【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及线粒体通透性转换孔大小测量,确切说是线粒体通透性转换孔大小的数学模式测定方法。
技术介绍
线粒体膜(特别是线粒体内膜)通常具有严格的紧闭性,仅限于质子等透过,对分子量大于1500Da的分子不具有通透性。在缺血、缺氧等应激条件下,线粒体膜通透性发生病理改变,形成的病理孔道,允许分子量大于1500Da的物质自由通过线粒体内外膜,进入线粒体内。该变化被称为线粒体通透性转换,内外膜之间形成的孔道被称为线粒体通透性转换孑L (mitochondrial permeability transition pore, mPTP)。目前尚不清楚 mPTP 的具体结构和组成,现有的技术手段很难测量其大小,只是应用形态学及分子生物学的方法, 使用分光光度仪分别测量应激处理前后的线粒体悬浮液的吸光度,通过比较两者的吸光度似否有统计学差异,从而判断mPTP似否形成。但是,该方法不能定量描述mPTP大小,揭示 mPTP开放的具体情况,所以有必要深入研究和开发mPTP大小测量的方法和技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于找到一种方法,使得采用目前实验室测量mPTP的分光光度仪就能够方便、准确,定量测量mPTP的大小,从而解决目前mPTP大小无法定量测量的问题。本专利技术解决mPTP定量测量的技术方案是mPTP形成后,大分子物质进入线粒体内,由于渗透作用,液体进入线粒体,从而引起线粒体膨胀。线粒体膨胀后,透光度增加造成光密度下降,OD值降低。根据上述分析建立方程如下dV权利要求1. 一种线粒体通透性转换孔大小的数学模式测定法,包括数学模型的建立、测试所用的封堵溶液和测试溶 ...
【技术保护点】
1.一种线粒体通透性转换孔大小的数学模式测定法,包括数学模型的建立、测试所用的封堵溶液和测试溶液液配方以及根据该数学模型建立的t1/2参数计算表,具体内容如下数学模型:等式左边表示线粒体体积变化率,kp表示体积变化速率常数,VT表示线粒体膨胀所能达到的最大体积,Vt表示t时刻线粒体体积。方程①整体表示:线粒体体积变化率与线粒体体积变化能(VT-Vt)成正比。封堵溶液及测试溶液配方表:表1实验溶液配方表溶液名称 成份封堵溶液 0.25M Dextran6000、5mM Tris-Mops pH=7.4、0.2mM EGTA-Tris、10μM Rotenone测试溶液 0.25M Sucrose、5mM Tris-Mops pH=7.4、0.2mM EGTA-Tris、10μM Rotenonet1/2参数计算表:表2 t1/2计算表注:AT=A30
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:陈东,李立环,
申请(专利权)人:中国医学科学院阜外心血管病医院,
类型:发明
国别省市:11
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