以特异性针对G蛋白偶联受体，如肾上腺素能α-1受体、肾上腺素能β-1受体、肾上腺素能β-2受体、内皮素1ETA受体、蕈毒碱M2受体、血管紧张素IIAT1受体和/或蛋白酶活化受体(PAR)受体的胞外部分，并且在特异性结合后可活化或阻断这些受体的自体抗体。生物体中这些自体抗体的存在对于可在疾病发展中起作用的相应受体的永久性活化或阻断可以产生激动或拮抗效应。扩张型心肌病(DCM)是有较高百分比的患者存在这种活化的自体抗体与肾上腺素能β-1受体的胞外部分，尤其是肾上腺素能β-1受体的第一环或第二环的结合的一种疾病。因此，提出了这些患者中DCM的自体免疫发病机制。在结合这些自体抗体后，受体被持续活化(亚恩斯(Jahns)等人(2004),有关β-1肾上腺素能受体引导的自体免疫攻击作为特发性心肌病成因的直接证据(Directevidenceforabeta-1-adrenergicreceptor-directedautoimmuneattackasacauseofidiopathiccardiomyopathy),临床研究杂志(J.Clin.Invest.)113,1419至1429)。在近期的研究中，可以显示，经由免疫球蛋白吸附从血液中移除这些自体抗体有助于心肌的再生(华鲁卡G(WallukatG)、雷因克P(ReinkeP)、多福WV(WV)、路德HP(LutherHP)、百斯瓦特K(BestvaterK)、费利克斯SB(FelixSB)、鲍曼G(BaumannG)(1996),通过免疫吸附来移除扩张型心肌病中的自体抗体(Removalofautoantibodiesindilatedcardiomyopathybyimmunoadsorption.),国际心脏病学杂志(IntJCardiol.),54:191-195；穆勒J(MüllerJ)、华鲁卡G、丹德尔M(DandelM)、比达H(BiedaH)、布兰德斯K(BrandesK)、斯皮格伯格S(SpiegelsbergerS)、尼森E(NissenE)、昆泽R(KunzeR)、赫泽尔R(HetzerR)(2000),特发性扩张型心肌病患者中的免疫球蛋白吸附(Immunoglobulinadsorptioninpatientswithidiopathicdilatedcardiomyopathy.),循环(Circulation.),101:385-391；W.V.多福(W.V.)、S.B.费利克斯(S.B.Felix)、G.华鲁卡(G.Wallukat)、S.布雷默(S.Brehme)、K.百斯瓦特(K.Bestvater)、T.霍夫曼(T.Hofmann)、F.K.克莱伯(F.K.Kleber)、G.鲍曼(G.Baumann)、P.雷因克(P.Reinke)(1997),免疫吸附对扩张型心肌病的短期血液动力学效应(Short-termhemodynamiceffectsofimmunoadsorptionindilatedcardiomyopathy.),循环,95,1994-1997；和W.V.多福、G.华鲁卡、Y.多福(Y.)、S.B.费利克斯、G.鲍曼(2004),特发性扩张型心肌病中的免疫吸附，3年随访(Immunoadsorptioninidiopathicdilatedcardiomyopathy,a3-yearfollow-up.),国际心脏病学杂志,97,529-534)。有其他心血管系统疾病被提出与针对G蛋白偶联受体的自体抗体的存在有关，如查加斯心肌病(Chagascardiomyopathy)、围产期心肌病、心肌炎、肺动脉高血压和恶性高血压。也在例如患有青光眼、糖尿病、阿兹海默氏病(Alzheimerdisease)、良性前列腺肥大、硬皮病、雷诺综合症(Raynaudsyndrome)、牛皮癣以及先兆子痫和慢性查加斯疾病(chronicChagasdisease)的患者中以及具有同种异体肾移植排斥的那些患者中发现了针对G蛋白偶联受体的自体抗体。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供用于与患者体内自体抗体的存在相关的自体免疫疾病的疗法和/或诊断的新颖方法。本专利技术提供一种用于自体免疫疾病的疗法和/或诊断的适体，所述适体包含SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3的核酸序列和/或与SEQIDNo.1、2和3之一至少80％一致的核酸序列或由其组成。本专利技术的适体的特征在于，其包含SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3的15个核苷酸的核酸序列和/或与SEQIDNo.1、2和3之一至少80％一致的核酸序列或由所述核酸序列组成。15-mer：GGTTGGTGTGGTTGG(SEQIDNo.1)、26-mer：CGCCTAGGTTGGGTAGGGTGGTGGCG(SEQIDNo.2)和12-mer：GGTTGGTGTGGT(SEQIDNo.3)都彼此独立地有本专利技术适体的目标特异性能力并且是引起本专利技术适体的目标特异性的原因。其他核酸分子或序列可以被添加到SEQIDNo.1、2和/或3的核酸序列的5'端和/或3'端。所述15-mer(SEQIDNo.1)最先是因其与结合于凝血酶而被分离，参见US5,543,293，此也适用于26-mer(SEQIDNo.2)，其在WO/2010/033167中首次描述。15-mer已经以名称ARC183用于凝血酶抑制的I期临床试验中，即，作为可能在急性心血管事件中使用的抗凝血剂。26-mer已经以名称NU172(ARC2172)用于II期临床试验(clinicaltrialgov.标识符：NCT00808964)中。然而，针对15-mer(SEQ.IDNo.1)的试验证明，获得期望的抗凝血作用所需的适体量引起次最佳的剂量分布。已意外地发现，本专利技术的适体可用于干扰特异性针对自体免疫疾病相关性G蛋白偶联受体的抗体，尤其是自体抗体的相互作用。具体说来，可以显示，本专利技术的适体能够结合于特异性针对肾上腺素能α-1受体、肾上腺素能β-1受体、肾上腺素能β-2受体、内皮素1ETA受体、蕈毒碱M2受体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种适体在制备用于自体免疫疾病的疗法和/或诊断的药物组合物、试剂盒或血浆分离置换柱中的应用，所述适体由SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3的核酸序列构成，所述适体特异性结合于针对G蛋白偶联受体的自体抗体，并且干扰特异性针对自体免疫疾病相关性G蛋白偶联受体的自体抗体与所述G蛋白偶联受体的相互作用，所述自体免疫疾病与特异性针对G蛋白偶联受体的自体抗体的存在相关。

【技术特征摘要】
2011.03.07 EP 11157229.3;2011.03.07 US 61/449,7721.一种适体在制备用于自体免疫疾病的疗法和/或诊断的药物组合物、试剂盒或血浆分离置换柱中的应用，所述适体由SEQIDNo.1、SEQIDNo.2或SEQIDNo.3的核酸序列构成，所述适体特异性结合于针对G蛋白偶联受体的自体抗体，并且干扰特异性针对自体免疫疾病相关性G蛋白偶联受体的自体抗体与所述G蛋白偶联受体的相互作用，所述自体免疫疾病与特异性针对G蛋白偶联受体的自体抗体的存在相关。2.如权利要求1所述的应用，所述G蛋白偶联受体为人类G蛋白偶联受体肾上腺素能α-1受体、肾上腺素能β-1受体、肾上腺素能β-2受体、内皮素1ETA受体、蕈毒碱M2受体、血管紧张素IIAT1受体和/或PAR受体。3.如权利要求1或2所述的应用，其中所述适体为≥12个核苷酸到≤160个核苷酸的核酸序列。4.如权利要求1或2所述的应用，其中所述适体被用于人类的疗法和/或诊断中。5.如权利要求1或2所述的应用，其中所述适体为DNA适体。6.如权利要求1或2所述的应用，其中所述自体免疫疾病为心肌病、扩张型心肌病(DCM)、围产期心肌病(PPCM)、特发性心肌病、查加斯心肌病(Chagas'cardiomyopathy)、查加斯巨结肠(Chagas'megacolon)、查加斯巨食道症(Chagas'megaesophagus)、查加斯神经病(Chagas'neuropathy)、良性前列腺肥大、硬皮病、雷诺综合症(Raynaudsyndrome)、先兆子痫、同种异体肾移植排斥、心肌炎、糖尿病、青光眼和/或肺动脉高血压。7.如权利要求1或2所述的应用，其中所述抗体存在于体液中或来源于体液，优选人类体液，更优选人类血液、血浆、血清、尿液、粪便、滑液、间质液、淋巴液、唾液、脊...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹果夫·谢姆科，安妮凯萨琳·哈伯兰，格尔德·瓦卢卡特，
申请(专利权)人：柏林夏瑞蒂医科大学，马克斯·德尔布吕克分子医学中心，
类型：发明
国别省市：德国,DE