一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体的制备及其应用制造技术
Preparation and application of a cyclodextrin glucosyl transferase mutant
The invention relates to the preparation and application of a cyclodextrin glucosyl transferase mutant, belonging to the field of genetic engineering and enzyme engineering. The invention has a mutation on the amino acid of cyclodextrin glucotransferase, and the enzyme activity of the mutant can reach 2.5 times of the wild enzyme, and the mutation of the cyclodextrin glucotransferase is simple and suitable for industrial production.
【技术实现步骤摘要】
一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体的制备及其应用
本专利技术涉及一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体的制备及其应用，属于基因工程和酶工程领域。
技术介绍
维生素C(VC)是一种人体自身不能合成的水溶性维生素，参与体内很多的生理活动，如促进胆固醇转变为胆汁酸，促进肾上腺皮质激素的合成，参与芳香氨基酸的代谢，促进铁的吸收及参与体内多种氧化还原反应，在维持和促进人体健康中扮演着重要的角色。另外，维生素C还能促进胶原蛋白的合成，还原已形成的黑色素，对保持皮肤弹性、美白、除皱有一定的作用。广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。但是VC二位碳的羟基极不稳定，非常容易氧化降解而限制了其应用。2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸(AA-2G)是一种维生素C的糖类衍生物，是最稳定、性能最佳的VC替代品，近些年主要作为一种美白添加剂应用于多种品牌的高端化妆品中。目前，AA-2G主要通过糖基转移酶生物催化生成，其中环糊精葡萄糖基转移酶是最常用的催化酶。现有技术针对环糊精葡萄糖基转移酶的基因改造和高效表达研究较多，但是实现环糊精葡萄糖基转移酶在工业化生产中仍存在很大的问题，例如酶产量较低，催化制备A...
【技术保护点】
一种环糊精葡萄糖基转移酶的突变体，其特征在于，所示突变体是将氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的一个或两个氨基酸位点进行突变。
【技术特征摘要】
1.一种环糊精葡萄糖基转移酶的突变体，其特征在于，所示突变体是将氨基酸序列为SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的一个或两个氨基酸位点进行突变。2.根据权利要求1所述突变体，其特征在于，所述突变体是将氨基酸序列为SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第124位的赖氨酸(Lys)、450位的甘氨酸(Gly)、465位的异亮氨酸(Ile)、641位的异亮氨酸(Ile)、647位的赖氨酸(Lys)或631位的异亮氨酸(Ile)中的一个或者两个位点进行突变。3.根据权利要求1所述突变体，其特征在于，所述突变体为以下(a)～(i)：(a)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第124位的赖氨酸(Lys)突变为谷氨酸(Glu)，突变体命名为K124E；(b)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第450位的甘氨酸(Gly)突变为丝氨酸(Ser)，突变体命名为G450S；(c)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第465位的异亮氨酸(Ile)突变为苯丙氨酸(Phe)，突变体命名为I465F；(d)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第641位的异亮氨酸(Ile)突变为苏氨酸(Thr)，突变体命名为I641T；(e)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第647位的赖氨酸(Lys)突变为谷氨酸(Glu)，突变体命名为K647E；(f)将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第631位的异亮氨酸(Ile)突变为苏氨酸(Thr)，突变体命名为I631...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，宿玲恰，陶秀梅，王昱升，董俊辰，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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