转氨酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。具有上述至少一个突变位点的转氨酶突变体，其酶活性和/或稳定性大大提高。

Transaminase mutant and its application

The invention discloses a transaminase mutant and its application. The amino acid sequence of the transaminase mutant is a sequence of amino acid mutations in the amino acid sequence shown by SEQ ID NO:1. The mutant amino acid loci are selected from one or more of F89, K193, P243, V234, I262, Q280, V379, R416, A417, and A417. The aminotransferase mutant with at least one mutation site at the above stage has greatly improved its enzyme activity and / or stability.

【技术实现步骤摘要】
转氨酶突变体及其应用
本专利技术涉及酶工程领域，具体而言，涉及一种转氨酶突变体及其应用。
技术介绍
酶作为生物催化剂，在生物体内能充分发挥其高效和高特异性的特点。但是在工业应用中，却普遍存在无法适应工业生产条件以及对非天然底物的催化能力低等问题。定点突变和饱和突变技术是酶分子进行改造的有效手段。定点突变(site-directedmutagenesis或site-specificmutagenesis)是指在目的DNA片段的指定位点上引入特定的碱基对的方法。通过改变基因特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列，常用于研究某个(些)氨基酸残基对蛋白质结构和功能的影响。在酶的理性设计中，采用定点突变方法可筛选得到催化活性、底物特异性和/或稳定性提高的突变酶。饱和突变是通过对目的蛋白的编码基因进行改造，短时间内获取靶位点氨基酸分别被其它19种氨基酸替代的突变体的一种方法。此方法不仅是蛋白质定向改造的强有力工具，而且是蛋白质结构－功能关系研究的重要手段。饱和突变往往能获得比单点突变更为理想的进化体。而对于定点突变方法不能解决的这些问题，恰恰是饱和突变方法所擅长的独特之处。ω－转氨酶(ω－T本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示序列发生突变的氨基酸序列，所述突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。

【技术特征摘要】
1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQIDNO：1所示序列发生突变的氨基酸序列，所述突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。2.根据权利要求1所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述突变的氨基酸位点发生的突变包括如下任意一种或多种：P243E、F89Y/W、K193E、V234I、I262V、Q280K、V379L/M/T、R416A/C/H/Q/T/S、A417S及C418A/Q/S，其中，“/”表示“或”。3.根据权利要求1或2所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述突变包括如下任意一种组合包括：V379L/M/T+F89Y/W、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S、V379L/M/T+A417S、V379L/M/T+C418A/Q/S、V379L/M/T+P243E、V379L/M/T+K193E、V379L/M/T+V234I、V379L/M/T+I262V、V379L/M/T+Q280K、R416A/C/H/Q/T/S+A417S、R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S、R416A/C/H/Q/T/S+F89Y/W、R416A/C/H/Q/T/S+A417S+F89Y/W、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+F89Y/W、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+A417S、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+K193E、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+V234I、V379L/M/T+C418A/Q/S+F89Y/W、V379L/M/T+C418A/Q/S+P243E、V379L/M/T+C418A/Q/S+I262V、V379L/M/T+A417S+Q280K、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+F89Y/W、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+Q280K、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+F89Y/W+Q280K、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+F89Y/W+Q280K+I262V、V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+F89Y/W+Q280K+A417S以及V379L/M/T+R416A/C/H/Q/T/S+C418A/Q/S+F89Y/W+Q280K+I262V+V234I。4.一种DNA分子，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪浩，詹姆斯·盖吉，卢江平，徐幸福，于文燕，黄鑫，马玉磊，程逸冰，
申请(专利权)人：凯莱英生命科学技术天津有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12