本发明专利技术公开了一株产细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌，命名为鼠李糖乳杆菌（
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体设及一株高产细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌及 其在制备抗高血压的发酵乳品中的应用。
技术介绍
乳酸菌是公认的安全级微生物，广泛应用于乳制品的发酵。牛乳是一种富含酪蛋 白而缺少游离氨基酸的环境，一些乳酸菌菌株为了适应运种特殊的生长环境，进化出一套 完整的蛋白酶系统，用来水解酪蛋白获得游离的氨基酸W供菌体生长使用。运种蛋白酶系 统包括S个主要组分：细胞被膜蛋白酶（Cell化velopeProteinase,CE巧，寡肤转运系统 和细胞内肤酶。其中，细胞被膜蛋白酶是催化水解酪蛋白的第一步，在整个蛋白酶系统中具 有核屯、作用，该酶在细胞内合成，经过分泌系统转运至胞外并且错定在菌体细胞壁上。细胞 被膜蛋白酶可W将牛乳中的酪蛋白降解为寡肤，寡肤再经由转运系统进入细胞内被肤酶降 解为游离的氨基酸。乳酸菌细胞被膜蛋白酶的合成受到培养基中氮源的调控，当培养基中 游离氨基酸丰富时，其合成被抑制，而当游离氨基酸非常贫乏时，细胞被膜蛋白酶将大量合 成。牛乳恰好是运种游离氨基酸贫乏的环境，可W刺激特定菌株合成大量的细胞被膜蛋白 酶。 血管紧张素转化酶（angiotensin-convertingenzyme,ACE)可W将无活性的十肤 血管紧张素I转变成血管收缩剂八肤血管紧张素II，同时使血管舒张九肤失活，进而使血 压升高。通过抑制血管紧张素转化酶的活性可W达到抗高血压的效果。近期研究表明，来 源于牛乳的短肤具有抑制血管紧张素转化酶的活性，进而达到抗高血压的效果，运种短肤 被称为生物活性肤。 利用具有细胞被膜蛋白酶活性的乳酸菌菌株发酵牛乳是获得生物活性肤的一种 经济适用的方法。 阳0化]鼠李糖乳杆菌是一类较早发现并应用的益生型乳酸菌，如上世纪80年代由美国 科学家从健康人肠道中分离的鼠李糖乳杆菌LGG，该菌株能够耐受消化道环境，并在肠道内 定殖，起到调节肠道菌群，预防和治疗腹泻，提高机体免疫力等作用。近年来，国内外对于鼠 李糖乳杆菌的研究主要集中于该菌株定殖于肠道细胞的粘附机制及其对免疫系统的调控。目前，国外已发表的产生细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌有分离自人阴道的鼠李 糖乳杆菌BGT10,然而因其分离生境的特定性，限制了该菌株的在食品领域的应用；此外报 道了一株产生细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌CECT287,其发酵牛乳72小时后产物对血管 紧张素转化酶活性最高抑制能力为47%，但由于该菌株发酵周期长且血管紧张素转化酶活 性抑制能力居中，从而对于该菌株应用于生产具有抗高血压的益生型发酵乳制品造成了一 定的阻碍。基于此，研发或筛选具有细胞被膜蛋白酶酶活力高，发酵周期短，产物对于血管 紧张素转化酶活性抑制能力强的鼠李糖乳杆菌成为亟待解决的课题。
技术实现思路
针对现有技术所述的鼠李糖乳杆菌细胞被膜蛋白酶酶活力较低，发酵周期长，产 物对于血管紧张素转化酶活性抑制能力较弱的问题，本专利技术的目的是提供一株高产细胞被 膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌及其在制备抗高血压的发酵乳品中的应用。 本专利技术所述的高产细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述菌株命名 为鼠李糖乳杆菌化actobacillus;rhamnosus)Rl，该菌株已于2015年07月6日保藏在"中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、"，保藏号为CGMCCNo. 11055。 上述鼠李糖乳杆菌化actobacillus;rhamnosus)Rl分离自新疆传统发酵酸奶中， 是一株能够在特定的化学合成培养基或原料乳中产生细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌，具 有鼠李糖乳杆菌的典型特征，即为：革兰氏阳性，兼性厌氧，无芽抱，不运动；菌落较小且大 小均一，边缘整齐；细胞呈短杆状，常3-5个成链；其生理生化特征是：过氧化氨酶阴性，VP 反应阴性，吗I噪反应阴性，上述鼠李糖乳杆菌CGMCCNo. 11055的生理生化特征详见表1。 表1鼠李糖乳杆菌CGMCCNo. 11055的生理生化特征 上述鼠李糖乳杆菌化actobaciIlus rhamnosus)RlCGMCC No.11055 生长溫度为 25-42°C，最适生长溫度为37°C。 上述鼠李糖乳杆菌化actobacillusrhamnosus)RlCGMCCNo. 11055 在MRS培养基 中生长，静置培养12小时后，菌体密度达到5. 32,抑值为4. 34。[001引上述MRS培养基的配方：膜蛋白腺10.Og,牛肉膏10.Og,酵母粉5g，葡萄糖20.Og, 巧樣酸S锭2.Og,硫酸儀0. 58g，硫酸儘0. 25g，乙酸钢3. 12g，憐酸氨二钢1. 63g，乙酸钟 2. 25g，吐溫-801.OmL,蒸馈水 1000血，115°C灭菌 30min。 通过在美国生物工程信息中屯、（化tionalCenterforBiotechnology In化rmation，NCBI)查阅国际相关的基因库，将本专利技术的鼠李糖乳杆菌化actobacillus rhamnosus)RlCGMCCNo. 1105516SrDNA基因序列与有关菌株的16SrDNA基因序列比较，虽 有相似性（如表2所示），但却不完全相同，说明本专利技术的菌株是首次分离鉴定，具有原创 性。 表 2 鼠李糖乳杆菌（Xactobacillus rhamnosus)R1CGMCCNo.11055 的 16SrDNA序列与GenBank提交菌株序列相似性比较 上述鼠李糖乳杆菌(Xactobacillus rhamnosus)R1CGMCCNo.11055在化学合成培 养基中37°C静置培养24小时，菌体密度可达到2. 85,抑值降至3. 95。检测细胞被膜蛋白 酶酶活最高达到200个酶活单位每毫克蛋白。 上述化学合成培养基配方为：葡萄糖lOg/l，乙酸钢5g/l，憐酸二氨钟3g/l，憐 酸氨二钟3g/L，屯水硫酸儀0. 2g/l，四水硫酸儘0. 05g/l，屯水硫酸亚铁0. 02g/l，丙氨酸 0.Ig/L精氨酸0.IgA,天冬氨酸0. 2g/l，天冬酷胺0. 2g/l，半脫氨酸0. 2g/l，谷氨酷胺 0. 2g/l，谷氨酸0. 2g/l，甘氨酸0.Ig/l，组氨酸0.Ig/l，异亮氨酸0.Ig/l，亮氨酸0.Ig/L， 赖氨酸0.Ig/L，苯丙氨酸0.Ig/l，甲硫氨酸0.Ig/l，脯氨酸0.Ig/L，丝氨酸0.Ig/L，苏氨酸 0.Ig/l，酪氨酸0.Ig/L，色氨酸0.Ig/l，鄉氨酸0.Ig/l，对氨基苯甲酸0.Olg/!,D-生物素 0. 01g/l，VBl0. 001g/l，VB6 0. 002g/l，VB3 0. 001g/l，VB5 0.OOlg/l，叶酸 0. 001g/L，VB12 0.OOlg/l，VB2 0.OOlg/l，腺嚷岭0.01邑/1，鸟嚷岭0.01邑/1，尿喀晚0.01邑/1，黄嚷岭0.01邑/ L，胸腺喀晚0.Olg/L，吐溫801.Oml/L，自然抑值，115°C灭菌30分钟。 本专利技术所述的高产细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌在制备抗高血压的发酵乳品 中的应用。 上述鼠李糖乳杆菌化actobacillusrhamnosus)Rl在化学合成培养基或牛乳基质 中生长能产生细胞被膜蛋白酶，将其W体积比为2本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株高产细胞被膜蛋白酶的鼠李糖乳杆菌，其特征在于：所述菌株命名为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)R1，该菌株已于2015年07月6日保藏在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏号为CGMCC No.11055。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孔健，郭婷婷，欧阳旭东，辛永平，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。