免疫T-细胞刺激制造技术

本发明专利技术涉及刺激或增强动物中的免疫Ｔ－细胞的新方法。特别的，本发明专利技术涉及来源于采用一种或多种免疫原超免疫的鸟类的卵，更特别是小于３０００道尔顿的卵级分。动物对有效量的超免疫卵或其级分的摄入可导致动物中整个Ｔ－细胞类群的显著增加。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及通过天然产生的组合物来刺激或增强受体动物中的免疫T-细胞活性的方法。更特别的，本专利技术涉及来自超免疫鸟类的卵或其级分的给药，从而可刺激或增强动物中免疫T-细胞的活性。
技术介绍
T-细胞的刺激和增强对免疫应答的产生、成熟T-细胞的存活和胸腺细胞的发育具有重要作用。它是消灭被微生物感染的细胞的特异性获得性免疫系统的一重要组成部分。它同时也构成了宿主自身识别能力的基础。T-细胞对其自身识别能力经过了阳性和阴性选择，其中MHCp复合体没有被完全活化，从而阻止了针对宿主组织的免疫应答。T-细胞的刺激可增加细胞毒性T淋巴细胞(CTL)群体，其中CTL具有裂解靶细胞的能力，是T淋巴细胞的一种重要的效应物活性。人T-细胞刺激是一种获得对自体固有肿瘤细胞具有细胞毒性的T-细胞类群的有效方法。这同样可增加涉及人B淋巴细胞活化和免疫球蛋白产生的辅助T淋巴细胞的量。原始T-细胞的抗原特异性免疫应答涉及一系列非常复杂的协同事件。该活化包括T-细胞的分化、增殖和效应物功能。共同支配该分化过程的各种参数已被确定，例如，抗原呈递途径和剂量、微环境、抗原呈递细胞(APC)和抗原的特性。免疫T细胞活化的最初关键事件是由T细胞上的特异性T细胞受体(TCR)与同APC上的MHC分子结合的抗原性肽相互作用引起的。这些事件对于细胞因子如IL-2的产生以及细胞因子受体的表达是至关重要的。这又将决定T细胞增殖的程度和持续时间。由活化T-细胞对IL-2生产的调节是T细胞活化调节的重要特征之一。鸟纲的各种属，例如小鸡(gallus domesticus)、火鸡、和鸭，能在血液和卵中产生抗能导致鸟类疾病的免疫原的，和抗其他免疫原的抗体。例如，LeBacqVerheyden等(Immunology 27683(974))和Leslie，G.A.等(J.Med.1301337(1969))已对小鸡的免疫球蛋白进行了定量分析。Polson等(Immunological Communications9495-514(1980))对母鸡进行免疫使其抗许多蛋白质和蛋白质的天然混合物，并在其卵黄中检测到IgY抗体。Fertel等(Biochemicaland Biophysical Research Communications 10210281033(1981))免疫母鸡使其能抗前列腺素，并在其卵黄中检测到抗体。Jensenius等(Journal of Immunological Methods 4663-68(1981))提供了一种分离卵黄IgG用于免疫诊断应用的方法。Polson等(Immunological Communications 9475-493(1980))描述了从被各种植物病毒免疫的母鸡卵黄中分离的抗体。目前已开发出超免疫的卵，并被证实其可超量产生抗体和一些生物因子。对于这类进展的一些例子如下美国专利No.4,357,272中公开了从来源于超免疫母鸡的卵黄中分离抗体的技术方案。所述的抗体应答是通过反复注射来源于植物病毒、人IgG、破伤风抗毒素、蛇抗蛇毒素和Serameba的免疫原引起的。美国专利No.4,550,019中公开了从采用具有至少30,000的分子量或粒子重量的免疫原进行超免疫的母鸡的抗体产生的蛋黄中分离抗体的技术方案。用于超免疫鸡的免疫原选自植物病毒、人免疫球蛋白、破伤风毒素、和蛇毒液。美国专利No.4,748,018中公开了被动免疫哺乳动物的方法，其包括胃肠外给药来源于已经用相应抗原免疫的鸟类的卵的纯化的抗体，并且所述哺乳动物获得了对上述卵的免疫性。美国专利No.5,772,999公开了通过对受体给药超免疫的卵和/或乳或其级分来预防、抑制或降低受体中的慢性肠胃病症或非甾类消炎药导致的(NSAID-导致的)肠胃损伤的方法。美国专利No.6,420,337公开了分离自超免疫卵的新的细胞因子活化因子(CAF)，其能上调一些促炎细胞因子，包括TNFα，IL-6和IL-1β，并能下调TGFβ。但是这些参考文献中没有一篇公开或启发了当将所述卵或其级分给药至动物，具有刺激或增强所述动物中的免疫T-细胞活性的能力。这些参考文献中也没有公开或启发了这样一种提供了合理的预期的方法，其中采用非特异性疫苗超免疫鸟类可诱导鸟类产下具有这种当给药至受体动物时的能力的卵。专利技术简述本专利技术的目的是提供通过对所述动物给药有效量的卵产物来刺激动物中免疫T-细胞产生的方法。本专利技术的进一步的目的是提供通过对所述动物给药有效量的卵产物来增加动物中免疫T-细胞产生的方法。附图简述附图说明图1为一曲线图，其描述了与超免疫卵的小于3000道尔顿的级分一起培养的各种时间阶段的Jurkat细胞的刺激指数。图2为一曲线图，其描述了与超免疫卵的小于3000道尔顿的级分一起培养的各种时间阶段的Daudi细胞的刺激指数。专利技术详述本专利技术采用新的途径来刺激或增强动物中的免疫T-细胞的活性。本专利技术包括来源于经一种或多种免疫原超免疫的鸟类的卵或其级分。动物对有效量的超免疫卵或其级分的摄入可导致所述动物中T-细胞类群的显著刺激。本专利技术中的卵产物是具有特别吸引力的产品，因为它是完全天然的，并且，其本身可经给药来刺激或增强动物中的T细胞活性，而无需担心许多目前采用的免疫刺激产物通常伴随的负作用。很明显，对卵有变应性或具有对卵的耐受性的动物不能摄入一些给药形式中的超免疫蛋产物。专利技术人相信，上述有益特性(即T细胞刺激和增强)是由于经超免疫过程引发或增强的一些免疫因子造成的。这些免疫因子不被认为是抗体，因为如实施例所述，超免疫卵的大小小于3000道尔顿的级分比全卵本身在刺激和增强免疫T-细胞活性方面更有效。很明显，小于3000道尔顿大小的级分不含抗体。因此，专利技术人认为这些因子代替了某些免疫调节因子类型，有效诱导了免疫应答的细胞臂，导致了免疫T-细胞的刺激。定义术语“卵”或“全卵”均表示任何的完整的卵，无论是食用卵还是超免疫卵或其他的卵。术语“卵产物”或“其级分”分别表示来源于卵的任何产物或级分。术语“食用卵”或“食用卵产物”或“其级分”分别表示完整的卵，或其来源的任何产物或级分，这些均来源于保持在非超免疫状态的产卵动物。术语“超免疫卵”或“超免疫卵产物”或“其级分”分别表示完整的卵，或其来源的任何产物或级分，这些均来源于保持在超免疫状态的产卵动物。术语“免疫原”是指能诱导体液抗体和/或细胞介导的免疫应答并能与其产生的产物，如抗体，发生反应的物质。术语“免疫调节因子”是指除了抗体以外的能影响免疫系统的物质。术语“组合来源的免疫原”是指通过组合合成的方式在免疫原间产生分子多样性的新方法。术语“生物工程免疫原”是指通过允许可产生具有免疫原性的表位的编码核苷酸的插入的基因克隆技术和遗传操作的方法所获得的免疫原。术语“基因疫苗”是指通常通过重组技术生产的并可引起免疫应答的核酸疫苗。术语“给药”是指对个体给予物质的任何的方法，其包括口服的、鼻内的、眼内的、胃肠外的(静脉内的、肌内的、或皮下的)、直肠的或局部的给药。术语“动物”表示动物界的定义。术语“目标动物”是指具有产卵或产卵产物功能的动物。术语“受体动物”是指对其给药由目标动物产生的卵或卵产物的动物。“T-细胞”或“T-淋巴细胞”是指在胸腺中成熟的，本文档来自技高网...

【技术保护点】
通过对所述动物给药有效量的卵产物来刺激动物中的免疫Ｔ－细胞的方法。

【技术特征摘要】
US 2002-5-16 60/381,570;US 2003-5-15 10/439,1621.通过对所述动物给药有效量的卵产物来刺激动物中的免疫T-细胞的方法。2.如权利要求1所述的方法，其中所述卵产物包括来源于鸟类的卵或卵级分，其中所述的鸟类采用至少一种免疫原进行超免疫。3.如权利要求2所述的方法，其中所述的免疫原选自模仿葡萄球菌；表皮葡萄球菌；脓链球菌；大肠埃希氏菌；肠沙门氏菌；铜绿假单胞菌；肺炎克雷伯氏菌；鼠伤寒沙门氏菌；流感嗜血菌；缓症链球菌；普通变性菌；痢疾志贺氏菌；肺炎双球菌；疮疱棒杆菌；血链球菌；唾液链球菌；变异链球菌；无乳链球菌。4.如权利要求1所述的方法，其中卵产物经口服给药。5.如权利要求1所述的方法，其中卵产物包括全卵的级分。6.如权利要求5所述的方法，其中所述的级分包括大小约是或小于3000道尔顿的级分。7.如权利要求6所述的方法，其中卵产物的有效量在约0.1μg/mL至约2000mg/mL的范围内。8.如权利要求7所述的方法，其中卵产物的有效量在约0.2μg/mL至约200μg/mL的范围内。9.如权利要求8所述的方法，其中卵产物的有效量在约0.5μg/mL至约2...

【专利技术属性】
技术研发人员：S耶尔，R邢，
申请(专利权)人：阿基昂生命科学有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]