聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体、制备方法及抗氧化应用技术

一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体、制备方法及重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体用聚乙二醇修饰前后在抗氧化方面的应用，属于生物技术领域。是采用活化的直链状单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯作为修饰剂，与重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体在4～37℃、pH＝6.0～9.0条件下反应10～60min，加入终止剂甘氨酸终止反应，透析去除副产物，得到突变体；其中，重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体与活化的直链状单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯的用量质量比为1：10～120。经测定其氨基修饰率最高可达98.73％，当氨基修饰率达40％以上时，进入体内后就可完全消除异体蛋白的抗原抗体反应，因此本发明专利技术产物具有消除酶蛋白抗原抗体反应的特性。

【技术实现步骤摘要】
聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体、制备方法及抗氧化应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体、制备方法及重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体用聚乙二醇修饰前后在抗氧化方面的应用。
技术介绍
谷胱甘肽是含硒的谷胱甘肽过氧化物酶GPx1的底物，硒代半胱氨酸SeCys是其催化基团。GPx同超氧化物歧化酶SOD、H2O2酶CAT是生物机体组织中存在的三种重要的抗氧化酶。GPx1是含硒GPx重要的亚型之一，在抗氧化体系中发挥重要作用，可以清除体内H2O2及各类氢过氧化物，阻断活性氧ROS，防止脂质过氧化，治疗由活性氧引起的衰老、白内障、肿瘤及心脑血管等疾病。GPx1不仅能清除ROS，还可以谷胱甘肽GSH为还原剂降解脂质过氧化物，使细胞膜和其他机体生物组织免受过氧化作用的损伤，这种独特的保护作用使其在抗氧化酶体系中具有重要作用，是一种具有广泛市场应用前景的医药用酶。但该酶在常温条件下其巯基易氧化导致酶活力降低、半衰期短及稳定性相对较低，从而限制了其应用。对该酶进行化学修饰，在保持其酶活力同时以提高其生物学稳定性。中国专利20本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体，其结构式如下所示：

【技术特征摘要】
1.一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体，其结构式如下所示：其中GPx1表示重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体，mPEG表示单甲氧基聚乙二醇。2.权利要求1所述的一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体的制备方法，其特征在于：采用活化的直链状单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯作为修饰剂，与重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体在4～37℃、pH＝6.0～9.0条件下反应10～60min，加入终止剂甘氨酸终止反应，透析去除副产物，得到聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体；其中，重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体与活化的直链状单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯的用量质量比为1：10～120。3.如权利要求2所述的一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体的制备方法，其特征在于：重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体与活化的直链状单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丁酸酯的用量质量比为1：60；反应条件为20℃、pH＝8.5条件下反应30min。4.如权利要求2所述的一种聚乙二醇修饰的重组谷胱甘肽过氧化物酶GPx1突变体的制备方法，其特征在于：活化的直链状单甲氧基聚乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏景艳，张广远，宋健，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22