鼠李糖乳杆菌、鼠李糖乳杆菌制剂及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种鼠李糖乳杆菌，菌株(Lactobacillus rhamnosus)LR863，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14410。本发明专利技术的鼠李糖乳杆菌具有对变异链球菌、戈登链球菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌、伴放线放线杆菌等口腔病原微生物显著的抑菌、杀菌作用，减少牙菌斑形成和降低龋齿、牙周炎等口腔疾病发生、发展的功效。本发明专利技术的鼠李糖乳杆菌制剂可包括鼠李糖乳杆菌活菌菌体、鼠李糖乳杆菌死菌菌体、鼠李糖乳杆菌的代谢产物及胞内提取物，是一款应用广泛、效果显著的口腔益生菌制剂，可用作广泛液态食品、固态食品、胶状食品、口腔清洁用品和口腔治疗药品的添加剂。

Lactobacillus Rhamnus, Lactobacillus rhamnophilus preparations and their uses

The invention discloses a Lactobacillus Rhamnus, strain (Lactobacillus rhamnosus) LR863, preserved in the general microorganism center of the Chinese microbe preservation management committee, and the preservation is numbered as CGMCC No.14410. The Lactobacillus rhamnose has significant bacteriostasis and bactericidal effect on Streptococcus mutans, Streptococcus Gordon, porphyromoninomonas gingivalis, Clostridium nucleophilus, Actinobacillus Actinobacillus and other oral pathogens, reducing dental plaque formation and reducing dental diseases such as dental caries and periodontitis. The Lactobacillus rhamnose preparation of this invention can include Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rhamnosus metabolites and intracellular extracts. It is a widely used and significant oral probiotic preparation, which can be used as a widely liquid food, solid food, gelatinous food, and oral cavity. Additives for cleaning and oral medicine.

【技术实现步骤摘要】
鼠李糖乳杆菌、鼠李糖乳杆菌制剂及其用途
本专利技术涉及微生物领域，尤其涉及一种鼠李糖乳杆菌，以及鼠李糖乳杆菌制剂，还涉及该制剂的用途。
技术介绍
口腔内微生物群由700种微生物构成，存在多种病原微生物，临床常见的口腔疾病如龋齿、牙周炎和口臭等，都与致病菌或对口腔健康不利的微生物在口腔中的过量生长有关。目前预防和治疗口腔疾病多从减少变异链球菌发挥作用的角度出发，如通过使用漱口水、减少糖摄入等方式减少变异链球菌的数量，或通过机械去除牙菌斑等手段。益生菌(Probiotics)是一类对宿主有益的活性微生物的总称，能产生确切的健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用，因此，人们尝试使用益生菌来改善口腔环境达到防治口腔疾病的效果。益生菌有许多令人惊奇的功效，但这些不同的功效高度依赖于“菌株的特定性”，通过大量和长期的临床研究证实，某个特定的益生菌株具有某种明确的功能但并不意味着其他同种益生菌的不同菌株也必定有同样或相似的功能，如瑞卡福抑菌喷剂能帮助修复因致病菌感染造成的生殖系统疾病，但并不能说明任何其他的同类菌株产品也有同样的功效。而且国际上对益生菌的定义通常是活的、有足够数量并对宿主有益的微生物菌种才能称之为益生菌，因此使用益生菌达到防治口腔疾病的目的，需使益生菌在口腔环境下能维持活性并具有足够数量，否则无法达到有益效果。
技术实现思路
为解决现有技术存在的不足，本专利技术提供了一种鼠李糖乳杆菌，该鼠李糖乳杆菌的活菌和死菌都具有抑制口腔致病微生物生长、杀灭口腔致病微生物的用途，能够防治牙周炎、龋齿等口腔疾病。为实现上述目的，本专利技术提供的鼠李糖乳杆菌，菌株(Lactobacillusrhamnosus)LR863，已于2017年7月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.14410。根据菌株的菌落、菌体形态特征、16SrRNA序列分析及API细菌鉴定系统分析结果来确认菌株在分类学地位，发现LR863菌株为鼠李糖乳杆菌。该菌株在形态学及一般性质上的特征如下：1、菌体或菌落形态：菌体形态：菌体在显微镜下呈杆状。菌体成单、成对或成链，不形成芽孢，革兰氏染色阳性，无运动性，无鞭毛。菌落形态：固体培养基上形成明显菌落，直径在0.5-1mm之间，圆形，边缘整齐，白色不透明，表面光滑湿润。2、生理生化特征：氧化酶阴性，接触酶阴性。利用API50CH试剂验证此乳酸菌种的碳水化合物代谢性能。API50CH试剂可用来鉴定菌株在属或种上的差异。经由分析结果确认此乳酸菌种与鼠李糖乳杆菌的碳水化合物代谢活性相同。最适生长温度为37℃，兼性厌氧。不具有致病性，不产毒素。作为对上述技术方案的限定，所述鼠李糖乳杆菌具有对口腔病原微生物抑菌、杀菌的用途。作为对上述技术方案的限定，所述口腔病原微生物包括变异链球菌、戈登链球菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌、伴放线放线杆菌等。作为对上述技术方案的限定，所述鼠李糖乳杆菌具有防治牙周炎的用途。作为对上述技术方案的限定，所述鼠李糖乳杆菌具有防治龋齿的用途。本专利技术的鼠李糖乳杆菌，从健康口腔志愿者的口腔中分离得到，具有产细菌素、过氧化氢的特性，能够起到广谱抗菌、杀菌作用；其菌体具有较强的凝集能力，为乳酸菌在口腔环境中与其他微生物，尤其致病微生物共凝集提供了必要的条件；还具有较强的疏水性，为口腔中粘附和定植提供了有利条件；因此该鼠李糖乳杆菌对浮游状态的变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌等口腔致病微生物的生长有抑制作用，能有效降低戈登链球菌的数量，进而减少牙菌斑的形成，减少牙周致病菌滋生的温床，避免细菌产生的毒素对造成牙龈发炎，及牙龈下齿槽骨骨质的流失，减低牙周病发生率，在预防、减少或治疗龋齿、牙周炎的用途方面具有应用价值，还能帮助维持正常的口腔微生态菌群，保障口腔健康。同时，本专利技术还提供了一种鼠李糖乳杆菌制剂，该制剂包括如上所述的鼠李糖乳杆菌活菌菌体、鼠李糖乳杆菌死菌菌体、鼠李糖乳杆菌的代谢产物及胞内提取物中的至少一种。作为对上述技术方案的限定，所述鼠李糖乳杆菌制剂包括鼠李糖乳杆菌活菌冷冻干燥菌粉、鼠李糖乳杆菌死菌冷冻干燥菌粉、鼠李糖乳杆菌代谢产物冷冻干燥粉末、鼠李糖乳杆菌活菌及代谢产物冷冻干燥菌粉、鼠李糖乳杆菌死菌及代谢产物冷冻干燥菌粉。通常益生菌制剂需为活菌并在足够数量前提下才能发挥有益效果，本专利技术的鼠李糖乳杆菌，不仅其活菌具有对口腔病原微生物抑菌、杀菌作用，减少牙菌斑形成和降低龋齿、牙周炎等口腔疾病发生、发展的功效，其死菌同样具有抑菌、杀菌作用和防治口腔疾病的功效。分别由鼠李糖乳杆菌活菌菌体、鼠李糖乳杆菌死菌菌体、鼠李糖乳杆菌的代谢产物及胞内提取物中任一种或混合物形成的益生菌制剂，不受活菌数量及活性的限制，更利于在宿主体内发挥作用，是一款应用广泛、效果显著的口腔益生菌制剂。同时，本专利技术提供了上述鼠李糖乳杆菌制剂的用途，可用作液态食品、固态食品、胶状食品、口腔清洁用品和口腔治疗药品的添加剂。基于本专利技术鼠李糖乳杆菌的活菌、死菌均具有抑菌、杀菌作用和防治口腔疾病功效的优势，其使用形式广泛，可广泛应用于液态食品，如果汁、酸奶、茶饮料等；固态食品，如口含片、固体饮料、糖果、巧克力、饼干等；胶状食品，如果冻、口香糖、优格、布丁等；口腔清洁用品，如牙膏、漱口水等；和口腔治疗药品，如口含片、软膏等。综上所述，本专利技术的鼠李糖乳杆菌，菌株(Lactobacillusrhamnosus)LR863，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.14410，具有对变异链球菌、戈登链球菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌、伴放线放线杆菌等口腔病原微生物显著的抑菌、杀菌作用，和减少牙菌斑形成，降低龋齿、牙周炎等口腔疾病发生、发展的功效。本专利技术的鼠李糖乳杆菌制剂由活菌菌体、死菌菌体、代谢产物及胞内提取物中的至少一种制成，不受活菌数量及活性的限制，更利于在宿主体内发挥作用，是一款应用广泛、效果显著的口腔益生菌制剂，可用作广泛液态食品、固态食品、胶状食品、口腔清洁用品和口腔治疗药品的添加剂。附图说明图1：本专利技术实施例所述鼠李糖乳杆菌LR863活菌对五种口腔致病菌的共凝集能力；图2：本专利技术实施例所述鼠李糖乳杆菌LR863死菌对五种口腔致病菌的共凝集能力。具体实施方式下面将结合实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例一本实施例涉及本专利技术鼠李糖乳杆菌菌株的分离、纯培养和鉴定。添加碳酸钙的MRS固体培养基：葡萄糖20.0g；蛋白胨10.0g；牛肉浸粉10.0g；酵母浸粉5.0g；柠檬酸氢二铵2.0g；乙酸钠5.0g；磷酸氢二钾2.0g；硫酸镁0.58g；硫酸锰0.25g；吐温801.0mL；蒸馏水1000mL；调节pH6.2-6.4；再添加琼脂15.0g；碳酸钙5.0g，115℃灭菌20min。采集健康口腔志愿者的唾液和牙菌斑样本，加入无菌生理盐水制成1:10的样品匀液，充分震荡均匀，8000rpm离心5min，收集沉淀，加入适量生理盐水将沉淀充分混匀，将混匀后的悬浮液涂布于添加碳酸钙的MRS固本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌菌株(Lactobacillusrhamnosus)LR863，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14410。

【技术特征摘要】
1.一种鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌菌株(Lactobacillusrhamnosus)LR863，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.14410。2.根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌具有对口腔病原微生物抑菌、杀菌的用途。3.根据权利要求2所述的鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述口腔病原微生物包括变异链球菌、戈登链球菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌、伴放线放线杆菌。4.根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述鼠李糖乳杆菌具有防治牙周炎的用途。5.根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵林森，杨玉红，鄢梦洁，马新颖，齐世华，李华文，路江浩，崔文静，李玲，
申请(专利权)人：河北一然生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13