用于生产共轭亚油酸的副干酪乳杆菌、含有其的营养制剂和药物制剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够将亚油酸转化成共轭亚油酸的属于副干酪乳杆菌种的新菌株。本发明专利技术还涉及包含副干酪乳杆菌菌株的营养或食品制剂和/或药物组合物，其用于治疗和/或预防与共轭亚油酸缺乏相关的病理和/或生理状态中，或者用于在使用益生菌是有益的情况中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生产共轭亚油酸的副干酪乳杆菌、含有其的营养制剂和药物制剂及其用途
技术介绍
本专利技术涉及能够将亚油酸(LA)转化成共轭亚油酸(CLA)的属于副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)菌种的新菌株(称为LMGS-26420)，其用于治疗和预防与共轭亚油酸缺乏相关的疾病和/或生理状态或用于推荐使用益生菌的情况中、本专利技术还涉及获得它的方法以及含有它的药物或营养组合物。副干酪乳杆菌菌株LMGS-26420也可用于治疗和预防其中摄入益生菌是有益的所有疾患，例如恢复和维持肠道细菌菌群平衡。术语CLA是指亚油酸(LA)的位置和几何异构体的混合物，其中双键在各种位置共轭，从而产生顺式和反式异构体。至少16种CLA异构体是已知的，主要生物学感兴趣的异构体是异构体c9-t11和t9-t11。异构体c9-t11是膳食中的主要异构体，并且已被证明是重要的，因为它涉及许多生物学过程，并被掺入到进食CLA异构体混合物的动物的组织的磷脂部分中。人机体中基本上不涉及CLA的产生，因此其供应依赖于乳制品和饮食中肉类的摄取或含有益生菌的补充剂。反刍动物生产的食品是人类主要的CLA来源。它们是亚油酸生物氢化作用的中间体，人们普遍认为反刍动物中的CLA来源于瘤胃细菌对亚油酸不饱和酸的不完全生物氢化作用。CLA通过具有牛奶、鱼、肉类和乳制品的饮食而被引入生物体中，其有益效果与约3g/天的日常摄入(assumption)水平相关。不平衡的饮食给出了0.35g/天的平均CLA摄入，考虑到其对机体的有益作用，这种缺乏必须通过摄入将LA转化成CLA的益生菌来补偿以提供有用的剂量。共轭亚油酸的生物学活性主要归因于异构体c9-t11和t10-c12的作用；与抗癌作用相关的主要生物学活性归因于异构体c9-t11，而异构体t10-c12参与人体的脂质代谢。CLA具有重要的生物学性质，对人和动物健康有用，如，例如，在肠道炎性病理、腹泻和结肠炎症中、在增加体质量、在增加生热、在氧化应激保护、在肿瘤预防、在自身免疫性疾病、炎性疾病、糖尿病和动脉粥样硬化中是有用的。EckerJ.等人在Biochem.Bioph.Res.Comm.388,2009,660-666中报告异构体c9-t11激活参与动脉粥样硬化发生和进展的靶基因LXR。OgawaJ.等人在Appl.Env.Microbiol2001,67,1246中描述了在微需氧的条件下由乳杆菌，嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)从亚油酸生产特定的CLA异构体，推定羟基酸10-羟基-顺-12-十八烷酸(octadecanoid)是该转化的中间体，转换涉及多于一个步骤。OgawaJ.等人在J.BioscienceBioeng.100(4),355(2005)中报告了由双歧杆菌和乳杆菌将LA转化成CLA，获得异构体混合物。当使用双歧杆菌时，CLA异构体的产量在每升培养物约3至约400mg变化，而当使用乳杆菌时，产量在每升培养物约100mg至约4g变化。当使用干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)时，每升培养物的产量不会超过1克。Rosberg-CodyE.等人在Appl.Env,Microbiol70(8)4635,2004中描述了从新生儿粪便材料中分离双歧杆菌菌株，可用于生产CLA，并建议将这些细菌用于具有坏死性小肠结肠炎危险的新生儿的补充剂中。还有CoakleyM.等人在J.Appl.Microbiol.94,138(2003)中描述了乳杆菌、乳球菌和双歧杆菌将LA转化成CLA的能力，并且证明双歧杆菌菌株具有更高的将LA转化成CLA的能力，转化百分比高达几乎65％。AlonsoL.等人在JDiarySci.86,1941(2003)中描述了在添加有不同浓度的亚油酸的培养基中由人肠来源的干酪乳杆菌和嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)将LA转化成CLA。在0.02％的亚油酸浓度下，用干酪乳杆菌获得的最大CLA浓度为每升培养物约110mg，并且生物感兴趣的异构体c9-t11的量在每升培养物60至85mg的范围内。GustavoA.等人在Biosci.Biotechnol.Biochem.,77(3),648-650,2013中描述了一种快速和简单的方法筛选从牛奶分离的生产共轭亚油酸(CLA)的细菌。一种类似副干酪乳杆菌的菌株以大于85％的百分比将游离亚油酸转化成总CLA。然而，生物感兴趣的CLA异构体c9、t11的转化率百分比只有约18％。OguzGursoy等人在InternationalJournalofFoodSciencesandNutrition,63(5),610-615中描述了使用不同的益生菌培养物对奶酪的共轭亚油酸浓度和脂肪酸组成的影响。他们报告，益生菌的差异和储存过程在统计学上不影响样品的CLA含量。乳酪样品中CLA含量的增加是由于乳酸菌对游离亚油酸的脂解作用。包含乳杆菌的益生菌产品的摄入对于维持肠道细菌菌群平衡也是有用的，并且一般来说其是预防和治疗生态失调的有用工具，其中双歧杆菌和乳杆菌之间的平衡是重要的。考虑到饮食中引入的CLA的量少，以及与CLA缺乏相关的所有病理和疾患中有用的剂量，需要有可用的将LA转化成CLA的细菌，以获得对于个体健康和治疗所有病理有用的每日剂量，其中CLA异构体是有益的。双歧杆菌将LA转化成CLA，但双歧杆菌培养物具有生产率低的缺点，意味着每升培养物中许多细菌，因此在工业规模的生产过程中不容易大量获得它们。因此，需要有能够将LA转化成CLA的细菌菌株，其可通过细菌培养物以高产量获得CLA，以用于在治疗或预防与CLA缺乏相关的所有疾患和病理中有用的药物或营养制剂。还需要有属于乳杆菌属的细菌菌株，其能够将LA转化成对人或动物有益的CLA异构体。此外，还需要有针对与身体表面上微生物失衡相关的所有疾患或病理的乳杆菌。属于乳酸菌属的菌株可以与双歧杆菌属的细菌一起摄入以促进人或动物菌群的微生物平衡。属于乳杆菌属的细菌属于具有最高产量的细菌，因此其优于属于将LA转化成CLA的双歧杆菌属的那些细菌。乳杆菌可以通过工业方法以比双歧杆菌更高的产率获得，并且可以用于生产在人或动物中用于施用的营养组合物或药物组合物。其中，优选能够比其它异构体更大程度地将LA转化成CLA的异构体c9-t11和t9-t11的乳杆菌。c9-t11是主要的异构体，因为它包括在细胞膜磷脂中，是膳食中的主要异构体。这些异构体对人类和动物有益，特别是异构体t9-t11具有抗增殖和抗癌性质。EckerJ等人在Biochem.Biophysical.Res.Comm.388,660,2009中报告CLA的异构体t9-t11是与炎症诱导过程相关的巨噬细胞LXR的强效激动剂，并且在减少动物模型的动脉硬化过程中具有重要作用。本专利技术描述属于乳杆菌属的菌株，命名为副干酪乳杆菌LMGS-26420，其能够将LA转化成CLA，转化百分比高于本领域已知的其它乳杆菌菌株。此外，本专利技术的菌株LMGS-26420的特征在于将LA转化成CLA，其中异构体c9-t11和t10-c12的混合物与其它异构体相比更为普遍。菌株通过特征在于每升培养物的产量高于4g的细菌培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种属于副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)菌种的细菌菌株，其在微生物保藏中心BCCM/LMG细菌收集‑微生物实验室‑根特大学提交，注册编号LMG S‑26420，其特征在于其以高于30％的百分比将亚油酸转化成共轭亚油酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.07 IT 1020150000312421.一种属于副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)菌种的细菌菌株，其在微生物保藏中心BCCM/LMG细菌收集-微生物实验室-根特大学提交，注册编号LMGS-26420，其特征在于其以高于30％的百分比将亚油酸转化成共轭亚油酸。2.根据权利要求1所述的副干酪乳杆菌细菌菌株LMGS-26420，其特征在于其将亚油酸转化成共轭亚油酸具有生物学活性的异构体c9-t11和t9-t11，其中如果与其它异构体相比其总和的百分比高于30％。3.一种生产如权利要求1所述的副干酪乳杆菌菌株LMGS-26420的方法，其特征在于以下步骤：-以0.1至10％的体积百分比用副干酪乳杆菌菌株LMGS-26420接种在适当的培养基中，在30℃至37℃的温度下、在4.5至7.5的pH值下、持续6至15小时的时间；-通过离心从培养物肉汤中分离细菌生物质；-将生物质在低于0℃的温度下储存，或冻干。4.根据权利要求3所述的用于生产副干酪乳杆菌细菌菌株LMGS-26420的方法，其包括在选自可溶性碳水化合物的冷冻保护剂的存在下的冻干步骤。5.根据权利要求4所述的方法，其用于在海藻糖存在下生产冻干副干酪乳杆菌细菌菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·C·维斯科米，A·斯福尔齐尼，P·曼吉诺，M·埃莉，
申请(专利权)人：阿尔法西格玛有限公司，
类型：发明
国别省市：意大利,IT