抗LAG-3抗体制造技术

描述了与淋巴细胞活化基因3(LAG‑3)结合的抗体或其抗原结合片段，特别是作为LAG‑3的激动剂的抗体或其抗原结合片段。该抗体与LAG‑3结合并抑制抗原诱导的CD4

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗LAG-3抗体本专利技术涉及结合至淋巴细胞活化基因3(LAG-3)的抗体或其抗原结合片段，特别是作为LAG-3激动剂的抗体或其抗原结合片段，以及涉及所述抗体或片段作为药物的用途，该药物特别是用于治疗与CD4+和/或CD8+T细胞的增殖和/或活化有关的病症、尤其是炎症和自身免疫失调的药物。淋巴细胞活化基因3(LAG-3)是具有四个细胞外Ig超家族结构域的CD4同系物I类膜蛋白。类似于CD4，LAG-3在T细胞表面寡聚体化并且与抗原呈递细胞(APC)上的MHCII类分子结合，但LAG-3具有比CD4高得多的亲和力。LAG-3在活化的CD4阳性和CD8阳性T淋巴细胞上表达，其与细胞表面的CD3-TCR复合物相关并对信号转导进行负调节。因此，其负调节T细胞增殖、功能和内稳态。当通过特异性TCR识别MHCII类肽复合物时，细胞内信号通过TCR在T细胞中转导并通过MHCII类分子在APC中转导。通向T细胞的LAG-3信号传导的负调节作用在初级CD4和CD8人T细胞应答中起作用[etal.,Immunology.2005Jun；115(2):170–178]。LAG-3还编码被转化为可溶形式的LAG-3(sLAG-3)的剪接异构体。作为可溶性分子，LAG-3通过MHCII类信号传导来激活抗原呈递细胞(APC)，导致体内抗原特异性T细胞应答增加(Triebel,TrendsImmunol.,2003,24:619-622)。图1(Huard等人)提供了人和小鼠LAG-3蛋白的氨基酸序列(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,11:5744-5749,1997)。图1下面重复了人LAG-3蛋白的序列(SEQIDNO：27)。人LAG-3的四个细胞外Ig超家族结构域(D1、D2、D3和D4)的氨基酸序列在以下氨基酸残基处：1-149(D1)(SEQIDNO：28)；150-239(D2)(SEQIDNO：29)；240-330(D3)(SEQIDNO：39)；和331-412(D4)(SEQIDNO：51)。Baixeras等人(J.Exp.Med.,1992,Vol.176:327-337)描述了人LAG-3蛋白的小鼠单克隆抗体(同种型IgG1)17B4的产生。所述抗体识别人LAG-3的第一个N-末端D1结构域的30个氨基酸的外环。17B4作为LAG-3信号传导拮抗剂抑制LAG-3/MHC类相互作用并增加T细胞增殖(Huardatal,EurJImmunol.1996；26:1180–6)。17B4mAb不具有激动剂活性，这一点已通过以下事实确定：在不存在二级交联剂的情况下，17B4mAb不能诱导细胞内游离钙升高到T细胞中(Hannieretal,JImmunol.1998；161:4058–65.)。非常需要能够调节CD8阳性和CD4阳性T细胞的活化和/或效应功能的药剂。特别地，已知许多自身免疫性失调涉及自体反应性T细胞和自身抗体。因此，需要能够抑制或消除自体反应性淋巴细胞而不损害免疫系统抵抗病原体的能力的药剂。Poirier等人(ClinicalandExperimentalImmunology,2011,164:265–274)描述了细胞毒性LAG-3嵌合抗体(嵌合A9H12)的评估。在体内，在狒狒的结核菌素诱导的迟发型超敏反应(DTH)模型中，所述抗体消除淋巴结中的LAG-3+激活的T细胞，并且显示出减少皮肤炎症的功效。特异性消除活化的T细胞的抗体提供了预防和/或治疗自身免疫失调的有希望的治疗策略。作为一种替代策略，申请人已经认识到LAG-3激动剂将对T细胞增殖和/或功能进行负调节而不消除T细胞，并且这种激动剂也可以用于治疗炎症或自身免疫失调。申请人已能够生产单克隆抗LAG-3激动剂抗体。这些抗体抑制抗原诱导的CD4阳性和CD8阳性T细胞的增殖。所述抗体及其抗原结合片段可用于治疗免疫失调，特别是T细胞介导的免疫失调，包括炎症和自身免疫失调。根据本专利技术，提供了激动性抗LAG-3抗体或其抗原结合片段。特别地，所述抗体是单克隆激动性抗LAG-3抗体或其抗原结合片段。本申请使用的术语“LAG-3”是指淋巴细胞活化基因-3。术语“LAG-3”包括变体、同种型、同系物、直系同源物和旁系同源物。例如，对人LAG-3蛋白具有特异性的抗体在某些情况下可与来自除人以外的物种的LAG-3蛋白交叉反应。在其他实施例中，对人LAG-3蛋白具有特异性的抗体可以对人LAG-3蛋白有完全特异性，并且可以不显示物种或其他类型的交叉反应性，或可以与来自某些其他物种但不是所有其他物种的LAG-3交叉反应(例如，与猴LAG-3交叉反应，但不与小鼠LAG-3交叉反应)。术语“人LAG-3”是指人序列LAG-3，例如具有Genbank登记号NP002277的人LAG-3的完整氨基酸序列(SEQIDNO：38)，或图1中给出的人LAG-3蛋白的氨基酸序列(SEQIDNO：27)。术语“小鼠LAG-3”是指小鼠序列LAG-3，例如具有Genbank登记号NP_032505的小鼠LAG-3的完整氨基酸序列。LAG-3在本领域中也被称为例如CD223。人LAG-3序列可以与Genbank登记号NP_002277的人LAG-3不同，例如人LAG-3序列在非保守区中具有保守的突变或突变，并且LAG-3具有与Genbank登记号NP_002277的人LAG-3基本相同的生物学功能。例如，人LAG-3的生物学功能为：在本申请所述抗体特异性结合的LAG-3的胞外结构域中具有表位，或人LAG-3的生物学功能为可以与MHCII类分子结合。术语“猴LAG-3”旨在包括旧世界和新世界猴表达的LAG-3蛋白，包括但不限于食蟹猴LAG-3和恒河猴LAG-3。猴LAG-3的代表性氨基酸序列是也以Genbank登记号XM_001108923保藏的恒河猴LAG-3氨基酸序列。猴LAG-3的另一代表性氨基酸序列是如US2011/0150892A1中所述的克隆pa23-5的替代性恒河猴序列。与Genbank保藏序列相比，所述替代性恒河猴序列在419位显示出单个氨基酸差异。特定的人LAG-3序列通常与Genbank登记号NP_002277的人LAG-3的氨基酸序列具有至少90％的同一性，并且含有当与其他物种(例如小鼠)的LAG-3氨基酸序列比较时将其氨基酸序列鉴定为人的氨基酸残基。在某些情况下，人LAG-3与Genbank登记号NP_002277的LAG-3的氨基酸序列可以具有至少95％的同一性，或甚至至少96％、97％、98％或99％的同一性。在某些实施例中，人LAG-3序列将显示与Genbank登记号NP_002277的LAG-3序列不大于10个氨基酸的差异。在某些实施例中，人LAG-3可显示与Genbank登记号NP_002277的LAG-3序列不大于5个，或甚至不大于4、3、2或1个氨基酸的差异。同一性百分比可以如本文所述的那样进行确定。根据一些实施例，本专利技术的激动性抗LAG-3抗体，或其抗原结合片段，抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞增殖或抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞活化。本专利技术的激动性抗LAG-3抗体或其抗原结合片段可以是分离的激动性抗LA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段与淋巴细胞活化基因3(LAG‑3)结合，并抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞增殖，或抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞活化。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.02 GB 1515572.4;2016.07.18 GB 1612437.21.分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段与淋巴细胞活化基因3(LAG-3)结合，并抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞增殖，或抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞活化。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段抑制抗原诱导的CD4+和抗原诱导的CD8+T细胞增殖。3.根据权利要求1或2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段对抗原诱导的CD8+T细胞增殖的抑制作用大于对抗原诱导的CD4+T细胞增殖的抑制作用。4.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，对抗原诱导的CD8+T细胞增殖的所述抑制是LAG-3依赖性的，且是IL-2非依赖性的。5.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞增殖，并抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞活化。6.一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段与淋巴细胞活化基因3(LAG-3)结合并抑制抗原诱导的CD4+和/或CD8+T细胞活化。7.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段与LAG-3结合的亲和力高于单克隆抗体17B4。8.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段抑制LAG-3或IMP321与MHCII类阳性细胞的结合。9.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段抑制LAG-3诱导的抗原呈递细胞(APC)的活化或IMP321诱导的单核细胞的活化。10.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段与LAG-3的表位结合，所述LAG-3的表位与LAG-3的MHCII类结合位点重叠。11.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体重链可变(VH)区的一个、两个或三个互补决定区(CDR)和/或抗体轻链可变(VL)区的一个、两个或三个CDR，所述抗体重链可变区含有氨基酸序列SEQIDNO：7，所述抗体轻链可变区含有氨基酸序列SEQIDNO：8。12.根据权利要求11所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR选自氨基酸序列SEQIDNO：1、2、3、21、22和23的CDR，且所述抗体VL区的CDR选自氨基酸序列SEQIDNO：4、5、6、24、25和26的CDR。13.根据权利要求11或12所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或片段包含抗体VH区，所述抗体VH区含有VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，其中所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：1和21的氨基酸序列，和/或所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：2和22的氨基酸序列，和/或所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：3和23的氨基酸序列。14.根据权利要求13所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：1和21的氨基酸序列，并且所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：2和22的氨基酸序列；所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：1和21的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：3和23的氨基酸序列；所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：2和22的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：3和23的氨基酸序列；或所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：1和21的氨基酸序列，所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：2和22的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：3和23的氨基酸序列。15.根据权利要求11-14任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，其中，所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列，和/或所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列，和/或所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列。16.根据权利要求15所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列，并且所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列；所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列；所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列；或所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列，所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列。17.根据权利要求13至16中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：1和21的氨基酸序列，所述VHCDR2具有选自SEQIDNo：2和22的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：3和23的氨基酸序列；和/或所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列，所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列。18.根据权利要求11至17中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：1、2和3的CDR，且所述抗体VL区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：4、5和6的CDR。19.根据权利要求11至17中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：21、22和23的CDR，且所述抗体VL区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：24、25和26的CDR。20.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区具有含有SEQIDNO：1、2和3的氨基酸序列的CDR，所述VL区具有含有SEQIDNO：4、5和6的氨基酸序列的CDR。21.根据权利要求1至19中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区具有含有SEQIDNO：21、22和23的氨基酸序列的CDR，所述VL区具有含有SEQIDNO：24、25和26的氨基酸序列的CDR。22.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有：(a)VHCDR1区，其含有SEQIDNO：1或与SEQIDNO：1相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，其含有SEQIDNO：2或与SEQIDNO：2相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VHCDR3区，其含有SEQIDNO：3或与SEQIDNO：3相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；所述轻链可变区含有：(a)VLCDR1区，其含有SEQIDNO：4或与SEQIDNO：4相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VLCDR2区，其含有SEQIDNO：5或与SEQIDNO：5相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VLCDR3区，其含有SEQIDNO：6或与SEQIDNO：6相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列。23.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有：(a)VHCDR1区，其含有SEQIDNO：21或与SEQIDNO：21相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，其含有SEQIDNO：22或与SEQIDNO：22相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VHCDR3区，其含有SEQIDNO：23或与SEQIDNO：23相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；所述轻链可变区含有：(a)VLCDR1区，其含有SEQIDNO：24或与SEQIDNO：24相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VLCDR2区，其含有SEQIDNO：25或与SEQIDNO：25相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VLCDR3区，其含有SEQIDNO：26或与SEQIDNO：26相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列。24.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区包含氨基酸序列SEQIDNO：7或与氨基酸序列SEQIDNO：7至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含氨基酸序列SEQIDNO：8或与氨基酸序列SEQIDNO：8至少60％相同的氨基酸序列。25.根据前述权利要求24所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含与氨基酸序列SEQIDNO：7至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含与氨基酸序列SEQIDNO：8至少60％相同的氨基酸序列。26.根据前述权利要求24所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含与氨基酸序列SEQIDNO：7具至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含氨基酸序列SEQIDNO：8。27.根据前述权利要求24所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含氨基酸序列SEQIDNO：7，所述抗体VL区包含与氨基酸序列SEQIDNO：8至少60％相同的氨基酸序列。28.根据权利要求24所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区含有氨基酸序列SEQIDNO：7，所述VL区含有氨基酸序列SEQIDNO：8。29.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区的一个、两个或三个CDR和/或抗体VL区的一个、两个或三个CDR，所述抗体VH区含有氨基酸序列SEQIDNO：17，所述抗体VL区含有氨基酸序列SEQIDNO：18。30.根据权利要求29所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR选自氨基酸序列SEQIDNO：11、12、13、31、32和33的CDR，且所述抗体VL区的CDR选自氨基酸序列SEQIDNO：14、15、16、34、35和36的CDR。31.根据权利要求29或30所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区，所述抗体VH区含有VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，其中，所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：11和31的氨基酸序列，和/或所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：12和32的氨基酸序列，和/或所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：13和33的氨基酸序列。32.根据权利要求31所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：11和31的氨基酸序列，并且所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：12和32的氨基酸序列；所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：11和31的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：13和33的氨基酸序列；所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：12和32的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：13和33的氨基酸序列；或所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：11和31的氨基酸序列，所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：12和32的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：13和33的氨基酸序列。33.根据权利要求29-32中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，其中，所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列，和/或所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列，和/或VLCDR3具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列。34.根据权利要求33所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列，并且所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列；所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列；所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列；或所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列，所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列。35.根据权利要求31至34中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述VHCDR1具有选自SEQIDNO：11和31的氨基酸序列，所述VHCDR2具有选自SEQIDNO：12和32的氨基酸序列，并且所述VHCDR3具有选自SEQIDNO：13和33的氨基酸序列；和/或所述VLCDR1具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列，所述VLCDR2具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列，并且所述VLCDR3具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列。36.根据权利要求29至35中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：11、12和13的CDR，且所述抗体VL区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：14、15和16的CDR。37.根据权利要求29至35中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体VH区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：31、32和33的CDR，且所述抗体VL区的CDR为氨基酸序列SEQIDNO：34、35和36的CDR。38.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区具有含有SEQIDNO：11、12和13的氨基酸序列的CDR，所述抗体VL区具有含有SEQIDNO：14、15和16的氨基酸序列的CDR。39.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区具有含有SEQIDNO：31、32和33的氨基酸序列的CDR，所述VL区具有含有SEQIDNO：34、35和36的氨基酸序列的CDR。40.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有：(a)VHCDR1区，其含有SEQIDNO：11或与SEQIDNO：11相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，其含有SEQIDNO：12或与SEQIDNO：12相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)CDR3区，其含有SEQIDNO：13或与SEQIDNO：13相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；所述轻链可变区含有：(a)VLCDR1区，其含有SEQIDNO：14或与SEQIDNO：14相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VLCDR2区，其含有SEQIDNO：15或与SEQIDNO：15相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VLCDR3区，其含有SEQIDNO：16或与SEQIDNO：16相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列。41.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有：(a)VHCDR1区，其含有SEQIDNO：31或与SEQIDNO：31相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VHCDR2区，其含有SEQIDNO：32或与SEQIDNO：32相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)CDR3区，其含有SEQIDNO：33或与SEQIDNO：33相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；所述轻链可变区含有：(a)VLCDR1区，其含有SEQIDNO：34或与SEQIDNO：34相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；(b)VLCDR2区，其含有SEQIDNO：35或与SEQIDNO：35相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列；以及(c)VLCDR3区，其含有SEQIDNO：36或与SEQIDNO：36相比具有1、2、3、4或5个氨基酸取代、删除或添加的氨基酸序列。42.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和/或抗体VL区，所述抗体VH区包含氨基酸序列SEQIDNO：17或与氨基酸序列SEQIDNO：17至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含氨基酸序列SEQIDNO：18或与氨基酸序列SEQIDNO：18至少60％相同的氨基酸序列。43.根据权利要求42所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含与氨基酸序列SEQIDNO：17至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含与氨基酸序列SEQIDNO：18至少60％相同的氨基酸序列。44.根据权利要求42所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含与氨基酸序列SEQIDNO：17至少60％相同的氨基酸序列，所述抗体VL区包含氨基酸序列SEQIDNO：18。45.根据权利要求42所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区包含氨基酸序列SEQIDNO：17，所述抗体VL区包含与氨基酸序列SEQIDNO：18至少60％相同的氨基酸序列。46.根据权利要求42所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VH区和抗体VL区，所述抗体VH区含有氨基酸序列SEQIDNO：17，所述VL区含有氨基酸序列SEQIDNO：18。47.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段是人源化单克隆抗体或其抗原结合片段。48.根据前述权利要求中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含人源化轻链框架区。49.根据权利要求48所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述人源化轻链构架区包含具有表27中VL1、VL2、VL3或VL4所示的任何氨基酸取代的氨基酸序列。50.根据权利要求48或49所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述人源化轻链框架区包含SEQIDNO：68至83中任一个的氨基酸序列。51.根据权利要求50所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含：SEQIDNO：68的VL框架区1(VLFR1)；SEQIDNO：69的VLFR2；SEQIDNO：70的VLFR3；和SEQIDNO：71的VLFR4；SEQIDNO：72的VL框架区1(VLFR1)；SEQIDNO：73的VLFR2；SEQIDNO：74的VLFR3；和SEQIDNO：75的VLFR4；SEQIDNO：76的VL框架区1(VLFR1)；SEQIDNO：77的VLFR2；SEQIDNO：78的VLFR3；和SEQIDNO：79的VLFR4；或SEQIDNO：80的VL框架区1(VLFR1)；SEQIDNO：81的VLFR2；SEQIDNO：82的VLFR3；和SEQIDNO：83的VHFR4。52.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：68；VLCDR1，其具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：69；VLCDR2，其具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：70；VLCDR3，其具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：71。53.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：68；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：4；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：69；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：5；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：70；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：6；和VHFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：71。54.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：68；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：24；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：69；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：25；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：70；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：26；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：71。55.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：72；VLCDR1，其具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：73；VLCDR2，其具有选自SEQIDNO：5和25氨基酸序列；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：74；VLCDR3，其具有选自SEQIDNo：6和26的氨基酸序列；和VHFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：75。56.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：72；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：4；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：73；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：5；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：74；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：6；和VHFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：75。57.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：72；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：24；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：73；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：25；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：74；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：26；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：75。58.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：76；VLCDR1，其具有选自SEQIDNo：4和24的氨基酸序列；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：77；VLCDR2，其具有选自SEQIDNo：5和25的氨基酸序列；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：78；VLCDR3，其具有选自SEQIDNo：6和26的氨基酸序列；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：79。59.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：76；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：4；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：77；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：5；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：78；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：6；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：79。60.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：76；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：24；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：77；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：25；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：78；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：26；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：79。61.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：80；VLCDR1，其具有选自SEQIDNO：4和24的氨基酸序列；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：81；VLCDR2，其具有选自SEQIDNO：5和25的氨基酸序列；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：82；VLCDR3，其具有选自SEQIDNO：6和26的氨基酸序列；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：83。62.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：80；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：4；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：81；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：5；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：82；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：6；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：83。63.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：80；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：24；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：81；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：25；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：82；VLCDR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：26；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：83。64.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：68；VLCDR1，其具有选自SEQIDNO：14和34的氨基酸序列；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：69；VLCDR2，其具有选自SEQIDNO：15和35的氨基酸序列；VLFR3，其具有氨基酸序列SEQIDNO：70；VLCDR3，其具有选自SEQIDNO：16和36的氨基酸序列；和VLFR4，其具有氨基酸序列SEQIDNO：71。65.根据前述权利要求48至51中任一项所述的分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或片段包含抗体VL区，所述抗体VL区含有：VLFR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：68；VLCDR1，其具有氨基酸序列SEQIDNO：14；VLFR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：69；VLCDR2，其具有氨基酸序列SEQIDNO：15；V...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗雷德里克·特里贝尔，克里斯泰勒·布里尼奥内，
申请(专利权)人：伊缪泰普有限公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR